3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство, обладающее противомикробными свойствами

Классы МПК:C07D231/56 бензпиразолы; гидрированные бензпиразолы
A61K31/416  конденсированные с карбоциклическими кольцевыми системами, например индазол
A61P31/00 Противоинфекционные средства, те антибиотики, антисептики, химиотерапевтические средства
Автор(ы):, , , , , ,
Патентообладатель(и):Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермский государственный университет" (RU),
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2011-02-25
публикация патента:

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому биологически активному соединению класса индазола - 3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлориду формулы 1. Соединение 1 получают взаимодействием 2-(1-нафтилацетил)-циклогексанона с гидразингидратом в среде изопропанола при кипячении с последующим выделением целевого продукта известными приемами. Соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, легко растворимое в ДМСО и ДМФА, трудно растворимое в воде, спирте, хлороформе. Изобретение также относится к средству, обладающему противомикробным действием. Технический результат - соединение 1 проявляет выраженное ингибирующее действие относительно штаммов золотистого стафилококка и тормозит их рост в концентрации 0,5 мкг/мл, проявляет бактерицидный эффект в концентрации 2,0 мкг/мл, а также тормозит рост грибка Candida albicans в концентрации 2 мкг/мл и вызывает гибель штамма в концентрации 62,5 мкг/мл. ЛД50 при пероральном введении составила более 1000,0 мг/кг. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому биологически активному соединению класса индазола - 3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлориду формулы 1:

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808

провляющему антимикробную активность, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве антимикробного средства.

В практической медицине известен препарат фенилсалицилат, аналогичный по фармакологическому (противомикробному) действию предлагаемому соединению (см. Машковский М.Д., Лекарственные средства. - Харьков: Торгсин, 1998, т.2, с.418). Данный препарат взят в качестве эталона сравнения для предлагаемого решения.

Близкими по структуре к предлагаемому соединению являются 1,3-диарилциклоалканопиразолы (индазолы), представляющие собой ингибиторы циклооксигеназы и противовоспалительные агенты (см. Ferro M., Sui Z., Wachter M. Preparation of 1,3 and 2,3-diarylcycloalkano and cycloalkeno pyrazoles as selective inhibitors of cyclooxygenase-2 and antiflammatory agents. Pat. US 6083969; Chem. Abstracts, 2000, Vol.133, № 7, 89521f). Ближайший среди них аналог имеет следующую структуру:

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808

Сведения об антимикробной активности аналогов отсутствуют.

Более близкими структурными аналогами к заявляемым соединениям, взятыми за поототип, являются основания обшей формулы:

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808

где R=4-СН3, 4-NO2 - замещенные фенилы (см. Михайловский А.Г., Алиев З.Г., Базина Н.Г., Пантюхин А.А., Вахрин М.И. 2-Ароилциклогексаноны в синтезе азолов, ХГС, 2010, № 6, с.905-911). Их основное отличие по структуре от заявляемых соединений в том, что они содержат другие радикалы в положении 3 индазольного цикла и являются основаниями, а не гидрохлоридами. Данных об антимикробной активности этих соединений в литературе не имеется.

Задачей изобретения является получение нового соединения, обладающего противомикробными свойствами, и создание на его основе противомикробного средства для практического здравоохранения.

Техническая задача решается посредством настоящего изобретения и состоит в синтезе гидрохлорида 3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола (1) формулы:

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808

проявляющего антимикробную активность в отношении бактерий Staphylococcus aureus и грибка Candida albicans.

Соединение 1 получают взаимодействием 2-(2-нафтилацетил)-циклогексанона с гидразингидратом в среде изопропанола при кипячении в течение 1 часа с последующим выделением целевых продуктов известными приемами. Реакция идет по схеме, приведенной ниже.

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808

Исходный дикетон (2-(1-нафтилацетил)-циклогексанон) получен по методике, использованной нами ранее для синтеза 2-ароилциклогексанонов (см. Михайловский А.Г., Алиев З.Г., Базина Н.Г., Пантюхин А.А., Вахрин М.И. 2-Ароилциклогексаноны в синтезе азолов, ХГС, 2010, № 6, с.905-911) и использован в качестве промежуточного продукта без перекристаллизации.

Технический результат, получаемый при реализации изобретения, состоит в получении малотоксичного соединения с высоким выходом и высокой антимикробной активностью. Методика синтеза проста, исходные соединения легкодоступны.

Изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами.

Пример 1. Синтез 3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорида.

К раствору 2,52 г (0,01 моль) 2-(1-нафтилацетил)-циклогексанона в 20,0 мл кипящего 2-пропанола прибавляли 0,7 мл (15,0 ммоль) кипящего (0,015 моль) 70% раствора гидразингидрата. Смесь кипятили 1 час, охлаждали до 20°C, разбавляли 100 мл ледяной воды, выпавший осадок растворяли в 150 мл этилацетата и пропусканием сухого газообразного НСl получали гидрохлорид соединения 1, который отфильтровывали, сушили и перекристаллизовывали из 2-пропанола. Выход 67%. Тпл. 205-206°C. Соединение 1 C 18H18N2·HCl.

Найдено, %: C 72.27; H 6.22; N 9.26; Cl 11.75.

Вычислено, %: C 72.35; H 6.41; N9.37; Cl 11.86.

Соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, легко растворимое в ДМСО и ДМФА, трудно растворимое в воде, спирте, хлороформе. Устойчиво при хранении в обычных условиях.

В ИК спектре основания соединения 1, снятого в пасте в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний групп NH индазольного цикла (3250 см-1). Получение основания вещества 1: водную суспензию обрабатывают избытком водного раствора аммиака, полученное основание отфильтровывают, тщательно промывая водой, и сушат.

Спектр ПМР гидрохлорида 1 снят в ДМСО-D 6 (300 МГц), внутренний эталон - ГМДС. Спектр содержит (3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808 , м.д.): 1.61-1.78 мультиплет, 4Н, 5,6-(CH2) 2; 2.49-2.63 мультиплет, 4Н, 4-CH2 и 7-CH 2; 4.52 синглет (СН2-нафтил); 7.41-8.10, мультиплет (7Н, Ar); 10.02 синглет (NH+).

Пример 2. Антимикробная активность и токсичность.

Исследование биологической активности (токсичности и специфического действия) заявляемых соединений проводили на белых беспородных мышах массой 18-20 г и микроорганизмах Esherichia coli (1257) и Staphylococcus aureus (6538P, 906). Противогрибковое действие изучено на музейном штамме дрожжеподобного грибка Candida albicans, 264/624.

Определение средней летальной дозы (ЛД50) проводили по методу Г.Н.Першина путем однократного орального введения и наблюдения за поведением и гибелью животных в течение 7 суток. Противомикробное действие выявляли методом двукратных серийных разведений в соответствии с методикой изучения противомикробного действия препаратов (Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии. - М.: Медицина, 1971, с.109). Для культивирования бактерий использовали рыбно-пептонный агар и бульон (pH 7,2-7,4); для культивирования дрожжеподобных грибков - бульон и агар Сабуро. Готовили исходные разведения микробных тел по оптическому стандарту мутности из суточной агаровой культуры. Для определения противомикробного (бактериостатического, бактерицидного и фунгицидного) действия микробную взвесь (микробная нагрузка равна 2,5×105 микробных тел в 1 мл питательной среды) вносили в приготовленные разведения препарата в питательной среде. Результаты опытов учитывали после 20-часового (ингибирующее) и 7-суточного (бактерицидное действие) термостатирования при 37°C - для бактерий, через 48 часов и 7 суток - для Candida albicans.

Противомикробную (фунгицидную) активность оценивали по минимально действующей концентрации. Максимально испытанная концентрация соединения составила 1000 мкг/мл. Эталоном сравнения служил известный в медицинской практике фенилсалицилат.

Проведенные исследования показали (см. таблицу), что соединение 1 проявляет выраженное ингибирующее действие относительно штаммов золотистого стафилококка и тормозит их рост в концентрации 0,5 мкг/мл, что активнее эталона (фенилсалицилата) в 1500 раз.

Концентрация 2,0 мкг/мл заявляемого соединения вызывает гибель испытанных штаммов золотистого стафилококка, т.е. соединение 1 проявляет бактерицидный эффект. В сравнении с бактерицидным действием эталона - фенилсалицилата - заявляемое соединения более активно в 1000 раз.

Кроме того, предлагаемое соединение тормозит рост грибка Candida albicans в концентрации 2,0 мкг/мл и вызывает гибель этого штамма в концентрации 62,5 мкг/мл. Препарат сравнения антигрибкового действия в отношении Candida albicans не проявляет.

Предлагаемое вещество не оказывает действия в отношении кишечной палочки (см. таблицу), что можно рассматривать как благоприятный фактор, способствующий сохранению микрофлоры кишечника.

Таблица
Соединение Противомикробная активность, мкг/мл
Escherichia coli Staphylococcus aureus Candida albicans
МИК*МБК** МИК*МБК** МИК*МБК**
1 -- 0,52,0 2,062,5
фенилсалицилат - -750,0 2000,0- -
контроль: ДМСО рост рост рост
Примечание: препараты растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО);
«-» означает отсутствие противомикробного действия в испытанных концентрациях;

*МИК - минимальная ингибирующая концентрация;
**МБК - минимальная бактерицидная концентрация.

Острая токсичность определена перорально. Предлагаемое соединение является малотоксичным. При пероральном введении величина ЛД50 составила для него более 1000 мг/кг.

В связи с тем, что 3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид обладает выраженным противомикробным действием в отношении бактерий Staphylococccus aureus и дрожжеподобного грибка Candida albicans, он может найти применение в практической медицине.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. 3-(1-Нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид формулы 1:

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808

2. Средство, обладающее противомикробными свойствами, представляющее собой 3-(1-Нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид формулы 1:

3-(1-нафтилметил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, средство,   обладающее противомикробными свойствами, патент № 2459808


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2459808

patent-2459808.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс C07D231/56 бензпиразолы; гидрированные бензпиразолы

Патенты РФ в классе C07D231/56:
бициклические гетероциклы в качестве ингибиторов киназы мек -  патент 2509078 (10.03.2014)
новые лиганды ванилоидных рецепторов и их применение для изготовления лекарственных средств -  патент 2498982 (20.11.2013)
3-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, анальгетическое и противомикробное средство -  патент 2485105 (20.06.2013)
производное фенилпропионовой кислоты и его применение -  патент 2479579 (20.04.2013)
3-(2-бромфенил) и 3-бензил-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлориды, противомикробное средство на их основе -  патент 2469027 (10.12.2012)
пиримидиновые производные -  патент 2455994 (20.07.2012)
ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы -  патент 2451676 (27.05.2012)
производное пиримидина в качестве ингибитора pi3k и его применение -  патент 2448109 (20.04.2012)
способ получения индазолилмочевин, которые подавляют ваниллоидные рецепторы подтипа 1 (vr1) -  патент 2446161 (27.03.2012)
производное амида индазолакриловой кислоты -  патент 2444515 (10.03.2012)

Класс A61K31/416  конденсированные с карбоциклическими кольцевыми системами, например индазол

Патенты РФ в классе A61K31/416:
мультитаргетные ингибиторы опухолевого роста на основе линейных гетероаренантрацендионов -  патент 2527273 (27.08.2014)
соединения, которые являются ингибиторами erk -  патент 2525389 (10.08.2014)
комбинации конъюгата анти-her2-антитело-лекарственное средство и химиотерапевтических средств и способы применения -  патент 2510272 (27.03.2014)
низкомолекулярные модуляторы активности trp-p8 -  патент 2509079 (10.03.2014)
бициклические гетероциклы в качестве ингибиторов киназы мек -  патент 2509078 (10.03.2014)
замещенные пиримидины и их применение в качестве модуляторов jnk -  патент 2493155 (20.09.2013)
5-замещенные индазолы в качестве ингибиторов киназы -  патент 2487873 (20.07.2013)
3-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидроиндазола гидрохлорид, анальгетическое и противомикробное средство -  патент 2485105 (20.06.2013)
производное фенилпропионовой кислоты и его применение -  патент 2479579 (20.04.2013)
производные гетероарилпирролидинил- и пиперидинилкетона -  патент 2479575 (20.04.2013)

Класс A61P31/00 Противоинфекционные средства, те антибиотики, антисептики, химиотерапевтические средства

Патенты РФ в классе A61P31/00:
способ получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов, обладающих противовирусным и антибактериальным действием -  патент 2529790 (27.09.2014)
5-метил-6-нитро-7-оксо-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-альфа]пиримидинид l-аргининия моногидрат -  патент 2529487 (27.09.2014)
способ комплексного лечения коров при послеродовом эндометрите -  патент 2528916 (20.09.2014)
способ лечения ран мягких тканей различной этиологии -  патент 2528905 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
диариловые эфиры -  патент 2528231 (10.09.2014)
вакцины на основе солюбилизированных и комбинированных капсулярных полисахаридов -  патент 2528066 (10.09.2014)
штамм бактерий serratia species, являющийся продуцентом внеклеточной рибонуклеазы и дезоксирибонуклеазы, обладающих противовирусной активностью -  патент 2528064 (10.09.2014)
модуляторы транспортеров атф-связывающей кассеты -  патент 2528046 (10.09.2014)
использование альгинатных олигомеров в борьбе с биопленками -  патент 2527894 (10.09.2014)


Наверх