способ получения препарата из медицинской пиявки

Формула изобретения

Способ получения препарата из медицинской пиявки, в котором пиявку выдерживают в режиме активного голодания не менее 4 месяцев, промывают, замораживают и измельчают в гомогенную массу, отличающийся тем, что полученную массу смешивают с водным раствором поливинилового спирта и хлорида магния в соотношении 1:1 (по весу) и высушивают в условиях, при которых не происходит денатурация белка до образования эластичной пленки.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к новым препаратам для медицинских целей, а именно к лечебным средствам на основе биологически активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой, и способу их получения.

Указанный препарат относится к поликомпонентным физиологически активным препаратам, обладающим противовоспалительным, рассасывающим, анальгезирующим действием, снижает реологические свойства крови, ингибируя агрегацию тромбоцитов и эритроцитов, является иммуномодулятором, проявляет нейротрофические свойства.

Известны различные способы выделения биологически активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой:

1. Способ получения секрета слюнных желез медицинской пиявки. Баскова И.П., Патент России № 2045954, 1994 г.

2. Экстракты из медицинских пиявок:

а) экстракт из головной части медицинской пиявки и туловищ:

Markward F. Untersuchungen uber Hirudin. Naturwissenschaften, 1955, 42, p.537-538.

Markward F. Die isolierung und Chemische Charakterisierung des Hirudins. Hoppe Seylers Z. Physiol., 1957, 308, p.147-156.

Markward F. Blutgerinnungshemender Wirkstoff aus Blutsaugenden Tieren. Iena, 1963.

Walsman P., Markward F. On the isolation of the thrombin inhibitor Hirudin. Thromb Res., 1995, 40, p.563-570.

Баскова И.П. и др. Сравнительная характеристика гирудина из цельных пиявок, головок и туловищ. Биохимия, 1980, 45, с.266-272.

б) экстракты из цельных медицинских пиявок:

Refers F.J., Zebe E. Protease inhibitors in the alimentary tract of the medicinal leech Hirudo medicinalis in vivo and in vitro studies. J. Comp. Physiol. Biochem., 1992, 162, p.82-92.

Баскова И.П. и др. Сравнительная характеристика гирудина из цельных пиявок, головок и туловищ. Биохимия, 1980, 45, с.266-272.

Известен лечебный гель "Пиявит +", представляющий собой водно-солевой экстракт цельной медицинской пиявки (Горбань В.И. и др. Патент РФ № 2268739 от 05.01.04 г.).

Известен также препарат «Пиявит», представляющий собой порошок из лиофильно высушенной цельной медицинской пиявки (Баскова И.П. и др., патент РФ № 2033173 от 31.01.92 г. - прототип).

Однако на наш взгляд лиофилизация не позволяет в полной мере сохранить биологическую активность веществ белковой природы, а экстракция не позволяет полностью выделить биологически активные вещества из тела медицинской пиявки.

Целью изобретения является разработка нового препарата для медицинских целей, расширяющего арсенал средств аналогичного назначения - лечебного средства на основе биологических активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой и способа его получения.

Указанная цель достигается путем исключения лиофильной сушки и экстракции, но с использованием консерванта и связующего - водного раствора поливинилового спирта и хлорида магния.

Пример 1. Приготовление консервирующего раствора.

В колбу с мешалкой и обратным холодильником помещают 2,0 л воды, 0,5 кг хлорида магния и 0,25 кг поливинилового спирта (ПВС 20/1) (ГОСТ 10779-78).

Массу нагревают на кипящей водяной бане и перемешивают до полного растворения исходных компонентов. После самоохлаждения получают прозрачную вязкую массу.

Пример 2. Приготовление препарата.

Пиявок, выдержанных в режиме активного голодания не менее 4 месяцев до полного освобождения кишечного канала от крови, вводят в анабиоз при температуре 5 10 градусов. после чего промывают холодной водой (температура 5 10 градусов), помещают в полотняный мешочек и подвешивают в холодильнике при температуре 5 10 градусов на срок 2 4 часа для удаления избыточной влаги. После чего пиявку перекладывают в полиэтиленовый пакет и замораживают при температуре -25 -28 градусов. Замороженную таким образом пиявку измельчают в гомогенизаторе. Полученную массу смешивают с консервирующим раствором в соотношении 1:1 и распределяют на протвене из нержавеющей стали, который помещают в сушильный шкаф, где и высушивают при температуре 30 37 градусов до образования пленки.

Получают эластичную пленку темно-коричневого цвета, которая обладает самоадгезией. Из получаемого материла изготавливают таблетки, драже, пленки.

Полученный препарат проверяли на антикоагулянтную активность в сравнении с прототипом.

Таблица 1
Антикоагулянтная активность водных экстрактов препарата "Пиявит" (прототип) и заявляемого объекта (среднее из 5 параллельных)
№ пробы	Состав	Цвет раствора	Антикоагулянтная активность, АКБ
1	Препарат "Пиявит" + физраствор (прототип)	Темно-коричневый	3600+/-100
2	Заявляемый объект + физраствор	Темно-коричневый	3750+/-110

Как видно из представленных данных, антикоагулянтная активность образцов практически одинакова. Однако следует учесть тот факт, что указанные образцы (прототип и заявляемый объект) - это поликомпонентные препараты и не все стороны их биологического действия изучались количественно.

Также проводились исследования на микробиологическую чистоту заявляемого объекта (на соответствие ФСП 42-0543-06 с12) после хранения при комнатной температуре в течение 6 месяцев.

Таблица 2
Микробиологические исследования*
№ п/п	Определяемые показатели, ед. измерения	Результаты исследования	Величина допустимого уровня
1	ОМЧ КОЕ/г	4,0*100 KOE/г	Не более 1000 аэробных бактерий КОЕ/г
2	Дрожжи плесени	Не обнаружены	Не более 100 КОЕ/г
3	E.coli	Не обнаружены	Отсутствие в 1,0 г
4	S.aureus	Не обнаружены	Отсутствие в 1,0 г
5	Salmonella	Не обнаружены	Отсутствие в 1,0 г
6	P.aeruginosa	Не обнаружены	Отсутствие в 1,0 г
7	Другие кишечные бактерии	Не обнаружены	Не более 100 КОЕ/г
*Нормативная документация на методы исследования - Госфармакопея XI издания - том 11 от Изменения 3. Категория 4.2; выпуск 2, М.: Медицина, 1990. - с.187.