средство для предупреждения и лечения гиперплазии предстательной железы, содержащее производное пиразолопиримидинона

Формула изобретения

1. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН), содержащее соединение формулы 1, представленной ниже:

2. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS), содержащее соединение формулы 1 по п.1.

3. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.1, где средство ингибирует активность PDE-5.

4. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.1, где средство не ингибирует активность PDE-11, но ингибирует активность PDE-5.

5. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.4, где средство не вызывает токсичности для семенников или миалгию, поскольку оно не обладает ингибирующим действием в отношении активности PDE-11.

6. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.1, где средство снижает внутриуретральное давление (IUP).

7. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.1, где действие средства продолжается в течение длительного периода времени при низкой кратности введения.

8. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.7, где действие средства продолжается в течение 12-24 ч без кумуляции при однократном введении.

9. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.1, где средство достигает максимальной концентрации в крови в течение 50-70 мин.

10. Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ВРН) по п.1, где период полувыведения средства составляет 9-15 ч.

11. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы, содержащий соединение формулы 1 по п.1.

12. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.11, где релаксант ингибирует активность PDE-5.

13. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.11, где релаксант не ингибирует активность PDE-11, но ингибирует активность PDE-5.

14. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.13, где релаксант не вызывает токсичности для семенников или миалгию, поскольку он не обладает ингибирующим действием в отношении активности PDE-11.

15. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.11, где релаксант снижает внутриуретральное давление (IUP).

16. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.11, где действие релаксанта продолжается в течение длительного периода времени при низкой кратности введения.

17. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.16, где действие релаксанта продолжается в течение 12-24 ч без кумуляции при однократном введении.

18. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.11, где релаксант достигает максимальной концентрации в крови в течение 50-70 мин.

19. Релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по п.11, где период полувыведения релаксанта составляет 9-15 ч.

20. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.2, где средство ингибирует активность PDE-5.

21. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.2, где средство не ингибирует активность PDE-11, но ингибирует активность PDE-5.

22. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.21 где средство не вызывает токсичности для семенников или миалгию, поскольку оно не обладает ингибирующим действием в отношении активности PDE-11.

23. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.2, где средство снижает внутриуретральное давление (IUP).

24. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.2, где действие средства продолжается в течение длительного периода времени при низкой кратности введения.

25. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.24, где действие средства продолжается в течение 12-24 ч без кумуляции при однократном введении.

26. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.2, где средство достигает максимальной концентрации в крови в течение 50-70 мин.

27. Средство для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS) по п.2, где период полувыведения средства составляет 9-15 ч.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к средству для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, и релаксанту для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы, которые содержат производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента.

Уровень техники

Предстательная железа представляет собой железу размером с грецкий орех, которая имеется только у мужчин. Она располагается непосредственно ниже мочевого пузыря и окружает уретру, канал, по которому моча течет от мочевого пузыря и вытекает через половой член. Уретра проходит по диагонали через переднюю стенку предстательной железы. Семявыбрасывающие протоки по обеим сторонам предстательной железы проходят через паренхиму сзади уретры. Паренхиму предстательной железы подразделяют на три доли железы: среднюю долю, расположенную над семявыбрасывающими протоками, и боковые доли справа и слева от уретры ниже протоков. Она имеет тубуло-альвеолярную структуру и грубо разделяется на железистую ткань и интерстициальную ткань. Интерстициальная ткань состоит из 30-50 небольших железистых долек, от которых протоки предстательной железы в основном открываются в синусы предстательной железы, которые находятся с каждой стороны от семенного бугорка на задней стенке уретры.

Предстательная железа представляет собой один из вспомогательных половых органов мужчин с репродуктивной функцией наряду с семенниками и семенными пузырьками. Она продуцирует секреты предстательной железы, составляющие примерно одну третью часть семенной жидкости. Секреты предстательной железы повышают подвижность сперматозоидов посредством «ухода» за сперматозоидами, продуцированными в семенниках и также предупреждают остывание подвергшейся эякуляции семенной жидкости, тем самым способствуя подвижности сперматозоидов. Кроме того, щелочные секреты предстательной железы функционируют в качестве важного носителя активности семенной жидкости, т.е. они нейтрализуют сильно кислую среду яйцеводов женщины, способствуя оплодотворению яйцеклеток сперматозоидами.

Доброкачественная гиперплазия предстательной железы (BPH) является распространенным заболеванием, которым страдают мужчины старше 50 лет, и часто оно связано с симптомами нижних мочевых путей (LUTS), тем самым приводящие к снижению качества жизни индивидуумов. Основными предрасполагающими факторами, которые способствуют развитию BPH, являются возраст и наличие мужских гормонов (андрогенов). Судя по тому, что у мужчин с врожденной функциональной недостаточностью семенников или при удалении яичка не развивается BPH, можно заключить, что мужские гормоны принимают участие в возникновении BPH в качестве предрасполагающего фактора. Кроме того, предрасполагающими факторами для развития BPH могут стать различия в национальных группах людей, окружающей среде, пищевых предпочтениях и т.д.

В основном BPH с гистологически подтвержденной картиной имеет место у мужчин в возрасте 30-40 лет, частота заболевания возрастает у большинства мужчин к возрасту старше 60 лет и более 50% случаев увеличенной предстательной железы с возрастом переходит в пальпируемую форму [Prostate 1996 (suppl. 6), 67-73]. В основном более 30% ткани в предстательной железе имеет фибромускулярную природу и анатомически и функционально связано с мочевым пузырем [Prostate 1981, 2: 35-49].

Симптомы BPH включают неоднородную, прерывистую и слабую струю мочи; ургентное мочеиспускание и подтекание мочи или мочеиспускание по каплям и более частое мочеиспускание, особенно ночью. Поскольку указанные симптомы развиваются медленно в течение длительного периода времени, то такие симптомы считают просто как вызванные старением, но они могут быть признаком серьезных заболеваний, таких как гидронефроз или уремия.

Диагноз BPH первоначально ставят по установлению степени проявления симптомов и результатам пальпации предстательной железы через прямую кишку. Для постановки точного диагноза проводят тщательное обследование, такое как уродинамические исследования, ультрасонография и т.д., и на результатах такого обследования принимают решение о возможных вариантах лечения.

Симптомы нижних мочевых путей (LUTS) могут быть вызваны обструкцией мочевых путей за счет увеличенной предстательной железы, состоящей из эпителиальных клеток и гладкой мускулатуры, реакции мочевого пузыря на обструкцию мочевых путей и сильных сокращений гладкой мускулатуры на стимулы альфа-симпатических нервов. Различные симптомы, связанные с удерживанием и выделением мочи, в совокупности называют симптомами нижних мочевых путей (LUTS). Симптомы затруднений удерживания мочи включают частое мочеиспускание, императивный позыв к мочеиспусканию, ургентное недержание мочи, ночное мочеиспускание (никтурию), болезненное мочеиспускание (дизурию) и т.д. Симптомы затруднений мочевыделения включают слабое мочеиспускание, стрессовое мочеиспускание, слабость мочеточника, ощущение неполного опорожнения мочевого пузыря, отсутствие мочевыделения (анурез) и т.д.

Различные структурные или болезненные состояния могут привести к развитию LUTS, и известно, что предрасполагающими факторами для LUTS являются обструкция выходного отверстия мочевого пузыря, нарушения сокращения детрузора, гиперактивность детрузора и т.д., однако основным фактором является обструкция уретры, вызванная BPH. Следовательно, считается, что лечение обструкции уретры ослабляет LUTS.

Виды лечения BPH, основного фактора LUTS, грубо разделяют на хирургическое и консервативное лечение. Не далее как 10 лет тому назад наиболее распространенным лечением BPH было хирургическое вмешательство; однако недавно стала применяться терапия лекарственными препаратами с использованием блокаторов альфа-рецепторов, препаратов для расслабления гладкой мускулатуры, окружающей предстательную железу, и ингибиторов 5-альфа-редуктазы, средств для уменьшения объема предстательной железы. Однако с развитием биомедицинской инженерии были разработаны и широко применяются более новые способы лечения BPH, отличные от хирургии, такие как баллонная дилатация, гипертермия, лазерная терапия, трансуретральная тонкоигольчатая аблация (TUNA) и т.д.

Поскольку было известно, что альфа-рецепторы играют важную роль в напряжении гладкой мускулатуры в различных органах, то ее блокаторы заведомо использовали для лечения гипертензии. Типичными блокаторами альфа-рецепторов являются хиназолины, такие как алфузоцин, теразозин, доксазозин, празозин, тамсулозин и т.д. Альфа-блокаторы для расслабления гладкой мускулатуры, смежной с предстательной железой, применяют для лечения обструкции уретры и дизурии, развившейся в результате BPH. Такие препараты можно использовать для лечения гипертензии. Поскольку такие препараты могут вызвать острую гипотензию, сонливость, головокружение и т.д. в течение 30-120 мин после введения, то средства, если это возможно, следует вводить пациентам ночью или сидя в постели.

Поскольку недавно разработанные уроизбирательные альфа-блокаторы, такие как тамсулозин, функционируют в отношении сократимости гладкой мускулатуры предстательной железы более селективно по сравнению с существующими альфа-блокаторами, то они имеют преимущества в том плане, что при сравнении они вызывают меньшие побочные эффекты и обладают лучшей переносимостью пациентами. Однако поскольку альфа-блокаторы непосредственно расширяют уретру для устранения дизурии, то они также обладают недостатками, заключающимися в том, что лечение с использованием таких лекарственных средств приводит к возвращению к первоначальному состоянию при остановке введения препаратов. С другой стороны ингибиторы 5-альфа-редуктазы, такие как финастерид, постепенно уменьшают объем предстательной железы. То есть ингибиторы 5-альфа-редуктазы блокируют дигидротестостерон (DHT), который увеличивает предстательную железу, для уменьшения объема увеличенной предстательной железы, тем самым увеличивая поток мочи и устраняя дизурию в течение длительного периода времени. Кроме того, ингибиторы 5-альфа-редуктазы обладают преимуществами, заключающимися в том, что их можно вводить наряду с другими препаратами, такими как средства для лечения гипертензии, инфузионные препараты, антибиотики и т.д., поскольку они не взаимодействуют с другими лекарственными препаратами. В то же время ингибиторы 5-альфа-редуктазы имеют недостатки, проявляющиеся в том, что их следует вводить пациентам постоянно в течение минимум шести месяцев для того, чтобы улучшить связанное состояние, и они могут вызвать побочные эффекты, такие как снижение половой функции, импотенцию, снижение эякуляции и т.д.

Одним из основных факторов LUTS является то, что альфа-рецепторы повышают напряжение гладкой мускулатуры капсулы предстательной железы и шейки мочевого пузыря посредством сокращения и расслабления гладкой мускулатуры предстательной железы. Следовательно, блокаторы альфа-рецепторов снимают напряжение гладкой мускулатуры предстательной железы с ослаблением LUTS. Однако такие блокаторы альфа-рецепторов не обладают избирательностью, которая позволила бы различать три типа 1-рецепторов, и обладают одинаковой аффинностью в отношении 1-рецепторов. В результате для них характерны побочные эффекты, возникающие за счет расширения кровеносных сосудов, такие как головокружение, астения и т.д. (European Urology 2005, 47:824-837).

Тестостерон, один из предрасполагающих к BPH факторов, превращается в 5- -дигидротестостерон при участии 5- -редуктазы в предстательной железе. 5- -дигидротестостерон оказывает влияние на развитие и рост предстательной железы. Следовательно, ингибиторы 5- -редуктазы уменьшают объем увеличенной предстательной железы подавлением превращения тестостерона в 5- -дигидротестостерон, обеспечивая, тем самым, желаемую эффективность в отношении LUTS (BJU International, 2005, 96:237-243; Clinical Therapeutics, 2006, 28:13-25).

Однако известно, что ингибиторы 5- -редуктазы, уменьшая объем предстательной железы, индуцируют развитие половой дисфункции (European Urology, 2005, 47:824-837).

Между тем, недавно сообщалось, что ингибиторы фосфодиэстеразы-5 (PDE-5), хорошо известные в качестве активного ингредиента средств для лечения импотенции у мужчин, воздействуют на BPH и различные состояния, связанные с BPH (Urol. Clin. North Am., 2005, 32:511-525; BJU International, 2002, 90:836-839), которые ниже будут описаны подробно.

Функции удерживания и выделения мочи в нижних мочевых путях зависят от механизма, связанного с нервной системой, контролирующего различные компоненты выходного отверстия уретры и активность мочевого пузыря. В основном нервная система регулирует детрузор, часть уретры и наружный сфинктер уретры для регуляции потока мочи (Journal of Urology, 1995, 153:2004-2009). Оксид азота (NO) является нейропередатчиком, высвобождаемым нервами, не относящимися к адренергическим, холинергическим, которые воздействуют на гладкую мускулатуру уретры с расслаблением уретры (Journal of Pharmacology, 1998, 357:213-219).

Кроме того, одним из нарушений, связанных с LUTS, является эндотелиальная дисфункция, которая представляет собой состояние, при котором зависимое от эндотелия расширение сосудов ослабляется в результате снижения активности оксида азота. Оксид азота, продуцированный под действием эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS), активирует гуанилатциклазу. Активированная гуанилатциклаза индуцирует расширение сосудов в результате повышения уровня c-GMP. Между тем, снижение активности оксида азота происходит в результате нарушенного защитного механизма антиокисления, проявления или снижения активности eNOS и разрушения под действием активного кислорода. Оксид азота, присутствующий в предстательной железе, регулирует гладкую мускулатуру предстательной железы и предупреждает сокращение мочевого пузыря, что приводит к развитию гиперактивности, тем самым, ослаблению LUTS (European Urology 2005, 47:824-837). Следовательно, доноры оксида азота, которые расслабляют гладкую мускулатуру уретры и гладкую мускулатуру предстательной железы, могут способствовать ослаблению LUTS.

Силденафил, один из известных ингибиторов PDE-5, ингибирует активность PDE-5, которая разрушает c-GMP с расслаблением гладкой мускулатуры предстательной железы через путь, связанный с оксидом азота (BJU International, 2002, 90:836-839).

Авторы настоящего изобретения в заявке WO2000/027848 (соответствующий патент Кореи № 0353014) раскрыли новое производное пиразолопиримидинона, эффективное в отношении ингибирования активности PDE-5. Затем авторы настоящего изобретения продолжили исследовать производное пиразолопиримидинона, одного из ингибиторов PDE-5, и подтвердили, что производное пиразолопиримидинона проявляет более высокую эффективность в отношении доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, по сравнению с известным силденафилом. Кроме того, заявители настоящего изобретения установили, что поскольку производное пиразолопиримидинона имеет более длинный период полувыведения в условиях in vivo по сравнению с другими ингибиторами PDE-5, то повышается удобство введения и время, необходимое для достижения максимальной концентрации в крови, сокращается; и поскольку производное пиразолопиримидинона в меньшей степени подвергается метаболизированию в печени по сравнению с другими лекарственными препаратами, то возможность проявления побочных эффектов в результате взаимодействий между лекарственными препаратами является очень низкой (Xenobiotica, 2004, 34:973-982), и таким образом осуществили настоящее изобретение.

Техническая проблема

Следовательно, целью настоящего изобретения является обеспечение средства для предотвращения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH), содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1 в качестве активного ингредиента.

Другой целью настоящего изобретения является обеспечение средства для предотвращения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS), содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1 в качестве активного ингредиента.

Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение релаксанта для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы, содержащего производное пиразолопиримидинона формулы 1 в качестве активного ингредиента.

Техническое решение

Для осуществления указанной выше технической цели настоящее изобретение обеспечивает средство для предотвращения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH), содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента.

Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает средство для предотвращения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS), содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента.

Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы.

Преимущественные эффекты

Согласно настоящему изобретению средство, содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1, может расслаблять гладкую мускулатуру уретры или гладкую мускулатуру предстательной железы ингибированием активности PDE-5, которая разрушает с-GMP (Nippon Hinyokika Gakkai Zasshi, 1994, 85:1124-1130; J. Urol., 1995, 153:2004-2009; Eur. J. Pharmacol., 1998, 357:213-219) и приводит к устранению симптомов нижних мочевых путей (LUTS), вызванных доброкачественной гиперплазией предстательной железы (BPH), посредством снижения внутриуретрального давления (IUP). Кроме того, производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению имеет в 3 раза более длинный период полувыведения в условиях in vivo, чем другие лекарственные препараты аналогичного механизма действия по сравнению с другими ингибиторами PDE-5. Следовательно, оно имеет различные преимущества в том плане, что является возможным уменьшить кратность введения, при этом снижается время, необходимое для достижения максимальной концентрации в крови и очень низка частота проявления побочных эффектов. Кроме того, поскольку производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению в меньшей степени подвергается метаболизированию в печени по сравнению с другими лекарственными препаратами, в отличии от имеющихся лекарственных препаратов, которые метаболизируются с участием цитохрома Р450 3А4, то возможность проявления побочных эффектов в результате взаимодействий между лекарственными препаратами является очень низкой (Xenobiotica, 2004, 34:973-982) и для него характерен более высокий запас безопасности по сравнению с другими ингибиторами PDE-5.

Описание фигур

Указанные выше и другие признаки настоящего изобретения будут описаны при обращении к некоторым, приведенным в качестве примера вариантам его осуществления, иллюстрированным прилагаемыми фигурами, среди которых:

Фиг.1-4 представляют графики, показывающие снижение внутриуретрального давления, определенного при изменении стимулирующих электрических импульсов на моделях доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) после многократного введения производного пиразолопиримидинона по настоящему изобретению; и

Фиг.5-8 представляют графики, показывающие снижение внутриуретрального давления, определенного при изменении стимулирующих электрических импульсов на моделях доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) после однократного введения производного пиразолопиримидинона по настоящему изобретению.

Описание основных обозначений на указанных выше фигурах

*: показанные статистически достоверные различия по сравнению с нормальными крысами;

*: показанные статистически достоверные различия по сравнению с контрольными группами с BPH;

1 и 1': нормальные группы животных;

2 и 2': группы животных с удаленными семенниками;

3 и 3': группы животных с удаленными семенниками, обработанные растворителем;

4: группа животных с удаленными семенниками, обработанная соединением формулы 1 по настоящему изобретению в дозе 1 mpk (мг/кг) ;

4': группа животных с удаленными семенниками, обработанная соединением формулы 1 по настоящему изобретению в дозе 0,3 mpk (мг/кг) ;

5: группа животных с удаленными семенниками, обработанная соединением формулы 1 по настоящему изобретению в дозе 5 mpk (мг/кг) ;

5': группа животных с удаленными семенниками, обработанная соединением формулы 1 по настоящему изобретению в дозе 1 mpk (мг/кг) ;

6: группа животных с удаленными семенниками, обработанная соединением формулы 1 по настоящему изобретению в дозе 10 mpk (мг/кг).

Описание предпочтительных вариантов осуществления

Настоящее изобретение относится к средству, содержащему производное пиразолопиримидинона (5-[2-пропилокси-5-(1-метил-2-пиролидинилэтиламидосульфонил)фенил]-1-метилпропил-1,6-дигидро-7Н-пиразоло(4,3-d)пиримидин-7-он) формулы 1 в качестве активного ингредиента для предотвращения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH).

Формула 1

Производное пиразолопиримидинона формулы 1 представляет один из ингибиторов PDE-5 и для него характерны свойства, заключающиеся в том, что оно обладает высокой ингибирующей активностью и высокой избирательностью для PDE-5; оно легко всасывается, поскольку обладает лучшей растворимостью; оно обладает высокой биодоступностью и большим объемом распределения; и оно имеет в 3 раза более длинный период полувыведения в условиях in vivo по сравнению с силденафилом или варденафилом, препаратами аналогичного механизма действия.

Производное пиразолопиримидинона формулы 1 обладает следующими физико-химическими свойствами: оно плохо растворяется в воде; однако легко растворяется в уксусной кислоте, метаноле, хлороформе и тому подобное; представляет собой порошок белого или бледно-желтого цвета, не образует гидрата или сольвата, точка плавления составляет 158-161°С и значения pKa1 и pKa2 равняются соответственно примерно 6,5 и 12,5.

Производное пиразолопиримидинона формулы 1 получают способом синтеза, приблизительно состоящим из трех стадий. Заявители настоящего изобретения раскрыли способ получения соединения в заявке WO2000/027847 (соответствующий патент Кореи № 0353014), который схематично описывается следующим образом.

Вначале, на первой стадии получают 4-[2-пропилокси-5-(хлорсульфонил)бензамидо]-1-метил-3-пропил-5-карбамоилпиразол. Для его получения точно определенное количество 4-[2-пропилоксибензамидо]-1-метил-3-пропил-5-карбамоилпиразола добавляют к точно определенному количеству хлорсульфоновой кислоты, охлажденной до 0°С, затем полученную смесь перемешивают, фильтруют, промывают и высушивают с получением 4-[2-пропилокси-5-(хлорсульфонил)бензамидо]-1-метил-3-пропил-5-карбамоилпиразола.

На второй стадии из производного пиразола, полученного на первой стадии, получают 4-[2-пропилокси-5-(1-метил-2-пиролидинилэтиламидосульфонил)бензамидо]-1-метил-3-пропил-5-карбамоилпиразол. Для его получения точно определенное количество 2-(2-аминоэтил)-1-метилпиролидина добавляют к раствору в дихлорметане точно определенного количества 4-[2-пропилокси-5-(хлорсульфонил)бензамидо]-1-метил-3-пропил-5-карбамоилпиразола, полученного на первой стадии, и перемешивают. Затем реакционный раствор разбавляют дихлорметаном. Органический слой промывают, высушивают, концентрируют и фильтруют с получением 4-[2-пропилокси-5-(1-метил-2-пиролидинилэтиламидосульфонил)бензамидо]-1-метил-3-пропил-5-карбамоилпиразола.

Наконец, на третьей стадии получают производное пиразолопиримидинона по настоящему изобретению (5-[2-пропилокси-5-(1-метил-2-пиролидинилэтиламидосульфонил)фенил]-1-метилпропил-1,6-дигидро-7Н-пиразоло(4,3-d)пиримидин-7-он) из соединения, полученного на второй стадии. Для его получения точно определенное количество производного пиразола, полученного на второй стадии, растворяют в трет-бутаноле. Точно определенное количество трет-бутилата калия добавляют к полученному раствору и затем перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение определенного периода времени. Затем полученный раствор охлаждают, разбавляют, промывают и высушивают, проводят выпаривание при пониженном давлении, сольволиз и колоночную хроматографию на силикагеле, с получением таким образом определенного количества чистого производного пиразолопиримидинона по настоящему изобретению.

Настоящее изобретение относится к средству для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, и релаксанту для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы, содержащему производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента, которое можно описать следующим образом.

Настоящее изобретение относится к 1) релаксанту для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы, которая входит в уретру или предстательную железу; 2) средству для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) расслаблением гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы с помощью релаксанта и также 3) релаксанту и средству, содержащему производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента, пригодного для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH.

Конкретнее, настоящее изобретение относится к средству для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH), содержащему производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента.

Кроме того, настоящее изобретение относится к средству для предупреждения и лечения симптомов нижних мочевых путей (LUTS), содержащему производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента.

Средство, содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для предупреждения и лечения BPH или LUTS по настоящему изобретению, ингибирует активность PDE-5.

Средство, содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для предупреждения и лечения BPH или LUTS по настоящему изобретению, не ингибирует активность PDE-11, но ингибирует активность PDE-5.

Средство, содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для предупреждения и лечения BPH или LUTS по настоящему изобретению, не вызывает токсичности для семенников или миалгию, поскольку оно не обладает ингибирующим действием в отношении активности PDE-11.

Средство, содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для предупреждения и лечения BPH или LUTS по настоящему изобретению, снижает внутриуретральное давление.

Действие средства, содержащего производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для предупреждения и лечения BPH или LUTS по настоящему изобретению, продолжается в течение 12-24 ч без кумуляции препарата при однократном введении.

Средство, содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для предупреждения и лечения BPH или LUTS по настоящему изобретению, достигает максимальной концентрации в крови в течение 50-70 мин, предпочтительно 60 мин.

Период полувыведения средства, содержащего производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для предупреждения и лечения BPH или LUTS по настоящему изобретению, составляет 9-15 ч.

Кроме того, настоящее изобретение относится к релаксанту, содержащему производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента, для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы.

Релаксант, содержащий производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, ингибирует активность PDE-5.

Релаксант, содержащий производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, ингибирует активность PDE-5, но не ингибирует активность PDE-11.

Релаксант, содержащий производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, не вызывает токсичности для семенников или миалгию, поскольку он не обладает ингибирующим действием в отношении активности PDE-11.

Релаксант, содержащий производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, снижает внутриуретральное давление.

Действие релаксанта, содержащего производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, продолжается в течение длительного периода времени при низкой кратности введения.

Действие релаксанта, содержащего производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, продолжается в течение 12-24 ч без кумуляции препарата при однократном введении.

Релаксант, содержащий производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, достигает максимальной концентрации в крови в течение 50-70 мин, предпочтительно 60 мин.

Период полувыведения релаксанта, содержащего производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы по настоящему изобретению, составляет 9-15 ч.

Ниже настоящее изобретение будет описано подробно.

Когда ткань предстательной железы, окружающая уретру, аномально увеличивается, то внутриуретральное давление возрастает с развитием доброкачественной гиперплазии простаты (BPH), ассоциированной с дизурией. Подобная BPH может проявляться в симптомах нижних мочевых путей (LUTS). Различные симптомы, связанные с процессами удерживания и выделения мочи, в совокупности называют симптомами нижних мочевых путей (LUTS). Симптомы затруднений удерживания мочи включают частое мочеиспускание, императивный позыв к мочеиспусканию, ургентное недержание мочи, ночное мочеиспускание (никтурию), болезненное мочеиспускание (дизурию) и т.д. Симптомы затруднений мочевыделения включают слабое мочеиспускание, стрессовое мочеиспускание, слабость мочеточника, ощущение неполного опорожнения мочевого пузыря, отсутствие мочевыделения (анурез) и т.д. Различные структурные или болезненные состояния могут привести к развитию LUTS и известно, что предрасполагающими факторами для LUTS являются обструкция выходного отверстия мочевого пузыря, нарушения сокращения детрузора, гиперактивность детрузора и т.д., однако основным фактором является обструкция уретры, вызванная BPH. Следовательно, считается, что лечение обструкции уретры ослабляет LUTS.

Виды лечения таких состояний грубо разделяют на хирургическое и консервативное лечение. Хирургическое вмешательство является конечной стадией, но недавно привлекла внимание терапия лекарственными препаратами. Типичным препаратом для лечения BPH является альфа-блокатор, который воздействует на гладкую мускулатуру уретры или предстательной железы с расслаблением гладкой мускулатуры, тем самым оказывая лечебный эффект в отношении обструкции уретры и дизурии, возникающей за счет BPH. Следовательно, лекарственный препарат, обеспечивающий расслабление гладкой мускулатуры уретры, может вносить свой вклад в предупреждение и лечение BPH и LUTS.

Между тем, сообщалось с учетом результатов различных исследований по лечению BPH, что ингибиторы PDE-5, хорошо известные в качестве активных ингредиентов при лечении импотенции у мужчин, оказывают влияние на BPH и LUTS, связанные с BPH.

То есть по своему физиологическому влиянию на нижние мочевые пути оксид азота (NOs) регулирует расслабление и сокращение гладкой мускулатуры предстательной железы и гладкой мускулатуры уретры с ослаблением BPH и LUTS, связанных с BPH (Nippon Hinyokika Gakkai Zasshi, 1994, 85:1124-1130; J. Urol., 1995, 153:2004-2009; Eur. J. Pharmacol., 1998, 357:213-219)

Кроме того, оксид азота, продуцированный под действием эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS), активирует гуанилатциклазу. Гуанилат приводит к повышению уровня c-GMP с расслаблением гладкой мускулатуры уретры. Между тем, когда активность оксида азота, регулирующего гладкую мускулатуру предстательной железы и подавляющего сокращение мочевого пузыря, снижается, то зависимое от оксида азота расслабление гладкой мускулатуры предстательной железы ослабляется (European Urology 2005, 47:824-837). Следовательно, доноры оксида азота, которые расслабляют гладкую мускулатуру уретры и гладкую мускулатуру предстательной железы, могут способствовать устранению LUTS, тем самым широко используясь для лечения BPH.

Кроме того, поскольку известно, что запринаст, один из неспецифических ингибиторов PDE-5, который имеет механизм действия, связанный с путем NO-cGMP, расслабляет гладкую мускулатуру уретры, то были опубликованы результаты различных исследований по применимости ингибиторов PDE-5, включая соединение формулы 1 по настоящему изобретению, для лечения BPH (Eur. J. Pharmacol., 1994, 266:269-275). Действительно сообщались данные клинических испытаний о том, что виагра способствует устранению симптомов нижних мочевых путей (LUTS), вызванных доброкачественной гиперплазией предстательной железы (BPH), что является результатом расслабления гладкой мускулатуры предстательной железы, связанной с путем NO-cGMP. Позднее были приведены результаты 2 фазы клинических испытаний циалиса, одного из препаратов для лечения импотенции, о том, что он проявляет эффективность в отношении ослабления симптомов нижних мочевых путей (LUTS), вызванных доброкачественной гиперплазией предстательной железы (BPH) (BJU Int., 2003, 90:836-839; BJU Int., 2003, 92:534-538; http://www.ICOS.com).

При проведении клинических испытаний виагры, когда силденафил вводили 300 пациентам в течение 12 недель, было установлено, что заметно ослабляется импотенция, повышается уверенность в себе и качество жизни, а также ирритативные и обструктивные LUTS. Кроме того, при проведении отечественных клинических испытаний после введения таких лекарственных препаратов 68 пациентам в течение 12 недель было установлено, что симптомы нижних мочевых путей (LUTS) ослабляются с 15,3 до 12,3 баллов при использовании Международной системы суммарной оценки симптомов при заболеваниях предстательной железы (IPSS) и симптомы импотенции устранились в среднем с 27,4 до 41,5 баллов при оценке по шкале Международного индекса эректильной функции (IIEF) (http:medscape.com./viewartocle/517500, Financial News 224.11.11). Корпорация ICOS сообщала, что в двойном-слепом плацебо-контролируемом исследовании и 2 фазе РОС клинических испытаний при введении 5 мг цилиаса по схеме раз в день в течение 6 недель показатель IPSS поднялся на 2,8 баллов (1,2 баллов прибавились в плацебо-контролируемой группе) и в случае повышения дозы до 20 мг и введения препарата еще в течение 6 недель показатель поднялся на 3,8 баллов (1,7 баллов прибавились в плацебо-контролируемой группе), для обеих доз характерна статистическая достоверность. Между тем, побочными эффектами препарата были диспепсия, боли в спине, головная боль и т.д., и процент прерывания лечения за счет проявления побочных эффектов составил 3,6% (1,4% в плацебо-контролируемой группе) (http://www.ICOS.com).

Как уже указывалось выше, с учетом того, что расслабление гладкой мускулатуры уретры и гладкой мускулатуры предстательной железы и лечение LUTS и BPH тесно связаны друг с другом, заявители настоящего изобретения пришли к выводу, что средство, содержащее производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента по настоящему изобретению, ингибирует PDE-5, под действием которой происходит деградация c-GMP с расслаблением гладкой мускулатуры уретры и гладкой мускулатуры предстательной железы через путь c-GMP, связанный с оксидом азота, тем самым эффективно устраняя доброкачественную гиперплазию простаты (BPH) и симптомы нижних мочевых путей (LUTS), вызванных BPH, и провели различные эксперименты. То есть заявители наблюдали, что соединение по изобретению достоверно снижает внутриуретральное давление, вызванное BPH. Кроме того, заявители установили на модели на крысах с увеличенной предстательной железой, что при многократном или однократном введении повышение внутриуретрального давления существенно подавляется в зависимости от дозы и статистически достоверно (см. фиг.1-8). Кроме того, заявители показали, что соединение по изобретению расслабляет гладкую мускулатуру уретры и гладкую мускулатуру предстательной железы.

В дополнении настоящее изобретение, содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1 в качестве активного ингредиента, обеспечивает эффективное и стабильное средство, с точки зрения фармакокинетики, для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, по сравнению с другими известными ингибиторами PDE-5.

Фактически было установлено, что производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению обладает высокой тканевой аффинностью в органах мочеполовой системы по сравнению с другими известными ингибиторами PDE-5, и его концентрация стабильно сохраняется в этих органах в отличии от других ингибиторов PDE-5, концентрация которых быстро снижается со временем (см. таблицу 2).

Между тем, в процессе внедрения производного пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению в качестве средства для лечения импотенции, 1 фазу клинических испытаний по оценке безопасности, переносимости и определению фармакокинетических/фармакодинамических показателей соединения формулы 1 провели в Корее на здоровых мужчинах в период с августа 2001 г. по август 2002 г., и подобные испытания были проведены в Англии в период с апреля 2002 г. по декабрь 2002 г. для внедрения за рубежом. В результате проведения этих испытаний соединение формулы 1 по настоящему изобретению хорошо всасывается в период 1-2 ч от T_max после приема внутрь и период полувыведения составляет 9-15 ч независимо от введенной дозы. Кроме того, после многократного введения один раз в день в течение 7 суток не наблюдали значительной кумуляции препарата, исходя из этого можно заключить, что продолжительность действия препарата составляет 12-24 ч, и это было фактически подтверждено в 3 фазе клинических испытаний.

Кроме того, в результате исследования аномальных реакций на испытуемое соединение в 1 фазе клинических испытаний не было обнаружено существенных аномальных реакций на соединение формулы 1 и большая их часть представляла собой проходящие, легкие случаи. Также с точки зрения характера проявления побочных эффектов, обнаруженных во 2 фазе и 3 фазе клинических испытаний, то степень и частота побочных эффектов была очень низкой по сравнению с характерными для существующих препаратов для приема внутрь, используемых для лечения импотенции.

Как показывают данные таблицы 1, приведенной ниже, для соединения формулы 1 по настоящему изобретению характерна наиболее низкая частота прерывания введения среди ингибиторов PDE-5. Кроме того, циалис, самый последний препарат, проявляет возможные побочные эффекты, такие как токсичность для семенников или миалгия, поскольку он ингибирует активность PDE-11, в то время как соединение формулы 1 по настоящему изобретению не оказывает ингибирующего действия в отношении активности PDE-11, и подобные побочные эффекты не проявляются.

Также остаточный уровень соединения формулы 1 по настоящему изобретению после метаболизирования в печени составляет 93,0%, что является очень высоким показателем по сравнению с 34,6% для силденафила, одного из известных ингибиторов PDE-5, судя по этим данным можно понять, что для соединения формулы 1 по изобретению существует очень небольшая вероятность проявления побочных эффектов при взаимодействии препаратов, поскольку на него не оказывает влияния метаболизм в печени по сравнению с другими лекарственными препаратами (Xenobiotica, 2004, 34:973-982).

Таблица 1
Частота прерывания (%) введения за счет проявления побочных эффектов ингибиторов PDE-5 при клинических испытаниях для лечения импотенции
	Плацебо	5 мг	10 мг	20 мг	25 мг	50 мг	100 мг	200 мг
Виагра	0,7	-	-	-	0,0	0,7	3,9	-
Левитра	1,6	2,7	2,9	6,6	-	-	-	-
Циалис	1,3	0,7	1,6	3,1	-	-	-	-
Соединение формулы 1	0,0	-	-	-	-	-	0,0	1,2

где «-» означает отсутствие проведения клинических испытаний.

Данные результаты показывают, что соединение формулы 1 по настоящему изобретению обладает меньшими побочными эффектами и хорошими фармакокинетическими характеристиками по сравнению с известными препаратами, такими как виагра, циалис и т.д., при этом повышается безопасность и продолжительность действия препарата. Такая высокая безопасность и благоприятные фармакокинетические свойства в одинаковой степени применимы для лечения BPH и LUTS, а также импотенции. В результате поскольку соединение формулы 1 по настоящему изобретению проявляет одинаковое действие даже при однократном введении, то оно представляет собой более удобный лекарственный препарат и вызывает меньшие побочные эффекты по сравнению с известными препаратами, которые вводят три раза в день. Следовательно, можно заключить, что соединение формулы 1 по настоящему изобретению является безопасным и эффективным препаратом для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, или релаксантом для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы.

Следовательно, производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению, можно использовать эффективно и безопасно в качестве средства для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, или в качестве релаксанта для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы.

Средство для предупреждения и лечения, содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению, можно использовать в виде обычной фармацевтической композиции. То есть производное пиразолопиримидинона по изобретению можно использовать различными способами, такими как пероральное и парентеральное введение в реальных клинических испытаниях, и пероральное введение является предпочтительным в настоящем изобретении. Кроме того, производное пиразолопиримидинона по изобретению можно формулировать в виде различных лекарственных форм с применением обычно используемых разбавителей или вспомогательных веществ, таких как наполнители, разбавители, связующие вещества, увлажнители, разрыхлители, поверхностно-активные вещества и т.д.

Твердые лекарственные формы для перорального введения включают таблетки, пилюли, порошки, гранулы, капсулы и т.д. Такие твердые лекарственные формы получают смешением производного пиразолопиримидинона формулы 1, по меньшей мере, с одним вспомогательным веществом, таким как крахмал, карбонат кальция, сахароза или лактоза, желатин и т.д. В дополнении к обычным наполнителям можно добавить скользящие вещества, такие как стеарат магния, тальк и т.д.

Жидкие лекарственные формы для перорального введения, такие как суспензии, внутренние растворы, эмульсии, сиропы и т.д. для приема внутрь, могут содержать простые разбавители, например, воду и жидкий парафин, а также различные наполнители, например, увлажнители, подсластители, ароматизаторы, консерванты и т.д. Лекарственные формы для парентерального введения включают стерильные водные растворы, неводные растворители, суспензии, эмульсии, лиофилизованные средства, суппозитории и т.д. Неводные растворители и суспензии можно приготовить с использованием растительных масел, таких как пропиленгликоль и полиэтиленгликоль, оливковое масло или с использованием эфиров, подходящих для инъекционного введения, таких как этилолеат. В качестве основы для суппозиториев пригодными являются витепсол, макрогол, твин 61, какао-масло, лауриновая кислота и глицерожелатин.

Дозы фармацевтической композиции, содержащей производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению, могут варьировать в зависимости от различных соответствующих факторов, таких как масса, возраст, пол, состояние здоровья, рацион и скорость выделения у пациентов, время и способ введения и тяжесть симптомов. Как правило, предпочтительно вводить такие препараты взрослым в общей дозе от 20 до 200 мг раз или несколько раз в день.

Описание предпочтительного способа осуществления изобретения

Ниже настоящее изобретение будет описано более подробно при обращении к прилагаемым фигурам, на которых показаны предпочтительные варианты осуществления изобретения. Однако данное изобретение может быть осуществлено в различных формах и его не следует ограничивать вариантами осуществления, представленными ниже. В большей степени данные варианты осуществления приводятся для того, чтобы данное описание было подробным и полным, и в полной мере описывало объем изобретения для специалистов в данной области.

Пример 1: определение эффекта при многократном введении производного пиразолопиримидинона формулы 1 в отношении повышенного внутриуретрального давления на модели BPH на крысах

Последующий пример проводили для оценки эффекта на снижение внутриуретрального давления (IUP) при многократном введении производного пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению.

В настоящем опыте 36 белых крыс-самцов массой 300-350 г произвольно разделяли на 6 контрольных групп из 6 крыс каждая. Первую группу (1) оставляли без обработки и использовали в качестве нормальной контрольной группы и в другие группы входили животные с удаленными семенниками. Через пару суток после операции каждой крысе в третьей-шестой группах ежедневно вводили подкожно 1 мг тестостерона и 0,01 мг 17 бета-эстрадиола в течение 8 недель. Во вторую группу (2) входили крысы, у которых только были удалены семенники; животных третьей группы (3) обрабатывали только растворителем; крысам четвертой группы (4) вводили производное пиразолопиримидинона формулы 1 в дозе 1 мг/кг; крысам пятой группы (5) вводили производное пиразолопиримидинона формулы 1 в дозе 5 мг/кг и крысы шестой группы (6) получали производное пиразолопиримидинона формулы 1 в дозе 20 мг/кг; животным 4-6 групп соединение вводили перорально в течение 8 недель. Через 8 недель всем крысам проводили анестезию внутрибрюшинным введением пентобарбитала в дозе 50 мг/кг и вводили трубку из полиэтилена с иглой. Физиологический раствор вводили со скоростью 0,5 мл/10 мин с использованием шприцевого насоса для определения внутриуретрального давления (IUP). При определении наносили на гипогастральные нервы электрические импульсы величиной 5, 10 и 20 Гц с использованием анодного электрода из нержавеющей стали, и полученные данные приведены на фиг.1-4.

Как представлено на данных фигурах, базовая линия контрольной группы (2), у животных которой были только удалены семенники, была ниже по сравнению с нормальной контрольной группой (1), в то время как на модели BPH (группы 3-6) показатели были выше по сравнению с контрольной группой (1). В результате установлено, что внутриуретральное давление повышалось при наличии доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH). Кроме того, было показано, что внутриуретральное давление снижалось в зависимости от дозы и статистически достоверно при соответствующей стимуляции введенным производным пиразолопиримидинона формулы 1 в контрольных группах (группы 4-6). В результате становится очевидным, что средство, содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению, является полезно применимым для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH.

Пример 2: определение эффекта при однократном введении производного пиразолопиримидинона формулы 1 в отношении повышенного внутриуретрального давления на модели BPH на крысах

Последующий пример проводили для оценки эффекта на снижение внутриуретрального давления (IUP) при однократном введении производного пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению.

В настоящем опыте 30 белых крыс-самцов массой 300-350 г произвольно разделяли на 5 контрольных групп из 6 крыс каждая. Первую группу (1') оставляли без обработки и использовали в качестве нормальной контрольной группы и в другие группы входили животные с удаленными семенниками. Через пару суток после операции каждой крысе в третьей-пятой группах ежедневно вводили подкожно 1 мг тестостерона и 0,01 мг 17 бета-эстрадиола в течение 8 недель. Через 8 недель всем крысам проводили анестезию внутрибрюшинным введением пентобарбитала в дозе 50 мг/кг и вводили трубку из полиэтилена с иглой. Во вторую группу (2') входили крысы, у которых только были удалены семенники; животных третьей группы (3') обрабатывали только растворителем; крысам четвертой группы (4') вводили производное пиразолопиримидинона формулы 1 в дозе 0,3 мг/кг; крысам пятой группы (5') вводили производное пиразолопиримидинона формулы 1 в дозе 1 мг/кг; крысам четвертой и пятой групп делали внутривенные инъекции. Затем физиологический раствор вводили со скоростью 0,5 мл/10 мин с использованием шприцевого насоса для определения внутриуретрального давления (IUP). При определении наносили на гипогастральные нервы электрические импульсы величиной 5, 10 и 20 Гц с использованием анодного электрода из нержавеющей стали и полученные данные приведены на фиг.5-8.

Как представлено на данных фигурах, базовая линия контрольной группы (2'), у животных которой были только удалены семенники, была ниже по сравнению с нормальной контрольной группой (1'), в то время как на модели BPH (группы 3'-5') показатели были выше по сравнению с контрольной группой (1') при одинаковых результатах, приведенных на фиг.1-4. В результате установлено, что внутриуретральное давление повышалось при наличии доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH). Кроме того, было показано, что повышение внутриуретрального давления предупреждалось в зависимости от дозы при введении производного пиразолопиримидинона формулы 1 в контрольных группах (группы 4'-5'). Несмотря на то, что у крыс контрольной группы (4'), обработанных производным пиразолопиримидинона формулы 1 в дозе 0,3 мг/кг, не наблюдали достоверного снижения внутриуретрального давления при импульсах величиной 5 и 10 Гц, достоверное увеличение все-таки имело место при 20 Гц. Кроме того, было показано, что средство, содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению, проявляло высокое действие в отношении предупреждения увеличения внутриуретрального давления по сравнению с силденафилом того же объема, одного из ингибиторов PDE-5. В результате становится очевидным, что средство, содержащее производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению, является полезно применимым для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH.

Пример 3: распределение в тканях мочеполовых органов

Последующий пример проводили для оценки распределения производного пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению в мочеполовых органах.

Белых крыс-самцов Спрегью-Даули (SD) произвольно распределяли по 4-5 крыс на различные временные точки. Одно из двух, производное пиразолопиримидинона формулы 1 и силденафил, из расчета 30 мг/кг/5 мл растворяли в 0,05 Н растворе лимонной кислоты и вводили крысам. На различные временные точки, 30 мин, 2 ч и 6 ч, после ведения отбирали пробы крови из брюшной аорты и извлекали мочеполовые органы. К извлеченным органам добавляли фосфатный буфер с рН 7,4 и их гомогенизировали. Затем гомогенизированные органы центрифугировали для количественного определения производного пиразолопиримидинона формулы 1 и силденафила в супернатантах с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Анализ проводили с использованием колонки Hichrom HIRPB (150×4,6 мм, размер частиц: 5 мкм) при длине волны 292 нм с подвижной фазой из 20 нМ KН₂РО₄ и ацетонитрила в объемном соотношении 70:30. Скорость подвижной фазы составляла 1 мл/мин и количество вводимой пробы равнялось 100 мкл. Производное пиразолопиримидинона формулы 1 и силденафил определяли количественно с использованием внутреннего стандарта и виде соотношения площадей.

Таблица 2
Время (мин)	Концентрация в органах (мкг/мл)
Соединение формулы 1	Силденафил
30	0,386	0,319
120	0,665	0,633
360	0,590	0,259

Как представлено в таблице 2, производное пиразолопиримидинона формулы 1 показывало большую аффинность для мочеполовых органов по сравнению с силденафилом. Кроме того, максимальная концентрация силденафила в органах быстро снижалась со временем, однако концентрация производного пиразолопиримидинона формулы 1 в органах существенно не уменьшалась по сравнению с максимальными значениями даже спустя 6 ч. В частности, можно видеть, что концентрация производного пиразолопиримидинона формулы 1 в органах даже спустя 6 ч была в 2 раза выше по сравнению с силденафилом.

Следовательно, производное пиразолопиримидинона формулы 1 по настоящему изобретению можно эффективно и безопасно использовать в качестве средства для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, или в качестве релаксанта для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы.

Пример 4: опыт по определению фармакокинетики производного пиразолопиримидинона в организме человека

Добровольцы, являющиеся пациентами с ВРН, в возрасте от 45 до 65 лет, с массой тела 45 кг и с отклонением от идеальной массы тела, составляющей 15%, добровольно приняли решение об участии в опыте, подтвердили в письменной форме, что они будут надежными и готовы способствовать проведению опыта и соблюдать ограничения, и их произвольно разделили на группы, которым соответственно вводили 100, 50 и 10 мг производного пиразолопиримидинона формулы 1 и силденафила. Общее количество участников в опыте составляло 10 человек, 5 участникам вводили производное пиразолопиримидинона формулы 1 и 5 другим - силденафил.

Опыт проводили как двойной-слепой и его участникам испытуемые препараты вводили с 240 мл воды в период с 8:00 до 9:00 утра в день проведения испытаний. После введения все участники не принимали пищу в течение 4 ч. После голодания они завтракали на стандартном рационе и через 9 ч обедали на стандартном рационе. Пробы крови отбирали перед введением испытуемых препаратов и через 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5; 3; 4; 5; 6; 8; 12 и 24 ч после введения в день проведения испытаний. Из отобранных образцов крови готовили плазму и анализировали с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). К 0,5 мл плазмы крови добавляли 100 мкл 0,1 М раствора карбоната натрия и 1,0 мл диэтилового эфира и тщательно перемешивали в течение 1 мин. Затем полученные растворы центрифугировали при 12000 ppm в течение 3 мин. Затем собирали супернатанты, из которых удаляли органические растворители с использованием системы Speed-Vac, к которым добавляли 100 мкл подвижной фазы, перемешивали и вводили в хроматограф для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Результаты приведены в таблице 3 ниже.

Таблица 3
	Соединение формулы 1 (100 мг)	Синденафил (50 мг)
Период полувыведения (время)	12,1±3,2а	4,1±1,1
а - Среднее значение ± стандартное отклонение

Как показано в таблице 3, период полувыведения соединения формулы 1 составлял примерно 9-15 ч, что в 3 раза выше по сравнению с этим же показателем для силденафила. Следовательно, можно придти к заключению, что поскольку соединение формулы 1 по настоящему изобретению имеет больший период полувыведения по сравнению с другими ингибиторами PDE-5, то число введений можно сократить и, тем самым, повысить удобство введения для пациентов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (BPH) и симптомами нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH.

Ниже приводятся в качестве примера различные фармацевтические формы лекарственных препаратов по настоящему изобретению.

Пример получения: фармацевтический препарат для приема внутрь

1. Приготовление порошка
Производное пиразолопиримидинона формулы 1	2 г
Лактоза	1 г

Указанные выше ингредиенты смешивали друг с другом и упаковывали в герметичный пакет с получением таким образом порошка.

2. Приготовление таблеток
Производное пиразолопиримидинона формулы 1	1100 мг
Кукурузный крахмал	100 мг
Лактоза	100 мг
Стеарат магния	2 мг

Указанные выше ингредиенты смешивали друг с другом с получением таблетки с использованием обычного способа приготовления таблеток.

3. Приготовление капсул
Производное пиразолопиримидинона формулы 1	1100 мг
Кукурузный крахмал	100 мг
Лактоза	100 мг
Стеарат магния	2 мг

Указанные выше ингредиенты смешивали друг с другом с получением капсулы в желатиновой оболочке с использованием обычного способа приготовления капсул.

Несмотря на то, что настоящее изобретение было описано при обращении к некоторым приведенным в качестве примера его вариантам осуществления, специалистам в данной области очевидно, понятно, что могут быть сделаны различные модификации, не отступая от принципа или объема настоящего изобретения, ограниченного прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентными вариантами.

Промышленная применимость

Средство для предупреждения и лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH) и симптомов нижних мочевых путей (LUTS), связанных с BPH, и релаксант для расслабления гладкой мускулатуры уретры или гладкой мускулатуры предстательной железы, содержащие производное пиразолопиримидинона в качестве активного ингредиента, в меньшей степени проявляет побочные эффекты, повышает восприятие у пациентов и снижает кратность введения, поскольку его период полувыведения длиннее по сравнению с другими ингибиторами с аналогичным механизмом действия, тем самым, оно является промышленно применимым.