препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок

Формула изобретения

Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок, содержащий два антибиотика, один из которых относится к группе амфениколов, отличающийся тем, что в качестве антибиотиков используются флорфеникол и линкомицина гидрохлорид, и он дополнительно содержит основу в форме пенного аэрозоля при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Флорфеникол	1,0-3,0
Линкомицина гидрохлорид	1,0-3,0
Диметилсульфоксид	10,0
Глицерин	10,0
1,2 Пропиленгликоль	10,0
Масло подсолнечное рафинированное	12,5
Воск эмульсионный	1,0
Кислота стеариновая	0,9
Вода для инъекций	До 100%

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к препаратам для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок.

Практика эксплуатации свиноводческих комплексов промышленного типа показала, что при круглогодовом безвыгульном содержании животных, концентратном нормированном типе кормления и размещении большого поголовья на ограниченных площадях часто регистрируются послеродовые болезни свиноматок, протекающие в форме синдрома метрит-мастит-агалактии (ММА) и послеродового гнойно-катарального эндометрита, приводящие к снижению или прекращению секреции молока, высокой заболеваемости и гибели новорожденных поросят, достигающей 40-50%, а в отдельных случаях - до 70-80% [Гридяев Е.Л. Роль микробного фактора и резистентности свиней в этиологии послеродовых болезней и средства их профилактики // Автореф. дис. канд. вет. наук. Воронеж, 1987. - 21 с.; Сартасов Е.Л. Применение дипролипамида для профилактики послеродовых болезней у свиноматок // Автореф. дис. канд. вет. наук. - Воронеж, 2001.; Klopfenstein С. et. al. Duseasis of the Mammary Glands and Lactation Problems: Diseasis of swine. - Ames, Iowa USA. - 2000. - P.833-861].

Установлено, что факторами, способствующими инфицированию половых органов и развитию в них патологического процесса воспалительного характера, являются эндокринные нарушения у супоросных свиноматок, ослабление сократительной функции матки и снижение ее тонуса до, во время и после опороса, приводящие к первичной слабости родов, послеродовой атонии матки и ее субинволюции. При этом создаются условия для проникновения в полость матки условно-патогенной микрофлоры и развития воспалительного процесса.

В связи с тем, что важное значение в этиологии послеродового эндометрита имеет микробный фактор, для лечения и профилактики данного заболевания рекомендуется использовать препараты антимикробного действия. Однако выбор лечебно-профилактического средства осложняется современными отрицательными эпидемиологическими тенденциями: рост резистентных штаммов, полирезистентность к нескольким действующим веществам [Конина А.А. Послеродовые эндометриты свиноматок (клинический и микробиологический аспекты) // Перспективы развития науки в институте ветеринарной медицины ОмГАУ / Сб. науч. тр. - Омск, 2002. - С.119-120]. Эти тенденции необходимо учитывать при создании новых лекарственных препаратов, а именно, применять субстанции, ранее не использованные при лечении послеродовых заболеваний, предлагать оригинальные лекарственные формы, повышающие эффективность лечения.

Для лечения и профилактики послеродовых болезней у свиноматок применяют препараты антимикробного действия, включающие антибиотики, сульфаниламиды, нитрофурановые, препараты хиноксалинового ряда, фторхинолоны и другие средства. Но не все они дают ожидаемый эффект. Это, прежде всего, объясняется снижением чувствительности микрофлоры матки к препаратам. В связи с чем возникает необходимость создания новых ротационных комплексных препаратов в оригинальной лекарственной форме.

Известно противовоспалительное и ранозаживляющее средство, наносимое в виде пены на поврежденные ткани и представляющее собой комбинированный препарат, в состав которого входят (мас.%) каротинсодержащий препарат - 20,0-40,0, нитазол - 1,0-3,0, метилурацил - 1,0-3,0, твин-80 - 2,0-2,8, спирты синтетические высшие жирные первичные фракции C₁₆-C₂₁ - 4,2-5,0, неводный гидрофильный растворитель - 6,0-10,0, хладон 12 - 10,0-20,0, вода очищенная - до 100,0 [RU 2116784 C1, 10.08.1998].

Для лечения лучевых поражений, химических и термических ожогов используется аэрозоль «Профезоль - пенный» следующего состава: фенольный гидрофобный препарат прополиса - 0,25 г, спирт этиловый 95% - 2,5 г, препарат ОС-20 - 0,625 г (или проксанол 268 - 4,0 г), вода очищенная - 21,0 г, хладон 12 - 5,0 г [А.И.Тихонов, Е.А.Батрак, Л.В.Деримедведь. Экспериментальное изучение радиозащитных свойств препарата с фенольным гидрофобным препаратом прополиса «Профезоль - пенный» // Провизор. - 1999. - № 7. - С.45-46].

К причинам, препятствующим в аналогах получению технического результата, достигаемого в заявляемом изобретении, можно отнести то, что хотя в их состав входят антибактериальные вещества, но они предназначены для лечения ран и ожогов в гуманной медицине.

Известно лекарственное средство «Аэрозоль нитазола» [Проспект «Аэрозоль нитазола» - М.: ЦБНТИ, Минмедпром, 1985], применяемое для лечения острого и хронического трихомониаза и включающее нитазол - 1,02 г, масло оливковое - 6,783 г, эмульсионные воски - 2,397 г, глицерин - 2,55 г, спирт 95% - 2,04, вода очищенная - 36,21 г, хладон-12 - 9,0 г.

Однако, во-первых, качественный и количественный состав компонентов данного лекарственного средства не позволяет достигнуть высокого терапевтического уровня при лечении и профилактике послеродового эндометрита и ММА у свиноматок, и, во-вторых, в ветеринарной медицине препарат применяется для лечения коров при остром послеродовом эндометрите [RU 2181044 C1, 04.10.2002].

Йодопен - препарат для профилактики и лечения воспалительных процессов матки, в том числе острого послеродового эндометрита у коров и свиноматок, содержащий (мас.%): активно действующее вещество - комплекс йода с поливинилпирролидоном (10-20) и пенообразующую основу, включающую полиэтиленгликоль (30-36), оксиэтилированные жирные спирты (0,6-1,2), стеарат кальция (0,8-1,2), лимонную кислоту (10-14), бикарбонат натрия (10-20) и лактозу (остальное) [RU 2155046 C1, 27.08.2000].

Главный недостаток йодопена заключается в определенных трудностях при введении в полость матки суппозиториев при лечении острых послеродовых эндометритов у коров и, особенно, у свиноматок, а также невозможностью его внутриматочного введения более двух раз при терапии эндометрита, в связи с чем понижается терапевтическая эффективность.

Прототипом технического решения является лефур - комплексный антибактериальный препарат для лечения и профилактики острых послеродовых эндометритов сельскохозяйственных животных, лечения хронических эндометритов, а также синдрома метрит-мастит-агалактии у свиней, содержащий в 1 мл 10 мг левомицетина и 0,5 мг фурагина [Ветеринарные препараты в России: Справочник в 2 томах. Т.1. / И.Ф.Кленова, К.Л.Мальцев, Н.А.Яременко, И.А.Архипов. - М.: Сельхозиздат, 2004. - С.482].

К причинам, препятствующим в прототипе получению технического результата, достигаемого в заявленном изобретении, можно отнести то, что установленное в последние годы токсическое влияние левомицетина (хлорамфеникола) на гемопоэз и иммунную систему и широкое распространение левомицетинрезистентных микроорганизмов в значительной степени ограничили его применение. В то время, как в заявляемом средстве этот антибактериальный компонент заменен на его аналог - флорфеникол, синтезированный путем химической модификации молекулы хлорамфеникола и представляющий собой низкомолекулярный антибиотик, состоящий из ароматического кольца и короткой боковой цепи [RU 2071468 C1, 10.01.1997]. Флорфеникол - антибиотик широкого спектра действия, который, обладая высокой антибактериальной активностью, характеризуется отсутствием этих побочных эффектов [RU 2397753 C1, 27.08.2010].

Технический результат - повышение эффективности профилактики и лечения эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок.

Технический результат достигается использованием препарата, состоящего из следующих компонентов, мас.%:

Флорфеникол - 1,0-3,0

Линкомицина гидрохлорид - 1,0-3,0

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Оптимальным является следующее соотношение компонентов, мас.%:

Флорфеникол - 2,5

Линкомицина гидрохлорид - 1,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Обоснованность этой комбинации связана с тем, что в лекарственной форме одновременно сочетаются два бактериостатических агента, которые в высоких концентрациях проявляют бактерицидное действие. Это обеспечивает синергидный эффект за счет того, что два антибиотика блокируют различные стадии белкового синтеза в бактериальной клетке. Флорфеникол, синтезированный путем химической модификации молекулы хлорамфеникола, низкомолекулярный антибиотик, состоящий из ароматического кольца и короткой боковой цепи [RU 2071468 C1, 10.01.1997]. Он обратимо связывается с 50S-субъединицей рибосом в участке, близком, но не идентичном тому, с которым связываются линкозамиды, в частности, линкомицин. Местом действия флорфеникола является А-участок (акцепторный участок) 50S-субчастицы рибосом, где антибиотик конкурирует с аминоацильным концом молекулы аминоацил-тРНК, препятствуя ее вхождению в А-участок, что сопровождается подавлением биосинтеза белка. Местом действия линкомицина является P-участок (донорный участок) 50S-субчастицы рибосом, так называемый пептидил-тРНК-связывающий участок. Линкомицин делает ассоциацию пептидил-тРНК с P-участком рибосом более прочной, что способствует ингибированию сборки белковой молекулы. Такой двунаправленный механизм на разные участки РНК микробной клетки усиливает противомикробный эффект препарата.

[http://medbiol.ru/medbiol/ribosoma/0000ef34.htm; Рациональная антимикробная фармакотерапия: Рук. для практикующих врачей / Под общ. ред. В.П.Яковлева, С.В.Яковлева. - М.: Литтерра, 2003. - 1008 с. - (Рациональная фармакотерапия: Сер. рук. для практикующих врачей; Т.2); С.М.Навашин, И.П.Фомина. Рациональная антибиотикотерапия (справочник). - М.: Медицина, 1982. - 496 с.].

Имеющиеся в заявляемом средстве синергический характер антибактериального действия, а также противовоспалительные и регенеративные свойства обеспечивают высокий профилактический и терапевтический эффект, хороший отток из полости матки воспалительного экссудата и сокращение количества дней бесплодия.

Сочетанное применение флорфеникола и линкомицина обеспечивает повышение эффективности лечения и профилактики эндометрита и синдрома ММА у свиноматок, быстрое выздоровление больных животных, снижение расхода активнодействующих веществ и их побочного действия на организм животных.

Как известно, основа препарата должна обеспечивать равномерную адсорбцию и постепенное высвобождение активнодействующих веществ. Препарат должен быть малотоксичным и безвредным для животных и человека, с достаточно длительным сроком хранения и удобным для применения в ветеринарной практике.

Лекарственная форма в виде пены обеспечивает экономичное дозирование, лучший контакт со слизистой оболочкой матки и придает лекарству пролонгированное действие. Под влиянием температуры тела пена увеличивается в объеме, заполняет все свободные места и каналы в полости матки. Кожа и слизистые не испытывают давления со стороны пены. Поэтому данная лекарственная форма предпочтительна при эндометритах, так как оказывает щадящее действие и снижает болевой синдром при контакте с раневой поверхностью. Пена разносит действующие начала по всей полости матки, способствует проникновению их в глубокие слои эндометрия, механически очищает ее поверхность от остатков плаценты и воспалительного экссудата.

Основной целью сочетанного применения флорфеникола и линкомицина является расширение спектра антибактериального действия, восполнение пробелов в спектре каждого из компонентов комбинации и предупреждение формирования устойчивости микроорганизмов.

Флорфеникол - (D-(трео)-1-п-метилсульфонил-2-дихлор-ацетамидо-3-фтор-1-пропанола) или 2,2-dichloro-N-((1R,2S)-3-fluoro-1-hydroxy-1-(4-(methylsulfonyl)phenyl)propan-2-yl)ethanamide, представляющий собой белый или не совсем белый прозрачный порошок. Флорфеникол является антибиотиком широкого спектра действия; эффективен в отношении многих грамположительных и грамотрицательных бактерий, риккетсий, спирохет, действует на штаммы бактерий, устойчивые к пенициллину, стрептомицину, сульфаниламидам. В обычных дозах действует бактериостатически. Слабо активен в отношении кислотоустойчивых бактерий, синегнойной палочки, клостридий и простейших. Механизм антимикробного действия флорфеникола связан с нарушением синтеза белков микроорганизмов [Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2004. - 944 с.].

Линкомицина гидрохлорид (Lincomycini hydrochloridum) - антибиотик, продуцируемый Streptomyces lincolniensis или другими родственными актиномицетами [Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2004. - 944 с.]. Активен в отношении грамположительных кокков (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., в т.ч. Streptococcus pneumoniae); Haemophilus influenzae; Bacillus anthracis, Mycoplasma spp., Bacteroides spp., Corynebacterium diphtheriae, Clostridium perfringens, Clostridium tetani. Эффективен в отношении Staphylococcus spp., устойчивых к пенициллину, тетрациклинам, хлорамфениколу, стрептомицину, цефалоспоринам (30% Staphylococcus spp., устойчивых к эритромицину, имеют перекрестную устойчивость к линкомицину). Не действует на Enterococcus spp.(в т.ч. Enterococcus faecalis), грамотрицательные микроорганизмы, грибы, вирусы, простейшие; уступает по активности эритромицину в отношении спорообразующих анаэробов, Neisseria spp., Corynebacterium spp. [Клиническая фармакология / под ред. Кукеса В.Г. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 944 с.].

Диметилсульфоксид - бесцветная прозрачная жидкость или бесцветные кристаллы (плавящиеся при температуре +18,5°C) со специфическим запахом (чем-то напоминающим запах чеснока). Гигроскопичен. Смешивается во всех соотношениях с водой и спиртом. Используется для местного применения при воспалительных и некоторых других заболеваниях (главным образом при заболеваниях опорно-двигательного аппарата). Препарат обладает способностью проникать через биологические мембраны, в том числе через кожные барьеры. Основанием для применения, при воспалительных заболеваниях опорно-двигательного аппарата является его анальгетическое и противовоспалительное действие. Препарат обладает умеренным антисептическим и фибринолитическим эффектом. Он также усиливает проникновение через кожу ряда лекарственных веществ (пенетрирующий эффект) [М.Д.Машковский. Лекарственные средства. - М.: РИА «Новая волна»: Издатель Умеренков, 2008. - С.180].

Глицерин (СН₂ОНСНОНСН₂ОН) - это трехатомный спирт; сиропообразная бесцветная вязкая жидкость сладкого вкуса, без запаха. Глицерин смешивается во всех отношениях с водой, этиловым или метиловым спиртом, анилином, ацетоном, растворяется в смеси CHCl₃ и C₂H₅OH (1:1), в абсолютных C₂H₅OH и (С₂Н ₅)₂O (2:1) и других. Фармакологическое действие: слабительное, дегидратирующее, дерматопротективное. При ректальном использовании оказывает легкое раздражающее действие на слизистую оболочку прямой кишки и рефлекторно стимулирует сократительную способность кишечника, оказывая слабительное действие. Оказывает смягчающее и дерматопротекторное действие, обладает высокими гигроскопичными и смазывающими свойствами. При нанесении на кожу активирует в ней обменные процессы. Глицерин используют в фармацевтической практике в качестве основы для приготовления мазей и других лекарственных форм [Промышленная технология лекарств: Учебное пособие в 2 томах. Т.2. / Под ред. проф. В.И.Чуешова. - X.: Основа; Издательство УкрФА, 1999. - С.55].

Пропиленгликоль - двухатомный спирт алифатического ряда, вязкая жидкость без цвета и запаха, сладковатая на вкус. Используется как гигроскопическое вещество и как несущий элемент или растворитель в лечебных жидкостях и мазях. Пропиленгликоль, как хороший растворитель природных и синтетических веществ он нашел применение при изготовлении различных тинктур, растворов для инъекций, мазей, протираний и.т.д. Пропиленгликоль входит в противовоспалительные и бактерицидные составы для лечения заболеваний носовой полости, свищей, сенной лихорадки и др., а также в составы для заживления ран после глубоких ожогов или действия химических продуктов. При применении пропиленгликоля в медицинских целях учитываются его консервирующие, стерилизующие, бактерицидные, стабилизирующие, смазочные свойства, нетоксичность, свойства растворителя [Промышленная технология лекарств: Учебное пособие в 2 томах. Т.2. / Под ред. проф. В.И.Чуешова. - X.: Основа; Издательство УкрФА, 1999. - С.56].

Известно использование воска эмульсионного в качестве эмульгатора и стабилизатора косметических кремов, фармацевтических мазей, пластификаторов [Химическая энциклопедия. М.: Изд. «Сов. Энциклопедия», 1989, т.1, С.584-585, RU 2350332 C1, 27.03.2009].

Стеариновая кислота входит в состав глицеридов всех животных и растительных жиров и масел в количестве от 1 до 8%. В свободном виде содержится в секрете сальных желез. В косметических композициях используется при частичной нейтрализации щелочами или триэтаноламином как эмульгирующий, солюбилизирующий и структурообразующий, загущающий компонент. Стеариновую кислоту и ее эфиры используют при получении косметических средств. Она повышает устойчивость кожи к внешним неблагоприятным факторам, улучшает ее эластичность [Химический энциклопедический словарь. М.: Изд. «Сов. Энциклопедия», 1983, С.541].

В качестве жирового компонента используют натуральное подсолнечное масло (можно оливковое, кукурузное).

Воду для инъекций получают дистилляцией или осмосом. Является апирогенной, не содержит антимикробных веществ и других добавок, максимально допустимый уровень содержания бактериальных эндотоксинов 0,25 Едэ/мл [Фармакопейная статья ФС 42-2620-97, Министерство здравоохранения и медицинской промышленности Российской Федерации, Фармакопейный государственный комитет, утверждена 11.03.97 - 4 с.].

Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок перед применением подогревают при температуре 45±5°C и интенсивно встряхивают. Нажимая на распылительную головку, вводят лекарственный препарат в полость матки с помощью катетера для искусственного осеменения, закрепленного на носике головки. Препарат вводят внутриматочно по 60 г (1 доза) на животное с интервалом 24 часа с лечебной целью в течение 2-3 дней, а с профилактической целью после оказания родовспоможения или оперативного отделения последа - однократно.

Изготавливается препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок следующим образом. В реактор с контактным термометром и контурным отоплением и охлаждением до температуры (40±5°)C роторно-кавитационной установки (РКУ) загружается рецептурное количество воды и диметилсульфоксида. Затем в реактор вносят последовательно, с интервалом в 10 минут, флорфеникол и линкомицина гидрохлорид. Смешивание проводят при температуре 60±5°C до полного растворения компонентов.

В плавильный котел, обогреваемый парами, снабженный высокооборотистой мешалкой, помещают растительное масло, глицерин, пропиленгликоль и вносят тугоплавкие компоненты: воск эмульсионный и стеариновую кислоту. Смесь расплавляют при температуре 65-70°C.

Ввод жировой основы из плавильного котла осуществляется непосредственно в камеру озвучивания в процессе прохождения через нее смеси водного раствора и жировой основы. Из камеры озвучивания готовый препарат подается в бункер для фасовки. Расфасовывается препарат в алюминиевые аэрозольные баллоны, которые обкатываются и заправляются расчетным количеством хладона 12 или 134а.

Сущность технического решения поясняется примерами.

Пример 1. Изучение антимикробных свойств и определение оптимального соотношения компонентов в препарате для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок

Изучены антимикробные свойства препарата. Выявлено оптимальное количественное содержание флорфеникола и линкомицина в опытах in vitro. В модельных опытах установлено, что препарат обладает широким спектром антимикробного действия в отношении испытанных культур микроорганизмов.

1.1. Опыты in vitro

Изучение антимикробной активности и соотношения флорфеникола и линкомицина в препарате для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок проводилось in vitro методом серийных разведений. В качестве тест-культур использовали референтные и полевые (патогенные) штаммы микроорганизмов, типированных по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим и серологическим свойствам. Соотношение флорфеникола и линкомицина в препарате для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок изучали в следующих комбинациях:

Комбинация 1. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:

Флорфеникол - 3,0

Линкомицина гидрохлорид - 1,0

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Комбинация 2. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:

Флорфеникол - 2,5

Линкомицина гидрохлорид - 1,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Комбинация 3. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:

Флорфеникол - 2,0

Линкомицина гидрохлорид - 2,0

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Комбинация 4. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:

Флорфеникол - 1,5

Линкомицина гидрохлорид - 2,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Комбинация 5. Состав препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок; компоненты, мас.%:

Флорфеникол - 1,0

Линкомицина гидрохлорид - 3,0

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Антимикробную активность различных комбинаций состава препарата сравнивали с антимикробной активностью флорфеникола и линкомицина гидрохлорида.

Минимальную бактериостатическую концентрацию (МБсК) изучаемых препаратов определяли методом серийных разведений в мясопептонном бульоне (МПБ); минимальную бактерицидную концентрацию - путем высева из пробирок с прозрачной средой на плотные питательные среды (МПА), не содержащие препарат.

В качестве жидкой питательной среды применяли мясопептонный бульон. При определении чувствительности стрептококков к среде добавляли 1% глюкозы.

Содержание микробных клеток в одном мл среды составляло 500 тысяч.

Посевы инкубировали при 37°C в течение 18-20 часов. По истечении срока инкубации учитывали результат.

Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.

Исследованиями установлено, что флорфеникол имеет высокую антимикробную активность по отношению к Е. coli 26, Staph. aureus 209P и Enterococcus faecalis - 3,9-7,8 мкг/мл (табл.1).

Минимальная подавляющая концентрация (МПК) линкомицина по отношению к Staph. aureus 209P составляла 62,5 мкг/мл, к Е. coli 26 и Enterococcus faecalis МПК - 125,0 мкг/мл.

МПК композиций 1 и 2 в отношении Е. coli по сравнению с таковой у флорфеникола (7,8 мкг/мл) не изменилась, антимикробная активность композиций 3 и 4 (15,6 мкг/мл) снизилась в 2 раза, а композиции 5 - в 8 раз. По сравнению с активностью линкомицина (125,0 мкг/мл) антимикробная активность возросла в 16 раз у композиций 1 и 2, в 8 раз - у композиций 3 и 4, в 2 раза - у композиции 5. Совместное применение флорфеникола и линкомицина позволило снизить МПК в отношении данной культуры для флорфеникола в композициях 1 и 4 до 5,85 мкг/мл (в 1,3 раза), для композиции 2 - до 4,88 мкг/мл (в 1,6 раза). Для линкомицина снижение МПК было для всех композиций, хотя и в разной степени (в 64-43-16-12,8-2,7 раза).

В отношении Staph. aureus 209P МПК снизилась для композиций 1 и 3 до 1,95 мкг/мл (в 2 раза), для композиции 2 - до 0,98 мкг/мл (в 4 раза), для композиции 4 осталась неизменной, а для композиции 5 - возросла до 7,8 мкг/мл (в 2 раза). По сравнению с активностью линкомицина (62,5 мкг/мл) антимикробная активность возросла в 32 раза у композиций 1 и 3, в 64 раза - у композиции 2, в 16 раз - у композиции 4 и в 8 раз - у композиции 5.

Таблица 1-3
Антимикробная активность (МБсК) флорфеникола, линкомицина и различных композиций препарата, мкг/мл
Композиция	Ф	Л	По ДВ	В пересчете на
Ф	Л
Е.coli 26
К1	7,8	125,0	7,8	5,85	1,95
К2	7,8	4,88	2,92
К3	15,6	7,8	7,8
К4	15,6	5,85	9,75
К5	62,5	15,6	46,9
Staph. aureus 209P
К1	3,9	62,5	1,95	1,46	0,49
К2	0,98	0,61	0,37
К3	1,95	0,98	0,98
К4	3,9	1,46	2,44
К5	7,8	1,95	5,85
Enterococcus faecalis (п)
К1	7,8	125,0	3,9	2,93	0,97
К2	3,9	2,44	1,46
К3	7,8	3,9	3,9
К4	15,6	5,85	9,75
К5	31,25	7,81	23,44
Обозначения: Ф - флорфеникол; Л - линкомицин; К1 - композиция 1 (3:1); К2 - композиция 2 (2,5:1,5); К3 - композиция 3 (2:2); К4 - композиция 4 (1,5:2,5); К5 - композиция 5 (1:3)

Совместное применение флорфеникола и линкомицина позволило снизить МПК в отношении данной культуры для флорфеникола в композициях 1 и 4 до 1,46 мкг/мл (в 2,7 раза), для композиции 2 - до 0,61 мкг/мл (в 6,4 раза), для композиции 3 - до 0,98 мкг/мл (4 раза) и для композиции 5 - до 1,95 мкг/мл (в 2 раза). Для линкомицина снижение МПК было для всех композиций, хотя и в разной степени (в 128-169-64-26-11 раз).

По отношению с активностью флорфеникола в отношении Enterococcus faecalis МПК снизилась для композиции 1 и 2 до 3,9 мкг/мл (в 2 раза), для композиции 3 не изменилась, для композиции 4 и 5 - возросла соответственно до 15,6 и 31,25 мкг/мл (в 2 и 4 раза). По сравнению с активностью линкомицина (125,0 мкг/мл) антимикробная активность возросла в 32 раза у композиций 1 и 2, в 16 раз - у композиции 3, в 8 раз - у композиции 4 и в 4 раза - у композиции 5.

Совместное применение флорфеникола и линкомицина позволило снизить МПК в отношении данной культуры для флорфеникола в композициях 1-4 соответственно до 2,93 мкг/мл (в 2,7 раза); 2,44 мкг/мл (в 3,2 раза); до 3,9 мкг/мл (в 2 раза); до 5,85 мкг/мл (в 1,3 раза), а для композиции 5 - МПК не изменилась. Для линкомицина усиление антимикробной активности в ряду композиций происходило следующим образом: К5 К4 К3 К2 К1 (23,44 9,75 3,9 1,46 0,97 мкг/мл).

На основании полученных данных установлено, что наиболее выраженным антимикробным действием обладает композиция 2. Совместное применение флорфеникола и линкомицина в различных соотношениях позволило снизить минимальную подавляющую концентрацию в отношении изученных культур, что свидетельствует о синергическом действии составляющих компонентов.

1.2. Антимикробная активность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок

Согласно данным, представленным в таблице 4, препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Флорфеникол - 2,5

Линкомицина гидрохлорид - 1,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

обладает выраженными антимикробными свойствами. Бактериостатическая концентрация для кокковой микрофлоры составила 0,98-7,8 мкг/мл. Активность препарата в отношении музейных штаммов эшерихий была достаточно высокой - 7,8 мкг/мл, в отношении полевых снижалась до 7,8-31,2 мкг/мл. Более устойчивыми к препарату оказались Strept. porcinius, МБцК к которым составила 15,6 мкг/мл, при МБсК - 3,9 мкг/мл и Enterococcus faecalis, у которых данные показатели были соответственно 31,2 и 7,8 мкг/мл.

Бактерицидное действие препарата в отношении изученных культур превышало бактериостатическое соответственно в 2-4 раза.

Таблица 4
Антимикробная активность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Культура микроорганизмов	МБсК, мкг/мл	МБцК, мкг/мл
Escherichia coli 26	7,8	15,6
Escherichia coli 113-3	7,8	15,6
Escherichia coli IV(049) (п)	31,2	62,5
Escherichia coli К 88 (п)	15,6	31,2
Escherichia coli A20 (п)	7,8	15,6
Staph. aureus 209P	0,98	3,9
Staph. aureus (п)	7,8	15,6
Staph. cowan-I	1,56	6,25
Enterococcus faecalis (п)	7,8	31,2
Strept. Porcinius (п)	3,9	15,6

Таким образом, исследования показали, что препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок обладает широким спектром антимикробного действия, бактерицидная активность которого составляет от 3,9 до 62,5 мкг/мл.

Пример 2. Изучение эффективности лечения гнойно-катарального эндометрита у свиноматок.

Изучение эффективности применения препарата для лечения гнойно-катарального эндометрита у свиноматок проведены в двух сериях опытов.

Диагноз на острый послеродовый гнойно-катаральный эндометрит устанавливали на основании данных анамнеза, результатов клинического и акушерско-гинекологического исследований.

Первый опыт проведен в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 185-210 кг. Второй опыт проведен ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 170-230 кг.

Свиноматки, имевшие послеродовые осложнения, протекающие в форме острого послеродового гнойно-катарального эндометрита, после постановки диагноза (1-2 сутки после опороса) были разделены по принципу аналогов с учетом общего состояния и находящихся в одинаковых условиях содержания и кормления на две группы.

Животным первой группы (контроль) с терапевтической целью внутриматочно с помощью шприца Жанэ и катетера или ПОС-5 вводили энроцид в соответствии с инструкцией по применению.

Второй группе свиноматок (опытная группа) вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозе 60 г/животное при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Флорфеникол - 2,5

Линкомицина гидрохлорид - 1,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

У всех свиноматок через одни, двое, трое суток и последующие дни (до выздоровления) после введения препаратов учитывали общее состояние животных, поведение, прием корма и воды, температуру тела, частоту пульса и дыхания, состояние половых органов, характер и количество экссудата, выделяемого из половых органов.

При отсутствии терапевтического эффекта после однократного применения внутриматочное введение препаратов повторяли 1-2 раза с интервалом 24 часа.

Критерием признаков клинического выздоровления считали: улучшение общего состояния свиноматок, понижение температуры тела до физиологической нормы, восстановление аппетита, отсутствие воспалительного процесса наружных половых органов и прекращение выделений из гениталий.

Результаты опытов представлены в таблицах 5-6.

Терапевтический эффект препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в первом опыте после однократного внутриматочного введения составил 61,3%, после двукратного - 93,5%, после трехкратного введения - 100%, что в сравнении с контролем выше соответственно на 23,8, 39,3 и 25,0% (табл.5). При этом кратность введения заявленного препарата составила 1,45±0,11 против 1,78±0,21 (контроль).

Таблица 5
Эффективность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок при остром гнойно-катаральном эндометрите в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской обл.
Препарат, группа животных	Терапевтический эффект, кратность введения
однократное	двукратное	трехкратное
гол.	%	гол.	%	гол.	%
Энроцид (n=24)	9	37,5	13	54,2	18	75,0
Заявленный препарат (n=31)	19	61,3	29	93,5	31	100,0

Во втором опыте терапевтическая эффективность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок составила 96,8% при кратности введения 1,23±0,09 раза (табл.6). При использовании базового варианта (энроцид) терапевтический эффект составил 88,0% при кратности введения 1,41±0,14, при этом по опытной группе кратность введения препарата была ниже в сравнении с контрольной группой на 12,8%, а терапевтическая эффективность была выше на 8,8%.

Таблица 6
Эффективность заявленного препарата при остром гнойно-катаральном. эндометрите у свиноматок в ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области
Препарат	Количество обработанных животных, гол.	Кратность введения препарата	Терапевтическая эффективность, %
Заявленный препарат	25	1,23±0,09	96,8
Энроцид	31	1,41±0,14	88,0

Следует отметить, что терапевтический эффект после однократного внутриматочного введения заявленного препарата свиноматкам в дозе 60 г/животное при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометрите составил 77,4%, после двукратного - 93,5%, после трехкратного - 96,8%, что в сравнении с применением энроцида (60,0, 80,0 и 88,0%) оказалось выше на 17,4-13,5-8,8%.

Пример 2. Изучение эффективности лечения синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок.

Изучение эффективности применения препарата для лечения метрит-мастит-агалактии у свиноматок проведены в двух сериях опытов.

Диагноз на метрит-мастит-агалактию устанавливали на основании данных анамнеза, результатов клинического и акушерско-гинекологического исследований.

Первый опыт проведен в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-5 опоросам с массой тела 190-220 кг. Второй опыт - в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 180-200 кг.

Свиноматки, имевшие послеродовые осложнения, протекающие в форме метрит-мастит-агалактии (ММА), после постановки диагноза (1-2 сутки после опороса) были разделены по принципу аналогов с учетом общего состояния и находящихся в одинаковых условиях содержания и кормления на две группы.

Животным первой группы (контроль) с терапевтической целью внутриматочно с помощью шприца Жанэ и катетера или ПОС-5 вводили энроцид в соответствии с инструкцией по применению.

Второй группе свиноматок (опытная группа) вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозе 60 г/животное при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Флорфеникол - 2,5

Линкомицина гидрохлорид - 1,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

У всех свиноматок через одни, двое, трое суток и последующие дни (до выздоровления) после введения препаратов учитывали общее состояние животных, поведение, прием корма и воды, температуру тела, частоту пульса и дыхания, состояние половых органов, характер и количество экссудата, выделяемого из половых органов.

При отсутствии терапевтического эффекта после однократного применения внутриматочное введение препаратов повторяли 1-2 раза с интервалом 24 часа.

Критерием признаков клинического выздоровления считали: улучшение общего состояния свиноматок, понижение температуры тела до физиологической нормы, восстановление аппетита, отсутствие воспалительного процесса наружных половых органов и прекращение выделений из гениталий.

Результаты опытов представлены в таблицах 7-8.

При лечении свиноматок заявленным препаратом в первом опыте кратность введения составила 1,55±0,20 раза и терапевтическая эффективность - 90,5% (табл.7).

Таблица 7
Эффективность заявленного препарата при метрит-мастит-агалактии у свиноматок в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области
Препарат	Количество обработанных животных, гол.	Кратность введения препарата	Терапевтическая эффективность, %
Заявленный препарат	63	1,55±0,20	90,5
Энроцид	49	2,00±0,30	81,6

При использовании базового варианта (энроцид) кратность введения составила 2,00±0,30, а терапевтический эффект - 81,6%, при этом по опытной группе кратность введения препарата была ниже в сравнении с контрольной группой на 22,5%, а терапевтическая эффективность была выше на 8,9%.

В дополнение следует сказать, что терапевтический эффект после однократного внутриматочного введения заявленного препарата свиноматкам в дозе 60 г/животное при ММА составил 68,3%, после двукратного - 82,5%, после трехкратного - 90,5%, что в сравнении с применением энроцида (51,0, 63,3 и 81,6%) оказалось выше на 17,3-19,2-8,9%.

Во втором опыте лечебный эффект заявленного препарата при метрит-мастит-агалактии после однократного внутриматочного введения свиноматкам составил 63,4%, после двукратного - 88,9% (табл.8). Эффективность заявленного препарата в сравнении с базовым препаратом была выше на 32,4% при однократном введении, при двукратном - на 26,8%.

Таблица 8
Эффективность применения препарата для лечения метрит-мастит-агалактии у свиноматок в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области
Группа животных	Терапевтический эффект, кратность введения
однократно	двукратно	трехкратно.
гол.	%	гол.	%	гол.	%
Энроцид (n=29)	9	31,0	18	62,1	22	75,9
Заявленный препарат (n=36)	23	63,4	32	88,9	34	94,4

Трехкратное введение препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок (третий раз препарат введен двум свиноматкам) способствовало выздоровлению 94,4% опытных животных, в то время как в контрольной группе - 75,9% (третий раз энроцид был введен четырем свиноматкам).

Таким образом, из полученных результатов исследования следует, что лучший терапевтический эффект при ММА достигнут при применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок (90,5-94,4%). Приведенные данные свидетельствуют о том, что заявленный препарат является эффективным терапевтическим средством при лечении послеродовых болезней у свиноматок.

Пример 4. Изучение эффективности профилактики гнойно-катарального эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок

Изучение эффективности применения препарата для профилактики послеродового эндометрита и метрит-мастит-агалактии у свиноматок проведены в четырех сериях опытов.

Первый опыт проведен в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 185-210 кг. Второй опыт проведен в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 190-220 кг. Третий опыт - в ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 170-230 кг. Четвертый - в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области на свиноматках крупной белой породы, по 3-4 опоросам с массой тела 180-200 кг.

Опыты проведены на 407 свиноматках, которые в первые сутки после опороса (через 6-10 часов после завершения родов) были распределены по принципу аналогов на 3 группы.

Животным первой группы (положительный контроль) с терапевтической целью внутриматочно с помощью щприца Жанэ и катетера или ПОС-5 вводили энроцид в соответствии с инструкцией по применению.

Второй группе свиноматок (опытная группа) вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозе 60 г/животное при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Флорфеникол - 2,5

Линкомицина гидрохлорид - 1,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

Животные третьей группы служили отрицательным контролем, им с профилактической целью препараты не применяли.

За животными вели наблюдение, учитывая общее состояние, прием корма и воды, температуру тела и заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями: острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом и ММА.

Показатели профилактической эффективности препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок представлены в таблицах 9-12.

Таблица 9
Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ООО «Возрождение» Таловского района Воронежской области
Препарат, группа животных	Заболело свиноматок послеродовыми болезнями
всего	в том числе
эндометритом	ММА
голов	%	голов	%	голов	%
Положительный контроль (n=26)	14	53,8	12	46,1	2	7,7
Заявленный препарат (n=26)	7	26,9	6	23,1	1	3,8
Отрицательный контроль (n=17)	11	64,7	9	52,9	2	11,8

Таблица 10
Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ЗАО «Шацкий свинокомплекс» Шацкого района Рязанской области
Группа свиноматок	Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями
Всего	В том числе
Эндометритом	ММА
гол.	%	гол.	%	гол.	%
Энроцид (n=42)	12	28,6	8	19,1	4	9,5-
Заявленный препарат (n=47)	10	21,3	9	19,2	1	2,1
Контроль (n=38)	24	63,2	11	29,0	13	34,2

Таблица 11
Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ООО «Инвест АПК» спецхоза «Октябрь» Бутурлиновского района Воронежской области
Группа свиноматок	Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями
Всего	В том числе
Эндометритом	ММА
гол.	%	гол.	%	гол.	%
Энроцид (n=28)	9	32,1	6	21,4	3	10,7
Заявленный препарат (n=43)	10	23,3	10	23,3	-	-
Контроль (n=18)	12	66,7	7	38,9	5	27,8

Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями в группе отрицательного контроля в среднем по 4 опытам составила 64,7%, в том числе эндометритом - 40,2% и ММА - 24,5%.

Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями в группе положительного контроля (по результатам 4 опытов) сократилась на 28,2%, в том числе эндометритом - на 12,8% и ММА - в 2,7 раза.

Таблица 12
Эффективность применения препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок для профилактики послеродовых болезней в ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области
Группа свиноматок	Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями
Всего	В том числе
Эндометритом	ММА
гол.	%	гол.	%	гол.	%
Энроцид (n=48)	15	31,3	11	23,0	4	8,3
Заявленный препарат (n=49)	10	20,4	7	14,3	3	6,1
Контроль (n=25)	16	64,0	10	40,0	6	24,0

Наименьшая заболеваемость послеродовыми болезнями установлена в группе животных, которым применяли препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок. В этой группе свиноматок послеродовые болезни уменьшились на 41,7%, в том числе эндометритом в 2,0 раза и ММА - в 8,2 раза в сравнении с отрицательным контролем.

В сравнении с группой свиноматок, которым применяли базовый препарат, эффективность профилактики послеродовых болезней у свиноматок заявленным препаратом оказалась выше на 13,5%, в том числе метрит-мастит-агалактии - в 3,0 раза, а эндометрита - на 7,4%.

Таким образом, проведенные исследования показали высокую эффективность применения заявленного препарата для профилактики послеродовых болезней у свиноматок.

Пример 5. Токсикологическая безопасность препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок

Согласно существующего положения о лекарственных средствах, предназначенных для лечения животных, проведено экспериментальное доклиническое изучение общей фармакологической активности и токсикологических свойств препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Флорфеникол - 2,5

Линкомицина гидрохлорид - 1,5

Диметилсульфоксид - 10,0

Глицерин - 10,0

1,2 пропиленгликоль - 10,0

Масло подсолнечное рафинированное - 12,5

Воск эмульсионный - 1,0

Кислота стеариновая - 0,9

Вода для инъекций - до 100%

При проведении исследований использовали фармакологические, токсикологические, биохимические, патоморфологические методы исследования, применяемые для изучения лекарственных средств, получившие апробацию в научно-исследовательской практике.

Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок не токсичен для лабораторных животных при однократном пероральном введении. При однократном внутрижелудочном введении LD₅₀ для белых мышей и белых крыс составляет более 21000,0 мг/кг массы тела. По показателям острой токсичности он относится к веществам малоопасным - 4 класс опасности по ГОСТ 12.01.007-76. При однократном парентеральном (подкожном) введении в дозах от 2250,0 до 15750,0 мг/кг массы тела LD₅₀ для лабораторных животных установить не удалось, так как гибели животных в период опыта не было отмечено. Выраженной видовой и половой чувствительности к препарату не выявлено. Во всех испытанных дозах препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок не оказывает существенного влияния на поведение и общее состояние животных, интенсивность роста и вегетативные функции.

При хроническом подкожном введении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозах: 1-я группа - контроль; 2-я группа - (1/50 от дозы 15750,0 мг/кг) - 315,0 мг/кг; 3-я группа - (1/20 от дозы 15750,0 мг/кг) - 788,0 мг/кг и 4-я группа - (1/10 от дозы 15750,0 мг/кг) - 1575,0 мг/кг не вызывает существенных изменений в клиническом состоянии животных: поведение, аппетит, частота дыхания у всех животных опытных групп, как в период применения препарата, так и в течение 10 дней после окончания его применения оставались в пределах нормы. За период наблюдения у животных опытных групп не было отмечено нарушений функций пищеварения и мочеотделения. Гибели животных в ходе опыта не было.

Существенной разницы в привесах крыс контрольной и опытных групп (в дозах 315,0 и 788,0 мг/кг) в течение опыта не было отмечено. В четвертой группе (1575,0 мг/кг) наблюдалось снижение среднесуточных привесов животных по сравнению с крысами контрольной группы в среднем на 14,7% с 7-го по 14 день опыта, в следующие 7 дней (с 14-го по 21-й) - на 35,2%. После отмены препарата - с 21-го по 31-й день (восстановительный период) - статистически достоверных различий по этому показателю не было обнаружено.

Относительные массы внутренних органов крыс, которым применяли препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок подкожно в изученных дозах в течение 21 дня, существенно не отличались от контроля (табл.13).

Таблица 13
Относительные массы внутренних органов крыс при многократном подкожном применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Внутренний орган	Контроль	Доза препарата, мг/кг
315,0	788,0	1575,0
Легкие	5,28±0,15	5,32±0,32	5,11±0,28	4,91±0,36
Сердце	3,55±0,15	3,48±0,18	3,78±0,13	3,94±0,20
Печень	30,1±1,51	31,1±1,64	29,9±1,07	30,6±1,62
Селезенка	4,00±0,33	3,96±0,10	3,83±0,14	3,80±0,17
Почки	5,62±0,16	5,48±0,13	5,55±0,21	5,58±0,27
Надпочечники	0,21±0,02	0,20±0,004	0,20±0,015	0,20±0,019
Тимус	1,01±0,04	1,22±0,13	1,05±0,08	1,10±0,16

При исследовании крови животных, которым вводили препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок в дозах 315,0 и 788,0 мг/кг массы тела, не отмечено достоверных изменений в морфологическом составе крови и биохимических показателях по сравнению с показателями в крови животных контрольной группы на 21 день опыта (табл.14-15).

При применении препарата в дозе 1575,0 мг/кг массы тела в течение 21 дня также не оказывал существенного влияния на большинство гематологических и биохимических показателей крови больных крыс (табл.14 и 15). Отмечена лишь тенденция увеличения лейкоцитов (на 16,8%), снижения гемоглобина (на 6,4%). Но колебания значений данных показателей находились в пределах физиологической нормы для данного вида животных и через 10 дней после последнего введения препарата, данные показатели у опытных животных восстанавливались до физиологических значений (табл.16).

Таблица 14
Гематологические показатели крови белых крыс при длительном подкожном применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок на 21 день опыта
Показатели	Контроль	Доза препарата, мг/кг
315,0	788,0	1575,0
Эритроциты, 1012 /л	7,2±0,7	7,4±0,5	7,2±0,3	7,3±0,6
Лейкоциты, 10 9/л	11,9±1,3	11,0±3,0	12,1±2,4	13,9±0,9
Гемоглобин, г/л	120,7±6,9	124,4±9,1	123,2±6,1	113,0±8,5
Гематокрит, %	41,1±1,19	42,6±2,13	42,4±2,9	42,0±3,7
Нейтрофиды, %
Палочкоядерные	2,53±0,30	2,48±0,18	2,72±0,20	1,88±0,23
Сегментоядерные	26,9±1,19	27,7±3,20	25,0±0,16	27,1±1,26
Эозинофилы, %	4,38±0,32	4,12±0,40	3,78±0,29	4,22±0,30
Базофилы, %	-	-	-	-
Лимфоциты, %	65,4±4,11	64,7±1,94	67,9±0,90	65,8±1,36
Моноциты, %	1,00±0,44	1,00±0,47	1,00±0,60	1,00±0,50

Также была отмечена тенденция к более напряженному функционированию выделительной системы и печени (табл.15). При 21-дневном подкожном введении препарата в дозе 1575,0 мг/кг массы тела у крыс опытной группы достоверно возрастало содержание в сыворотке крови креатинина - на 18,3%, мочевины - на 26,2%, активности АсАТ и АлАТ - соответственно на 19,1 и 24,6%. Колебания значений данных показателей находились в пределах физиологической нормы для данного вида животных. Через 10 дней после последнего введения препарата, данные показатели у опытных животных восстанавливались до физиологических значений (табл.17).

Таблица 15
Биохимические показатели крови белых крыс при длительном подкожном применении препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок на 21 день опыта
Показатели	Контроль	Доза препарата, мг/кг
315,0	788,0	1575,0
Общий белок, г/л	70,1±3,24	71,5±2,11	70,3±4,68	69,5±5,12
Альбумины, г/л	34,8±1,45	35,1±3,19	33,7±2,11	33,1±1,53
-глобулины, г/л	5,17±0,14	4,99±0,29	5,11±0,30	5,83±0,43
-глобулины, г/л	11,37±1,12	12,14±0,80	11,05±2,17	13,00±2,3,0
-глобулины, г/л	18,76±1,15	18,67±2,08	20,44±1,70	17,57±2,05
Мочевина, мМ/л	4,16±0,32	4,21±0,16	4,00±0,22	5,25±0,20*
Креатинин, мкМ/л	40,4±1,10	46,9±3,10	41,5±4,51	47,8±1,54*
Липиды, г/л	1,78±0,09	1,84±0,15	1,68±0,03	1,71±0,02
Холестерин, мМ/л	1,36±0,14	1,25±0,09	1,20±0,11	1,30±0,15
Триглицериды, мМ/л	0,70±0,01	0,75±0,03	0,70±0,06	0,71±0,01
Глюкоза, мМ/л	7,13±0,43	7,00±0,34	7,18±0,29	7,36±0,61
ЩФ, мМ/л×ч	5,32±0,27	5,12±0,19	5,52±0,21	5,06±0,11
АсАТ, мМ/л×ч	1,31±0,19	1,34±0,09	1,21±0,07	1,56±0,07
АлАТ, мМ/л×ч	0,65±0,05	0,68±0,11	0,60±0,04	0,81±0,11
Билирубин, мкМ/л	2,92±0,30	2,90±0,17	3,10±0,16	3,04±0,13
Фосфор, мМ/л	1,70±0,11	1,73±0,05	1,66±0,03	1,72±0,04
Кальций, мМ/л	2,33±0,02	2,28±0,04	2,31±0,02	2,25±0,03
* - Р<0,01-0,001 по сравнению с контролем

Анализируя данные, полученные по гематологическим и биохимическим показателям крови белых крыс при длительном подкожном применении заявленного препарата в течение 21 дня, установлено, что препарат в дозах 315,0 мг/кг и 788,0 мг/кг не оказывает отрицательного воздействия на гематологические и биохимические показатели крови животных. Те изменения, которые вызваны дозой 1575,0 мг/кг, имеют обратимый характер, так как в течение 10 дней после отмены препарата гематологические и биохимические показатели у опытных животных восстанавливались до физиологических значений.

Таблица 16
Гематологические показатели крови белых крыс через 10 дней после отмены препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Показатели	Контроль	Доза препарата, мг/кг
315,0	788,0	1575,0
Эритроциты, 1012 /л	8,4±0,4	8,4±0,2	8,1±0,2	8,4±0,3
Лейкоциты, 10 9/л	13,4±0,6	12,9±1,1	13,1±1,7	13,5±1,6
Гемоглобин, г/л	124,1±10,1	133,1±7,9	133,2±4,4	132,8±4,5
Гематокрит, %	40,5±3,56	44,1±±1,27	45,0±5,6	45,4±3,7
Нейтрофилы, %
Палочкоядерные	1,32±0,40	1,78±0,35	1,40±0,32	1,56±0,45
Сегментоядерные	27,1±0,71	26,9±2,19	25,3±3,25	26,8±2,75
Эозинофилы, %	2,18±0,10	2,35±0,26	2,10±0,50	2,54±1,11
Базофилы, %	-	-	-	-
Лимфоциты, %	68,4±6,13	67,7±4,10	70,2±5,17	67,6±2,13
Моноциты, %	1,00±0,50	1,27±0,30	1,00±0,66	1,50±1,00

Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок не оказывает местнораздражающего действия на слизистые оболочки и кожные покровы. Препарат в исследованных дозах не обладает аллергизирующими свойствами.

Таблица 17
Биохимические показатели крови белых крыс через 10 дней после отмены препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок
Показатели	Контроль	Доза препарата, мг/кг
315,0	788,0	1575,0
Общий белок, г/л	66,04±2,56	68,94±1,98	67,20±2,13	68,36±3,74
Альбумины, г/л	35,2±1,69	37,6±3,77	34,2±2,12	35,4±1,01
-глобулины, г/л	6,28±0,67	6,91±1,02	5,86±0,88	6,34±1,12
-глобулины, г/л	12,21±0,72	11,13±0,90	14,18±0,70	12,57±0,36
-глобулины, г/л	12,35±0,16	13,30±1,18	12,96±0,52	14,05±0,28
Мочевина, мМ/л	3,95±0,60	3,28±0,25	3,62±0,16	3,96±0,43
Креатинин, мкМ/л	47,3±2,5	48,2±2,9	46,7±1,5	47,0±1,7
Холестерин, мМ/л	1,42±0,20	1,36±0,10	1,44±0,14	1,41±0,12
Липиды, г/л	2,10±0,10	2,04±0,11	1,89±0,06	1,89±0,06
Триглицериды, мМ/л	0,76±0,01	0,83±0,02	0,76±0,02	0,74±0,03
Глюкоза, мМ/л	7,74±0,51	7,62±0,23	7,80±0,17	7,53±0,48
АЛТ, мМ/л×ч	0,75±0,09	0,77±0,10	0,71±0,08	0,69±0,11
ACT, мМ/л×ч	1,25±0,12	1,23±0,09	1,03±0,04	1,15±0,02
ЩФ, мМ/л×ч	5,00±0,15	4,67±0,10	4,52±0,14	4,67±0,05
Билирубин, мкМ/л	3,25±0,24	3,25±0,11	3,30±0,20	3,44±0,60
Кальций, мМ/л	2,36±0,03	2,31±0,02	2,38±0,04	2,36±0,07
Фосфор, мМ/л	1,70±0,12	1,73±0,05	1,66±0,13	1,72±0,04

Таким образом, проведенные испытания препарата для лечения и профилактики послеродового эндометрита и синдрома метрит-мастит-агалактии у свиноматок показали, что он обладает широким спектром антимикробного действия, выраженным лечебным действием и эффективнее прототипа, является малотоксичным. Применение препарата технологично и экономически выгодно.