защитное средство для нейронных клеток сетчатки, содержащее в качестве активного ингредиента производные индазола

Формула изобретения

1. Защитное средство для нейронных клеток сетчатки, содержащее в качестве активного ингредиента соединение, представленное следующей общей формулой (1) или его солью:



кольцо Х представляет бензольное или пиридиновое кольцо;

R¹ и R² являются одинаковыми или различными и представляют собой атом водорода или алкильную группу;

R¹ и R² могут быть соединены и образовывать циклоалкановое кольцо;

R³ представляет гидроксидную группу, алкокси группу, арилокси группу, циклоалкильную группу, алкиламино группу, ариламино группу, нитро группу, циано группу или моноциклический гетероцикл; и циклическая часть бензольного кольца, пиридинового кольца, циклоалканового кольца, арилокси группа, циклоалкильная группа, ариламино группа или моноциклический гетероцикл, определенные выше, могут иметь один или более заместитель, выбранный из атомов галогена, алкокси группы и алкильной группы и алкильной частью алкильной группы, алкокси группы или алкиламино группы, определенных выше, могут иметь один или более заместитель, выбранный из атомов галогена и алкокси группы.

2. Защитное средство по п.1, в котором в общей формуле (1), кольцо Х представляет бензольное или пиридиновое кольцо;

R¹ и R ² являются одинаковыми или различными и представляют алкильную группу;

R³ представляет алкокси группу, циклоалкильную группу, алкиламино группу, нитро группу, циано группу или моноциклический гетероцикл и алкильная часть алкокси группы, определенная выше, может быть замещена одним или более атомами галогена.

3. Защитное средство по пп.1 и 2, в котором в общей формуле (1) кольцо Х представляет бензольное или пиридиновое кольцо;

R¹ и R² представляют метильную группу;

R³ представляет метокси группу, дифторметокси группу, циклопропильную группу, диметиламино группу, нитро группу, циано группу, пирролидиновое кольцо или изооксазольное кольцо.

4. Защитное средство нейронных клеток сетчатки, включающее в качестве активного ингредиента, соединение, выбранное из:

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-нитро-1Н-индазол,

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-диметиламино-1 Н-индазол,

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(пирролидин-1-ил)-1Н- индазол,

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-метокси-1Н-индазол,

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-циано-1Н-индазол,

5-[5-(1-амино-1-метил)пиридин-2-ил]-4-дифторметокси-1Н-индазол,

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(изоксазол-5-ид)-1Н-индазол и

5-[5-(1-амино-1-метил)пиридин-2-ил]-4-циклопропил-1Н-индазол или их соли.

5. Защитное средство по любому из пп.1, 2 или 4, в котором нейронные клетки сетчатки являются фоторецепторными клетками, биполярными клетками, оптическими ганглионарными клетками, горизонтальными клетками или безаксонными клетками.

6. Защитное средство по п.3, в котором нейронные клетки сетчатки являются фоторецепторными клетками, биполярными клетками, оптическими ганглионарными клетками, горизонтальными клетками или безаксонными клетками.

7. Защитное средство по любому из пп.1, 2 или 4, которое применяют для профилактики и лечения глазных болезней.

8. Защитное средство по п.3, которое применяют для профилактики и лечения глазных болезней.

9. Защитное средство по любому из пп.1, 2 или 8, в котором глазные болезни связаны с поражением нейронных клеток сетчатки.

10. Профилактическое или терапевтическое средство против поражения нейронных клеток сетчатки, включающее соединение или его соль, охарактеризованные в любом из пп.1-4 в качестве активного ингредиента.

11. Способ защиты от поражения нейронных клеток сетчатки, включающий введение пациенту эффективного количества соединения или его соли, охарактеризованного в пп.1-4.

12. Способ профилактики или лечения болезней, связанных с поражением нейронных клеток сетчатки, включающий назначение пациенту эффективного количества соединения или его соли, охарактеризованного в пп.1-4.

13. Способ профилактики или лечения поражения нейронных клеток сетчатки, включающий назначение пациенту эффективного количества соединения или его соли, охарактеризованного в пп.1-4.

14. Применение соединения или его соли, охарактеризованного в любом из пп.1- 4 для защиты нейронных клеток сетчатки.

15. Применение соединения или его соли, охарактеризованного в любом из пп.1-4 для профилактики или лечения болезней, связанных с поражением нейронных клеток сетчатки.

16. Применение соединения или его соли, охарактеризованного в любом из пп.1-4 для профилактики или лечения поражения нейронных клеток сетчатки.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к защитному средству для нейронных клеток сетчатки, содержащему в качестве активного ингредиента производные индазола.

Уровень техники

Сетчатка является тканью толщиной от 0,1 до 0,5 мм, состоящая из десяти слоев внутренней оболочки, слоя нервных волокон, слоя ганглионарных клеток, слоя внутренних сетевидных клеток, внутреннего нуклеарного слоя, слоя внешних сетевидных клеток, внешнего нуклеарного слоя, внешней оболочки, слоя фоторецепторных клеток и слоя пигментного эпителия сетчатки, и в ней присутствуют группы нейронных клеток сетчатки, включающих фоторецепторные клетки, биполярные клетки, ганглионарные клетки, горизонтальные клетки, безаксонные клетки и клетки Мюллера (Muller).

Нейронные клетки сетчатки играют важную роль в получении и передаче визуальной информации, например, превращением светового раздражения в электрический сигнал и передачей сигнала в мозг.

Более точное описание механизма такой передачи состоит в превращении визуальной информации из глаз в электрический сигнал через фоторецепторные клетки и передаче к ганглионарным клеткам посредством горизонтальных, биполярных и/или безаксонных клеток. Затем электрический сигнал передается в мозг по зрительному нерву, который представляет собой пучок волокон зрительных нервов, включающих аксоны ганглионарных клеток.

При повреждении указанных нейронных клеток сетчатки по различным причинам гомеостаз (функция снабжения кислородом или питания нейронных клеток сетчатки путем кровообращения сетчатки и т.п.) нейронных клеток сетчатки не сохраняется и передача визуальной информации в мозг подавляется (ингибируется). Например, широко известно, что дисфункция нейронных клеток сетчатки вызывается различными болезнями сетчатки, такими как закупорка сосудов сетчатки, диабетическая ретинопатия, ишемическая зрительная невропатия, глаукома, дегенерация желтого пятна, пигментная дегенерация сетчатки и болезнь Лебера (Leber) (Brain Res. Bull., 62(6), 447-453 (2004)).

Ранее было установлено, что гибель нейронных клеток сетчатки из-за ишемии сетчатки является одной из причин поражения нейронных клеток сетчатки и были опубликованы следующие случаи и им подобные, касающиеся гибели нейронных клеток сетчатки из-за ишемии сетчатки (JP-A-2003-146904 и Nature Rev., 2, 448-459 (2003)).

1. Механизм гибели нейронных клеток сетчатки из-за ишемии сетчатки подобен механизму гибели церебральных нейронных клеток во время церебральной ишемии.

2. Вкратце ишемия сетчатки наступает при селективном поражении внутреннего слоя сетчатки (внутренний сетчатый слой).

3. Может наблюдаться избыточное выделение глутамата при ишемии сетчатки.

4. Гибель нейронных клеток сетчатки вызывается инъекцией возбуждающих аминокислот, например глутамата, в стекловидное тело.

5. Сверхраздражение, передаваемое N-метил-D-аспартат(NMDA) рецепторами сетчатки, способствует притоку кальция (Са) в клетки, что приводит к повреждению клеток путем индуцирования монооксида азота (NО).

Исходя из этого, полагают, что лекарственное средство, например ингибитор нейротоксичности глутамата, антагонист NMDA рецепторов или ингибитор синтеза NO применимо для лечения глазных болезней, вызванных поражением нейронных клеток сетчатки, и проведены различные исследования.

Например, JP-A-2001-072591 раскрывает защитное средство для нейронных клеток сетчатки, включая нипрадиол, который является одним из -блокаторов в качестве активного ингредиента. WO 01/056606 раскрывает защитное средство для зрительных ганглионарных клеток, включающее рецепторы белков антагонистов интерлейкина-1 в качестве активного ингредиента. WO 03/004058 раскрывает защитное средство для зрительных ганглионарных клеток, включающее антагонист ₁ рецепторов, таких как гидрохлорид буназозина в качестве активного ингредиента. Experimental Eye Res., 72, 479-486 (2001) раскрывает защитный эффект нейронных клеток латанопроста, который является одним из производных простагландина и т.д.

С другой стороны, WO 2005/035506 раскрывает производные индазола в качестве ингибитора Rho киназы.

Однако указанная публикация совсем не раскрывает защитного эффекта производных индазола по отношению к нейронным клеткам сетчатки.

Краткое описание чертежей

Чертеж представляет график, представляющий отношения выживаемости групп тестируемых соединений, когда выживаемость среды дополнительной группы после добавления глутамата принята за 100%.

Раскрытие изобретения

Цели изобретения

Представляется весьма интересным найти новое медицинское применение производных индазола.

Средства достижения целей

Соответственно настоящее изобретение включает интенсивные исследования с целью нахождения новых применений производного индазола. В результате было установлено, что производное индазола ингибирует гибель нейронных клеток сетчатки, вызываемую глутаматом, в эмбриональных нейронных клетках сетчатки крыс, другими словами производное индазола воздействует непосредственно на нейронные клетки сетчатки, демонстрируя защитный эффект по отношению к нейронным клеткам, что позволило создать настоящее изобретение.

"Производное индазола" в описании обозначает соединение, представленное следующей общей формулой (1) или его солью, и настоящее изобретение направлено на создание защитного средства для нейронных клеток сетчатки, включающего соединение или его соль в качестве активного ингредиента.

[Кольцо Х представляет бензольное или пиридиновое кольцо;

R¹ и R² являются одинаковыми или различными и представляют атомы водорода или алкильную группу;

R¹ и R² могут быть соединены и образовывать циклоалкановое кольцо;

R³ представляет гидроксидную группу, алкоксигруппу, арилоксигруппу, циклоалкильную группу, алкиламиногруппу, ариламиногруппу, нитрогруппу, цианогруппу или моноциклический гетероцикл; и

циклическая часть бензольного кольца, пиридинового кольца, циклоалканового кольца, алкоксигруппа, арилоксигруппа, циклоалкильную группа, ариламиногруппа или гетероцикл с одним кольцом, определенные выше, могут иметь один или более заместитель, выбранный из атомов галогена, алкоксигруппы и алкильной группы и алкильной частью алкильной группы, алкоксигруппы или алкиламиногруппы, определенных выше, могут иметь один или более заместитель, выбранный из атомов галогена и алкоксигруппы.

Здесь и далее будут применяться те же самые определения.

Соответствующие кольца, атомы и группы, определенные в настоящем описании, будут описаны в деталях далее.

"Циклоалкановое кольцо" относится к циклоалкановому кольцу с 3-8 атомами углерода. Отдельные примеры указанных колец включают циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклогексан, циклогептан, циклооктан и т.п.

"Моноциклический гетероцикл" относится к насыщенному или ненасыщенному моноциклическому гетероциклу, имеющему один или более гетероатом, выбранный из атомов азота, атомов кислорода и атомов серы в кольце с 2-6 атомами углерода.

Отдельные примеры "насыщенного моноциклического гетероцикла" включают пирролидин, пиразолидин, имидазолидин, триазолидин, пиперидин, гексагидропиридазин, гексагридропиримидин, пиперазин, гомопиперидин, гомопиперазин и т.п., каждый из которых содержит атом азота в кольце; тетрагидрофуран, тетрагидропиран и т.п., каждый из которых содержит атом кислорода в кольце; тетрагидротиофен, тетрагидропиран и т.п., каждый из которых содержит атом серы в кольце; оксазолидин, изоксалидин, морфолин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом кислорода в кольце; тиазолидин, изотиазолидин, тиоморфолин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом серы в кольце и т.п.

Отдельные примеры "ненасыщенного моноциклического гетероцикла" включают дигидропиррол, пиррол, дигидропиразол, пиразол, дигадроимидазол, имидазол, дигидротриазол, триазол, тетрагидропиридин, дигидропиридин, пиридин, тетрагидропиридазин, дигидропиридазин, пиридазин, тетрагидропиримидин, дигидропиримидин, пиримидин, тетрагидропиразин, дигидропиразин, пиразин и т.п., каждый из которых содержит атом азота в кольце; дигидрофуран, фуран, дигидропиран, пиран и т.п., каждый из которых содержит атом кислорода в кольце; дигидротиофен, тиофен, дигидротиопиран, тиопиран и т.п., каждый из которых содержит атом серы в кольце; дигидрооксазол, оксазол, дигидроизоксазол, изоксазол, дигидрооксазин, оксазин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом кислорода в кольце; дигидротиазол, тиазол, дигидроизотиазол, изотиазол, дигидротиазин, тиазин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом серы в кольце и т.п.

"Атом галогена" относится к фтору, хлору, брому или йоду.

"Алкил" относится к неразветвленному или разветвленному алкилу с 1-6 атомами углерода. Отдельные примеры включают метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, изопентил и т.п.

"Алкокси" относится к неразветвленной или разветвленной алкоксигруппе с 1-6 атомами углерода. Его отдельные примеры включают метокси, этокси, н-пропокси, н-бутокси, н-пентокси, н-гексилокси, изопропокси, изобутоксил, втор-бутокси, трет-бутокси, изопентокси и т.п.

"Арилокси" относится к моноциклической ароматической углеводородоксигруппе или бициклической или трициклической конденсированной углеводородоксигруппе с 6-14 атомами углерода. Отдельные примеры включают фенокси, нафтилокси, антрилокси, фенантрилокси и т.п.

"Циклоалкил" относится к циклоалкилу с 3-8 атомами углерода. Отдельные примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил и т.п.

"Алкиламино" относится к моноалкиламино или диалкиламиногруппам с 1-12 атомами углерода. Отдельные примеры включают метиламино, этиламино, этилметиламино, диметиламино, диэтиламино, дигексиламино и т.п.

"Ариламино" относится к моноариламино или диариламино группам с 6-28 атомами углерода. Отдельные примеры включают фениламино, нафтиламино, метилфениламино, этилфениламино, дифениламино и т.п.

В случае когда "производное индазола" имеет "свободную гидроксигруппу", "свободную аминогруппу", "свободную алкиламино группу", "свободную ариламино группу" или "моноцикличный гетероцикл со свободным атомом азота" в качестве заместителя, указанные группы могут быть защищены защитной группой.

Защитная группа для "свободной гидрокси группы" относится к группе общеизвестной в качестве защитной группы для "свободной гидрокси группы", включая замещенную или незамещенную алкильную группу или незамещенную алкенильную группу, например метоксиметильную группу, бензильную группу, тритильную* (трифенилметильную) группу, 4-метоксифенилметильную группу, бензоилоксиметильную группу, метальную группу или аллильную группу; замещенную или незамещенную гетероциклическую группу, например 3-бромтетрагидропиранильную группу, тетрагидропиранильную группу или тетрагидрофуранильную группу; замещенную или незамещенную алкилкарбонильную группу или замещенную или незамещенную арилкарбонильную группу, например, трифторацетильную группу, ацетильную группу, 4-хлорбензоильную группу или бензоильную группу; замещенную или незамещенную алкилоксикарбонильную группу, незамещенную алкенилоксикарбонильную или замещенную или незамещенную арилоксикарбонильную группу, например бензилоксикарбонильную группу, 4-метоксибензилоксикарбонильную группу 9-флуоренилметоксикарбонильную группу, метоксикарбонильную группу, этоксикарбонильную группу, изобутоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, винилоксикарбонильную группу, аллилоксикарбонильную группу, 4-нитрофенилоксикарбонильную группу или фенилоксикарбонильную группу; замещенную силильную группу, например триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу, триизопропилсилильную группу, трет-бутилдиметилсилильную группу, трет-бутилдифенилсилильную группу и т.п.

Защитная группа для "свободной аминогруппы" "свободной алкиламиногруппы", "свободной ариламиногруппы", или "моноциклического гетероцикла со свободным атомом азота" относится к группе, общеизвестной в качестве защитной группы для "свободной аминогруппы" "свободной алкиламиногруппы", "свободной ариламиногруппы", или "моноциклического гетероцикла со свободным атомом азота", включая замещенную алкильную группу или незамещенную алкенильную группу, например бензильную группу, тритильную группу, дифенилметильную группу, (4-метоксифенил)дифенилметильную группу или аллильную группу; гидрокарбонильную группу, например формильную группу; замещенную или незамещенную алкилкарбонильную группу, замещенную или незамещенную арилкарбонильную группу или незамещенную гетероциклическую карбонильную группу, например трихлорацетильную группу, трифторацетильную группу, ацетильную группу, 4-хлорбензоильную группу, бензоильную группу или пиконоильную группу; замещенную или незамещенную алкоксикарбонильную группу или замещенную или незамещенную арилоксикарбонильную группу, например, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонильную группу, бензилоксикарбонильную группу, дифенилметоксикарбонильную группу, метоксикарбонильную группу, изобутоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, 3-нитрофеноксикарбонильную группу или феноксикарбонильную группу; замещенную или незамещенную алкилсульфонильную группу или замещенную или незамещенную арилсульфонильную группу, например, бензилсульфонильную группу, толилсульфонильную группу, метилсульфонильную группу, 4-хлорфенилсульфонильную группу, 2,4,6-триметилфенилсульфонильную группу или фенилсульфонильную группу и т.п.

Кроме того, "атом азота индазольного кольца" "производного индазола" может быть защищен защитной группой.

Защитная группа для атома азота индазольного кольца относится к группе, общеизвестной в качестве защитной группы для "атома азота индазольного кольца", включая замещенную или незамещенную алкильную группу или незамещенную алкенильную группу, например бензильную группу, тритильную группу, дифенилметильную группу, 4-метоксифенилметильную или аллильную группу; гидрокарбонильную группу, например формильную группу; замещенную или незамещенную алкилкарбонильную группу, замещенную или незамещенную арилкарбонильную группу или незамещенную гетероциклическую карбонильную группу, например трихлорацетильную группу, трифторацетильную группу, ацетильную группу, 4-хлорбензоильную группу, бензоильную группу или пиконоильную группу; замещенную или незамещенную алкилоксикарбонильную группу или замещенную или незамещенную арилоксикарбонильную группу, например, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонильную группу, бензилоксикарбонильную группу, дифенилметоксикарбонильную группу, метоксикарбонильную группу, изобутоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, феноксикарбонильную группу или 3-нитрофеноксикарбонильную группу; замещенную или незамещенную алкилсульфонильную группу, замещенную или незамещенную арилсульфонильную группу, например, бензилсульфонильную или толилсульфонильную метилсульфонильную группу, 4-хлорфенилсульфонильную группу, 2,4,6-триметилфенилсульфонильную группу или фенилсульфонильную группу; замещенную или незамещенную гетероциклическую группу, например, 3-бромтетрагидропиранильную группу, тетрагидропиранильную группу или тетрагидрофуранильную группу и т.п.

Что касается "более групп" в настоящем изобретении, соответствующие группы могут быть одинаковыми или отличатся друг от друга. Кроме того, "группа", как использовано в описании, также включает соответствующие атомы и кольца. "Более", как использовано в описании, относится к максимальному числу возможных заместителей в группе или кольце и предпочтительно относится к 2 или 3.

"Соль" в настоящем изобретении особо не ограничена, если только она является фармацевтически приемлемой солью. Отдельные примеры включают соли неорганических кислот, например соляной кислоты, бромистоводородной кислоты, йодистоводородной кислоты, азотной кислоты, серной кислоты или фосфорной кислоты; соли органической кислоты, например уксусной кислоты, фумолевой кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты, лимонной кислоты, винной кислоты, адипиновой кислоты, молочной кислоты, метансульфоновой кислоты, трифторметансульфоновой кислоты или р-толуолсульфоновой кислоты; соли щелочных металлов, например лития, натрия или калия; соли щелочноземельных металлов, например кальция или магния; соли четвертичного аммония, метилйодид и т.п. и указанные соли также включены в настоящее изобретение.

В случае наличия геометрических или оптических изомеров в "производном индазола", указанные изомеры также включены в настоящее изобретение.

"Производное индазола" может быть в форме гидрата или сольвата.

Кроме того, в случае наличия протонной таутомерии в "производном индазола", указанные таутомерные изомеры также включены в настоящее изобретение.

(a) Предпочтительные примеры "производного индазола" настоящего изобретения включают соединения, в которых соответствующие группы являются группами, описанными ниже, в соединениях, представленных общей формулой (1) и их солями:

(а1) кольцо Х представляет бензольное кольцо или пиридиновое кольцо; и/или

(а2) R¹ и R² являются одинаковыми или различными и представляют алкильную; и/или

(а3) R³ представляет алкоксигруппу, циклоалкильную группу, алкиламиногруппу, нитрогруппу, цианогруппу или моноциклический гетероцикл; и/или

(а4) алкильная часть алкоксигруппы, определенной выше в (а3), может быть замещена одним или несколькими атомами галогена.

То есть предпочтительные примеры включают в соединениях, представленных общей формулой (1), соединения, которые соответствуют одному или комбинации двух или более пунктов, выбранных из вышеуказанных (а1), (а2), (а3) и (а4) и их солей.

(b) более предпочтительные примеры "производного индазола" настоящего изобретения включают соединения, в которых соответствующие группы являются группами, представленными ниже, в соединениях общей формулы (1) и их солей:

(b1) кольцо Х представляет бензольное кольцо или пиридиновое кольцо; и/или

(b2) R¹ и R² представляют метальную группу; и/или

(b3) R ³ представляют метоксигруппу, дифторметоксигруппу, циклопропильную группу, дифениламиногруппу, нитрогруппу, цианогруппу, пирролидиновое кольцо или изоксазольное кольцо.

То есть более предпочтительные примеры включают в соединениях, представленных общей формулой (1), соединения, которые соответствуют требованиям одного или комбинации двух или более пунктов, выбранных из вышеуказанных (b1), (b2) and (b3) и их солей.

(c) Кроме того, в соединениях общей формулы (1) "производное индазола", которое соответствует требованиям вышеуказанных пунктов (а) или (b) и в которых кольцо Х находится в положении 5 индазольного кольца, еще более предпочтительно.

(d) Кроме того, в соединениях общей формулы (1) "производное индазола", которое соответствует требованиям вышеуказанного пункта (с), и в котором, в случае когда кольцо X, связанное с индазольным кольцом, находится в положении 1, заместитель, представленный следующей общей формулой (2), замещает положение 4 кольца Х, особенно предпочтительно.

(е) Особенно предпочтительные примеры "производного индазола" настоящего изобретения включают следующие соединения и их соли.

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-нитро-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-диметиламино-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(пирролидин-1-ил)-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-метокси-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-циано-1Н-инадзол

5-[5-(1-амино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-дифторметокси-1Н-инадзол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(изоксазол-5-ил)-1Н-инадзол

5-[5-(1-амино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-циклопропил-1Н-инадзол

"Нейронные клетки сетчатки" в настоящем изобретении означают нейронные клетки, вовлеченные в передачу визуального сигнала в мозг. В частности, это означает фоторецепторные клетки, горизонтальные клетки, биполярные клетки, оптические ганглионарные клетки, безаксонные клетки и т.п.

"Болезнь глаза" в настоящем изобретении означает болезнь глаза, связанную с повреждением нейронных клеток сетчатки или повреждением сетчатки. В частности, это означает дефект поля зрения, закупорку сосудов сетчатки, диабетическую ретинопатию, ишемическую зрительную невропатию, глаукому, дегенерацию желтого пятна, пигментную дегенерацию сетчатки и болезнь Лебера (Leber) и т.п., и предпочтительно это означает дефект поля зрения, закупорку сосудов сетчатки, диабетическую ретинопатию, ишемическую зрительную невропатию, глаукому, дегенерацию желтого пятна, пигментную дегенерацию сетчатки и болезнь Лебера. Настоящее изобретение пригодно для предотвращения или лечения указанных болезней.

"Производное индазола" в настоящем изобретении может быть получено способом, описанным в WO 2005/035506 (PCT/JP2004/015663).

Кроме того, типичный способ получения "производного индазола" в настоящем изобретении будет представлен ниже. К тому же, отдельные способы получения каждого из "производных индазола" будут описаны в деталях в разделе "примеры получения" в примерах, которые будут приведены далее.

Метод синтеза 1

Метод синтеза 2

Метод синтеза 1 или метод синтеза 2: соединение А подвергают реакции сочетания с соединением В или соединение С подвергают реакции сочетания с соединением D в органическом растворителе в присутствии металлического катализатора и/или основания, в результате чего может быть получено "производное индазола".

В случае когда защитная группа применяется для удобства получения в вышеуказанных методах, защитная группа может быть удалена широко известным способом.

Что касается заместителя в кольце Х и/или кольце индазола, необходимый заместитель может быть введен на начальной стадии или также приемлемо, чтобы после получения основного каркаса вышеуказанными способами, необходимый заместитель мог быть введен в основной каркас с применением окисления, восстановления, алкилирования, этерификации, амидирования, оксимирования, реакции дегидратации, реакции снятия защиты, ацетилирования, гидролиза, трифлирирования, реакции сочетания, реакции циклизации и/или широко применяемых синтетических способов, в которых объединяются вышеуказанные реакции.

Способ получения синтетического промежуточного продукта "производного индазола" будет описан в деталях в разделе "примеров получения" в примерах, которые будут приведены далее.

"Производное индазола" настоящего изобретения может применяться орально или парентерально. Примеры лекарственной формы для применения включают таблетки, капсулы, гранулы, порошки, инъекционный раствор, глазные капли и т.п., и они могут быть приготовлены комбинацией широко применяемых способов получения.

Например, формы для орального применения, такие как таблетки, капсулы, гранулы или порошки, могут быть приготовлены сочетанием производного индазола и при необходимости с формообразователем, таким как лактоза, маннит, крахмал, кристаллическая целлюлоза, безводная кремневая кислота, карбонат кальция или гидрофосфат кальция, смазывающее вещество, например стеариновая кислота, стеарат магния или тальк, связующее, например крахмал, гидроксипропилцеллюлоза и поливинилпирролидин, дезинтегрирующий агент, например карбоксиметилцеллюлоза, малозамещенная гидроксипропилметилцеллюлоза или цитрат кальция, глазировочное средство, например гирдоксипропилметилцеллюлоза, макрогол** или силиконовая смола, стабилизатор, например этил p-гидроксибензоат или бензиловый спирт, модификатор лекарственных веществ, например подсластитель, кислый агент или отдушка или тому подобное.

Парентеральные формы, такие как инъекционный раствор или глазные капли могут быть получены сочетанием производного индазола при необходимости вместе с тоническим агентом, например, глицерином, пропиленгликолем, хлоридом натрия, хлоридом калия, сорбитом, маннитом, буфером, например, фосфорной кислотой, фосфатом, лимонной кислотой, ледяной уксусной кислотой, -аминокапроновой кислотой или трометамолом***; средством доведения рН, например, соляной кислотой, фосфорной кислотой, ледяной уксусной кислотой, гидроксидом натрия, гидроксидом калия, карбонатом или бикарбонатом натрия, солюбилизатором или дисперсантом, например полисорбатом 80, полиоксиэтилен гидрированным касторовым маслом 60, макроголом 4000, очищенным соевым лецитином или полиоксиэтиленом (160) полиоксипропиленом (30) гликолем, полимерами на основе целлюлозы, например гидроксипропилметилцеллюлозой или гидроксипропилцеллюлозой, регулятором вязкости, например поливиниловым спиртом или поливинилпирролидоном, стабилизатором, например этилендиаминтетрауксусной кислотой или этилендиаминтетраацетатом натрия обычно, применяемыми консервантами или антисептиком, например сорбиновой кислотой, сорбатом калия, хлоридом бензаколиния, хлоридом бензетония, метил n-гидроксибензоатом, пропил n-гидроксибензоатом или хлорбутанолом, успокаивающим средством, например хлорбутанолом, бензиловым спиртом или лидокаином и т.п.

В случае инъекционного раствора или глазных капель желательно, чтобы рН доводился от 4,0 до 8,0 и отношение осмотического давления доводилось до значения около 1,0.

Настоящее изобретение также относится к способу защиты нейронных клеток сетчатки, включающему введение пациенту эффективного количества вышеуказанного соединения или его соли, способ предотвращения или лечения повреждения нейронных клеток сетчатки, включающий введение пациенту эффективного количества вышеуказанного соединения или его соли.

Доза "производного индазола" может быть соответственно выбрана для применения в зависимости от симптомов, возраста, лекарственной формы и т.п. Например, в случае лекарственной формы для перорального приема обычно 0,01-1000 мг в день, предпочтительно 1-100 мг в день могут назначаться для разового приема или разделены на несколько приемов в день.

Кроме того, в случае глазных капель, обычно глазных капель, содержащих производное индазола с концентрацией от 0,0001 до 10% (мас./об.), предпочтительно 0,01% до 5% (мас./об.), могут быть назначены для разового приема или разделены на несколько приемов в день.

Преимущество настоящего изобретения

Как будет детально описано в разделе «Фармакологические тесты» далее, эффект воздействия производного индазола на гибель нейронных клеток сетчатки, вызванную глутаматом, был проверен с применением эмбриональных нейронных клеток сетчатки крысы. В результате производное индазола действует непосредственно на нейронные клетки сетчатки и ингибирует гибель нейронных клеток сетчатки, вызванную глутаматом.

То есть производное индазола обладает защитным эффектом по отношению к нейронным клеткам сетчатки и полезно для предотвращения и лечения глазных болезней, связанных с повреждением нейронных клеток сетчатки или повреждением сетчатки.

Наилучший способ осуществления настоящего изобретения

Далее будут описаны примеры получения "производного индазола" (примеры 1-15) в соответствии с настоящим изобретением и его синтетических промежуточных продуктов (сравнительные примеры 1-27), примеры приготовления и результаты фармакологических тестов. Однако указанные примеры описаны для обеспечения лучшего понимания настоящего изобретения и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Кроме того, значения Rf в физических характеристиках примеров представлены значениями, измеренными с применением тонкослойной хроматографии (TLC пластины с силикагелем 60F₂₅₄ (торговая марка), произведенные Merck Ltd.), и в химических структурных формулах Me представляет метальную группу, Вn представляет бензильную группу. Ас представляет ацетильную группу. Воc представляет трет-бутоксикарбонильную группу, Tf представляет трифторметансульфоновую группу, TBS представляет трет-бутилдиметилсилильную группу и ТНР представляет тетрагидропиранильную группу, если не оговорено иначе.

[Примеры получения]

(Сравнительный пример 1)

Синтез 1-бром-4-(1-циано-1-метилэтил)бензола (Сравнительное соединение 1-1)

45 г (1100 ммоль) гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле) добавляют порциями к раствору 100 г (510 ммоль) 4-бромфенилацетонитрила в 1500 мл N,N-диметилформамида при 0°С в токе аргона при перемешивании. Затем 95 мл (1500 ммоль) метилйодида добавляют по каплям при 0°С с перемешиванием, и смесь перемешивают при 10°С в течение 1 часа.

После завершения реакции реакционный раствор постепенно вливают в 900 г насыщенного водного раствора хлорида аммония, затем к нему добавляют 500 мл воды и смесь экстрагируют 2000 мл этилацетата. Органический слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, в результате чего получают 110 г названного соединения в виде темного коричневого масла (выход: 96%).

Значение Rf: 0,78 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 224,226 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,71 (s, 6H), 7,32-7,38 (m, 2H), 7,49-7,54 (m, 2H)

Далее сравнительное соединение 1-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 1-1.

2-Бром-5-(1-циано-1-метилэтил)пиридин (Сравнительное соединение 1-2)

Значение Rf: 0,32 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 225, 227 (M ⁺+1)

ИК спектр (КВr, см^-1): 2243

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃ , ч./млн): 1,76 (s, 6H), 7,52 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,67 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,7 Гц, 1H), 8,50 (d, J=2,7 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 2)

Синтез 4-(1-аминокарбонил-1-метилэтил)-1-бромбензола (Сравнительное соединение 2)

250 г (1800 ммоль) триметилсиланолата калия (чистота: 90%) добавляют к раствору 100 г (450 ммоль) 1-бром-4-(1-циано-1-метилэтил)бензола (сравнительное соединение 1-1) в 1000 мл толуола при комнатной температуре в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 4,5 часов при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и к нему добавляют по каплям 500 мл воды. Смешанный раствор перемешивают 25 минут при комнатной температуре и образующееся твердое вещество отфильтровывают и промывают 400 мл воды, в результате чего получают 99 г названного соединения в виде белого порошка (выход: 92%).

Точка плавления: 139-141°С

Значение Rf: 0,23 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 242, 244 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,56 (s, 6H), 5,18 (brs, 1H), 5,52 (brs, 1H), 7,25-7,30 (m, 2H), 7,46-7,51 (m, 2H)

(Сравнительный пример 3)

Синтез 5-(1-аминокарбонил-1-метилэтил)-2-бромпиридина (Сравнительное соединение 3)

9,60 мл (93,3 ммоль) 35% водного раствора перекиси водорода и 1,86 г (13,5 ммоль) карбоната калия добавляют к раствору 1,50 г (6,66 ммоль) 2-бром-5-(1-циано-1-метилэтил)пиридина (Сравнительное соединение 1-2) в 15 мл диметилсульфоксида при 0°С и смесь перемешивают в течение 15 минут. Затем охлаждение прекращают, и смесь перемешивают на водяной бане в течение 2 часов.

После завершения реакции реакционный раствор выливают в 200 мл воды, и смесь экстрагируют 500 мл 1,2-дихлорэтана. Органический слой последовательно промывают водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении, в результате чего получают 1,63 г названного соединения в виде белого порошка (выход: количественный).

Значение Rf: 0,17 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 243, 245 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,61 (s, 6H), 5,36 (brs, 2H), 7,47 (dd, J1=8,Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,59 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,7 Гц, 1H), 8,42 (dd, J1=2,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 4)

Синтез 1-бром-4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)бензола (Сравнительное соединение 4-1)

260 г (600 ммоль) [бис(трифторацетокси)йодо]бензола добавляют к раствору 99 г (410 ммоль) 4-(1-аминокарбонил-1-метилэтил)-1-бромбензола (Сравнительное соединение 2) в 1000 мл трет-бутанола при комнатной температуре в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 30 минут при кипячении с обратным холодильником. Затем добавляют 100 мл (1200 ммоль) пиридина и смесь перемешивают в течение 1 часа при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении и 500 г водного раствора 10% мас. лимонной кислоты добавляют к полученному остатку и затем смесь экстрагируют 2000 мл толуола. Органический слой последовательно промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. 200 мл н-гексана добавляют к полученному остатку и получаемое вещество отфильтровывают и промывают 400 мл холодного н-гексана, в результате чего получают 77 г названного соединения в виде светло-коричневого порошка (выход: 60%).

Точка плавления: 92-93°С

Значение Rf: 0,56 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 313, 315 (M⁺)

¹H-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,36 (brs, 9H), 1,59 (s, 6H), 4,90 (brs, 1H), 7,24-7,29 (m, 2H), 7,39-7,45 (m, 2H)

Далее сравнительное соединение 4-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 4-1.

2-Бром-5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин (Сравнительное соединение 4-2)

Точка плавления: 100-103°С

Значение Rf: 0,53 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 315, 317 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₂, ч./млн): 1,37 (brs, 9H), 1,61 (s, 6H), 4,95 (brs, 1H), 7,41 (dd, J1=8,3 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,56 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,7 Гц, 1H), 8,40 (dd, J1=2,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 5)

Синтез 4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)-1-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксабороланил)бензола (Сравнительное соединение 5)

370 мл (350 ммоль) 0,95 М раствора втор-бутиллития в н-гексане добавляют по каплям раствору 50 г (160 ммоль) 1-бром-4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)бензола (сравнительное соединение 4-1) в 800 мл диэтилового эфира при -78°С в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 30 минут. Затем 97 мл (480 ммоль) 2-изопропокси-4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолана добавляют по каплям при -78°С и смесь перемешивают при -50°С 2 часа.

После завершения реакции 300 г насыщенного водного раствора хлорида аммония добавляют к получаемому раствору и 450 мл воды вливают в раствор для разделения смеси на два слоя. Водный слой дважды экстрагируют 300 мл этилацетата и органические слои объединяют, промывают насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. 100 мл н-гексана добавляют к полученному остатку и полученное твердое вещество отделяют фильтрацией последовательно промывают 100 мл смешанного растворителя (н-гексан:этилацетат =4:1 (об./об.)) и 100 мл н-гексана в результате получают 33 г названного соединения в виде белого порошка (выход: 58%).

Точка плавления: 142-144°С

Значение Rf: 0,38 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 362 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,10-1,50 (m, 21H), 1,61 (s, 6H), 4,93 (brs, 1Н), 7,37-7,42 (m, 2H), 7,74-7,79 (m, 2H)

(Сравнительный пример 6)

Синтез 5-йод-1Н-индазол (Сравнительное соединение 6)

95 мл (570 ммоль) 6 N соляной кислоты добавляют по каплям к раствору 25,0 г (188 ммоль) 5-амино-1Н-индазол в 320 мл N,N-диметилформамиде при 0°С и смесь перемешивают в течение 20 минут. Затем раствор 13,6 г (197 ммоль) нитрата натрия в 75 мл воды добавляют по каплям, сохраняя при этом температуру реакционного раствора не выше 10°С. После перемешивания смеси в течение 30 минут добавляют 32,8 г (198 ммоль) йодида калия отдельными порциями, затем убирают охлаждение для постепенного нагревания смеси до комнатной температуры.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 1000 мл воды и смесь нейтрализуют водным раствором гидроксида натрия и экстрагируют 1500 мл толуола и затем дважды по 500 мл толуола. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.)) и фракцию, содержащую искомое соединение концентрируют при пониженном давлении. 50 мл этилацетата добавляют к полученным неочищенным кристаллам, смесь нагревают для их растворения, 300 мл н-гексана добавляют и получающееся твердое вещество отфильтровывают, получая в результате 5,80 г названного соединении в виде белого порошка (выход: 13%).

Значение Rf: 0,45 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 245 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (СDСl₃, ч./млн): 7,30 (ddd, J1=8,8 Гц, J2=1,1 Гц, J3=0,7 Гц, 1Н), 7,63 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,5 Гц, 1Н), 8,01 (d, J=1,1 Гц, 1Н), 8,14 (dd, J1=1,5 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 10,17 (brs, 1H)

(Сравнительный пример 7)

Синтез 1-ацетил-5-йод-1Н-индазола (Сравнительное соединение 7)

10 мл уксусной кислоты и 20 мл уксусного ангидрида добавляют к 1,2 г (4,18 ммоль) 5-йод-1H-индазола (Сравнительное соединение 6) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут.

После завершения реакции реакционный раствор выливают в 300 мл воды и получающееся твердое вещество отфильтровывают, получая в результате 1,08 г названного вещества в виде белого порошка (выход: 90%).

Значение Rf: 0,49 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 287 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 2,78 (s, 3Н), 7,81 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,6 Гц, 1Н), 8,05 (d, J=0,9 Гц, 1Н), 8,10 (dd, J1=1,6 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 8,23 (ddd, J1=8,8 Гц, J2=0,9 Гц, J3=0,7 Гц, 1H)

(Сравнительный пример 8)

Синтез 5-йод-4-нитро-1Н-индазол (Сравнительное соединение 8)

12,5 мл азотной кислоты добавляют постепенно по каплям к раствору 1,57 г (6,43 ммоль) 5-йод-1Н-индазола (Сравнительное соединение 6) в 25 мл концентрированной серной кислоты при 0°С и смесь перемешивают в течение 1 часа. Затем прекращают охлаждение для постепенного нагрева смеси до комнатной температуры.

После завершения реакции реакционный раствор постепенно вливают в 150 мл ледяной воды, и смесь нейтрализуют водным раствором гидроксида натрия и экстрагируют 300 мл этилацетата три раза. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Образующийся остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=3:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 90 г названного вещества в виде желтого порошка (выход: 48%).

Значение Rf: 0,32 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 290 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 7,69 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,0 Гц, 1Н), 7,98 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 8,23 (d, J=1,0 Гц, 1Н), 13,88 (brs, 1Н)

(Сравнительный пример 9)

Синтез 1-трет-бутоксикарбонил-5-йод-4-нитро-1Н-индазола (Сравнительное соединение 9-1)

38,0 мг (0,31 ммоль) 4-диметиламинопиридина и 18 мл тетрагидрофурана добавляют к 898 мг (3,11 ммоль) 5-йод-4-нитро-1Н-индазола (Сравнительное соединение 8). Затем раствор 1,36 г (6,23 ммоль) ди-трет-бутилдикарбоната в 9 мл тетрагидрофурана добавляют в токе аргона при перемешивании, и смесь перемешивают при комнатной температуре 1 час.

После завершения реакции реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении, образующийся остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=20:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 1,17 г названного соединения в виде желтого порошка (выход: 97%).

Значение Rf: 0,33 (н-гексан:этилацетат =4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 390 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,73 (s, 9Н), 8,11 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,19 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 8,40 (d, J=0,7 Гц, 1Н)

Далее сравнительные соединения 9-2 и 9-3 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 9-1.

1-трет-Бутоксикарбонил-5-йод-3-метоксикарбонил-1Н-индазол (Сравнительное соединение 9-2)

Значение Rf: 0,51 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 403 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,73 (s, 9Н), 4,05 (s, 3Н), 7,32 (dd, J1=8,9 Гц, J2=1,7 Гц, 1H), 7,99 (dd, J1=8,9 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 8,64 (dd, J1=1,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1H)

1-трет-Бутоксикарбонил-3-формил-5-йод-1Н-индазол (Сравнительное соединение 9-3)

Значение Rf: 0,54 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 373 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,76 (s, 9Н), 7,85 (dd, J1=9,0 Гц, J2=1,7 Гц, 1H), 7,96 (dd, J1=9,0 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 8,71 (dd, J1=1,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 10,30 (s, 1H)

(Сравнительный пример 10)

Синтез 5-йод-3-метоксикарбонил-1Н-индазола (Сравнительное соединение 10)

Раствор 2,72 г (68,0 ммоль) гидроксида натрия в 120 мл воды добавляют к 17,5 г (64,1 ммоль) 5-йодоизатина и смесь перемешивают при комнатной температуре 15 минут. Затем раствор 4,96 г (71,9 ммоль) нитрита натрия в 20 мл воды добавляют при 0°С, и раствор 12,2 г (124 ммоль) концентрированной серной кислоты в 120 мл воды добавляют по каплям, поддерживая температуру реакционного раствора не выше 10°С. После перемешивания смеси в течение 30 минут раствор 30,8 г (162 ммоль) безводного хлорида олова(II) в 60 мл концентрированной соляной кислоты добавляют по каплям, поддерживая температуру реакционного раствора не выше 10°С. После завершения добавления по каплям охлаждение прекращают для постепенного нагрева до комнатной температуры и смесь перемешивают в течение 2 часов.

Затем полученное твердое вещество отфильтровывают, добавляют 300 мл метанола и 1 мл концентрированной серной кислоты к 22,9 г полученных неочищенных кристаллов, и смесь перемешивают в течение 10 часов при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор фильтруют, и фильтрат концентрируют при пониженном давлении и выливают в 500 мл воды. Смешанный раствор нейтрализуют водным раствором гидроксида натрия и экстрагируют 1000 мл хлороформа. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомый продукт, концентрируют при пониженном давлении. 50 мл этилацетата добавляют к полученным неочищенным кристаллам, смесь нагревают для растворения кристаллов, добавляют 300 мл н-гексана и полученное твердое вещество отфильтровывают, получая в результате 4,93 г названного вещества в виде коричневого порошка (выход: 26%).

Значение Rf: 0,44 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 303 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 4,06 (s, 3Н), 7,38 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,6 Гц, 1Н), 7,72 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,5 Гц, 1Н), 8,64 (dd, J1=1,5 Гц, J2=0,6 Гц, 1Н), 10,70 (brs, 1Н)

(Сравнительный пример 11)

Синтез 3-гидроксиметил-5-йод-1Н-индазола (Сравнительное соединение 11)

32 мл (32,0 ммоль) 1 М раствора диизобутилалюминий гидрида в толуоле добавляют по каплям к раствору 2,41 г (7,89 ммоль) 5-йод-3-метоксикарбонил-1Н-индазола (Сравнительное соединение 10) в 80 мл тетрагидрофурана при -78°С в токе аргона при перемешивании. Смесь перемешивают при -78°С в течение 30 минут и затем перемешивают при 0°С в течение 2,5 часа.

После завершения реакции насыщенный водный раствор хлорида аммония постепенно добавляют к реакционному раствору при 0°С, затем добавляют 300 мл этилацетата и смесь отфильтровывают через Celite (торговая марка). Фильтрат высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 2,31 г названного соединения в виде желтого порошка (выход: количественный).

Значение Rf: 0,25 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 275 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (DMSO-d ₆, ч./млн): 4,75 (d, J=5,8 Гц, 2H), 5,26 (t, J=5,8 Гц, 1Н), 7,35 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 7,56 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,7 Гц, 1Н), 8,25 (dd, J1=1,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 12,93 (brs, 1Н)

(Сравнительный пример 12)

Синтез 2-формил-5-йод-1Н-индазола (Сравнительное соединение 12)

6,94 г (79,8 ммоль) диоксида марганца добавляют к раствору 2,31 г (8,43 ммоль) 3-гидоксиметил-5-йод-1Н-индазола (Сравнительное соединение 11) в 50 мл тетерагидрофурана и 50 мл дихлорметана и смесь перемешивают при комнатной температуре 1 час.

После завершения реакции реакционный раствор фильтруют, и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный осадок хроматографируют в колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 1,84 г названного соединения в виде коричневого порошка (выход: 80%).

Значение Rf: 0,57 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 273 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (DMSO-d ₆, ч./млн): 7,58 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 7,76 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,7 Гц, 1Н), 8,49 (dd, J1=1,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 10,17 (s, 1Н), 14,30 (brs, 1Н)

(Сравнительный пример 13)

Синтез 2-бензилокси-6-нитротолуола (Сравнительное соединение 13)

41,5 г (300 ммоль) карбоната калия и 200 мл N,N-диметилформамида добавляют к 30,6 г (200 ммоль) 2-метил-3-нитрофенола. Затем добавляют 23,8 мл (200 ммоль) бензилбромида в токе аргона с перемешиванием и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов.

После завершения реакции реакционный раствор выливают в 1000 мл воды и смесь экстрагируют 800 мл толуола и им же дважды по 500 мл. Органический слой последовательно промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 49,3 г названного соединения в виде желтого порошка (выход: количественный).

Значение Rf: 0,48 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 244 (M⁺+1)

¹ H-ЯМР спектр (СDСl₃, ч./млн): 2,42 (s, 3Н), 5,13 (s, 2H), 7,08-7,11 (m, 1H), 7,21-7,27 (m, 1H), 7,32-7,44 (m, 6H)

(Сравнительный пример 14)

Синтез 3-бензилокси-2-метиланилина (Сравнительное соединение 14)

52,3 г (800 ммоль) цинка добавляют порциями при 0°С к раствору 49,3 г (203 ммоль) 2-бензилокси-6-нитротолуола (Сравнительное соединение 13) в 400 мл метанола и 200 мл уксусной кислоты в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 1 часа.

После завершения реакции реакционный раствор выливают в 1600 мл воды, и смесь экстрагируют 1500 мл этилацетата. Органический слой последовательно промывают водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 44,0 г названного соединения в виде коричневого маслообразного вещества (выход: количественный).

Значение Rf: 0,22 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 213 (M⁺)

¹ Н-ЯМР спектр (СDСl₃, ч./млн): 2,11 (s, 3Н), 3,64 (brs, 2H), 5,05 (s, 2H), 6,36-6,39 (m, 1H), 6,41 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,93-6,99 (m, 1H), 7,29-7,46 (m, 5H)

(Сравнительный пример 15)

Синтез 3-бензилокси-2-метилацетанилида (Сравнительное соединение 15-1)

8,3 мл (299 ммоль) уксусного ангидрида добавляют к раствору 44,0 г (206 ммоль) 3-бензилокси-2-метиланилина (Сравнительное соединение 14) в 400 мл этилацетата и смесь перемешивают в течение 30 минут при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор выливают в 2000 мл гексана и полученное твердое вещество отфильтровывают и промывают гексаном, получая в результате 44,9 г названного вещества в виде белого порошка (выход: 85%).

Значение Rf: 0,24 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 256 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (DMSO-d₆, ч./млн): 2,04 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 5,11 (s, 2H), 6,87 (d, J=7,9 Гц, 1H), 6,96-7,00 (m, 1H), 7,09 (dd, J1=7,9 Гц, J2=7,9 Гц, 1H), 7,29-7,48 (m, 5H), 9,31 (brs, 1H).

Далее сравнительное соединение 15-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 15-1.

3-Метокси-2-метилацетанилид (Сравнительное соединение 15-2)

Значение Rf: 0,20 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 180 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (DMSO-d₆, ч./млн): 2,00 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 6,78 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,93-6,97 (m, 1H), 7,07-7,13 (m, 1H), 9,29 (brs, 1H)

(Сравнительный пример 16)

Синтез 1-ацетил-4-бензилокси-1Н-индазола (Сравнительное соединение 16-1)

1,61 г (4,99 ммоль) тетра-н-бутиламмоний бромида, 19,6 г (200 ммоль) ацетата калия и 450 мл этилацетата добавляют к 25,5 г (100 ммоль) 3-бензилокси-2-метиланилида (Сравнительное соединение 15-1). Затем 28,4 мл (300 ммоль) уксусного ангидрида и 26,8 мл (200 ммоль) изоамилнитрита добавляют в токе аргона с перемешиванием, и смесь перемешивают в течение 9 часов при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор выливают в 500 мл воды для разделения на слои. Органический слой последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =50:1-20:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 17,7 соединения в виде желтого порошка (выход: 66%).

Значение Rf: 0,41 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 267 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (СDСl₃, ч./млн): 2,78 (s, 3Н), 5,24 (s, 2H), 6,78 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 7,34-7,50 (m, 6H), 8,00-8,03 (m, 1Н), 8,24 (d, J=1,0 Гц, 1Н)

Далее сравнительное соединение 16-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 16-1.

1-Ацетил-4-метокси-1Н-индазол (Сравнительное соединение 16-2)

Значение Rf: 0,53 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 191 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 2,78 (s, 3Н), 3,98 (s, 3Н), 6,71 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 7,46 (dd, J1=8,3 Гц, J2=8,1 Гц, 1Н), 7,98-8,01 (m, 1Н), 8,20 (d, J=0,7 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 17)

Синтез 4-бензилокси-5-бром-1Н-индазола (Сравнительное соединение 17-1)

13,0 г (73,0 ммоль) N-бромсукцинимида добавляют к раствору 17,7 г (66,5 ммоль) 1-ацетил-4-бензилокси-1Н-индазола (Сравнительное соединение 16-1) в 330 мл тетрагидрофурана при 0°С в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 30 минут, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов.

Затем 300 мл метанола и 130 мл 1 N водного раствора гидроксида натрия добавляют в реакционный раствор, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут.

После завершения реакции реакционный раствор нейтрализуют 1 N водным раствором соляной кислоты и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток экстрагируют 500 мл этилацетата, и органический слой последовательно промывают насыщенным водным раствором карбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =6:1-4:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое соединение, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 13,6 г названного вещества в виде светло-оранжевого порошка (выход: 67%).

Значение Rf: 0.25 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 302, 304 (М ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃ , ч./млн): 5,40 (s, 2Н), 7,10 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,0 Гц, 1Н), 7,33-7,44 (m, 3Н), 7,49-7,55 (m, 3H), 8,06 (d, J=1,0 Гц, 1Н), 10,14 (brs, 1Н)

Далее сравнительное соединение 17-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 17-1.

5-Бром-4-метокси-1Н-индазол (Сравнительное соединение 17-2)

Значение Rf: 0.17 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (ЕI, m/z): 226, 228 (M⁺)

¹Н-ЯМР спектр(СDСl₃, ч./млн): 4,25 (s, 3Н), 7,06 (dd, J1=8,7 Гц, J2=1,0 Гц, 1Н), 7,49 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 8,23 (d, J=1,0 Гц, 1Н), 10,09 (brs, 1Н)

(Сравнительный пример18)

Синтез 4-бензилокси-5-бром-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазола (Сравнительное соединение 18-1)

3,39 г (13,5 ммоль) п-толуолсульфоната пиридиния и 450 мл метиленхлорида добавляют к 13,6 г (44,9 ммоль) 4-бензилокси-5-бром-1Н-индазола (Сравнительное соединение 17-1). Затем 12,3 мл (135 ммоль) 3,4-дигидро-2Н-пирана добавляют при 0°С в токе аргона при перемешивании, и смесь перемешивают в течение 30 минут. Затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 300 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия для разделения на слои. Органический слой последовательно промывают 10% водным раствором лимонной кислоты, водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат 6:1 (об./об.)) и высокополярную фракцию (Значение Rf: 0,36 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.)) концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 15,5 г названного соединения в виде оранжевого маслянистого вещества (выход: 89%).

Значение Rf: 0,36 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 386, 388 (M ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃ , ч./млн): 1,66-1,80 (m, 3Н), 2,02-2,23 (m, 3H), 3,73-3,81 (m, 1H), 4,09-4,14 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,60-5,64 (m, 1H), 7,32-7,43 (m, 5H), 7,51-7,54 (m, 2H), 8,07 (s, 1H).

Далее сравнительные соединения 18-2-18-4 получают в соответствии со способом для получения сравнительного соединения 18-1.

5-трет-Бутилдиметилсилилокси-4-формил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Сравнительное соединение 18-2)

Значение Rf: 0,63 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 361 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 0,30 (s, 6H), 1,05 (s, 9H), 1,50-2,30 (m, 6H), 3,70-3,85 (m, 1H), 4,05-4,20 (m, 1H), 5,70-5,80 (m, 1H), 6,99 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,3 Гц, 1Н), 8,82 (s, 1H), 10,54 (s, 1H).

5-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-4-метилкарбонил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Сравнительное соединение 18-3)

Свойства: белый порошок

Значение Rf: 0.37 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 375 (M ⁺+1)

¹H-ЯМР спектр (СDСl ₃, ч./млн): 0,32 (s, 6H), 1,02 (s, 9H), 1,62-1,82 (m, 3H), 2,00-2,13 (m, 1H), 2,15-2,30 (m, 2H), 2,69 (s, 3Н), 3,73-3,82 (m, 1H), 4,06-4,15 (m, 1H), 5,65-5,73 (m, 1H), 6,99 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,82 (d, J=9,4 Гц, 1H), 8,67 (s, 1H)

5-Бром-4-метокси-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Сравнительное соединение 18-4)

Значение Rf: 0,27 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 310, 312 (М ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃ , ч./млн): 1,68-1,81 (m, 3Н), 2,04-2,29 (m, 3Н), 3,75-3,83 (m, 1H), 4,08-4,36 (m, 4H), 5,63-5,68 (m, 1H), 7,31 (dd, J1=9,0 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 7,36 (d, J=9,0 Гц, 1H), 8,28 (d, J=1,0 Гц, 1Н).

(Сравнительный пример 19)

Синтез 4-бензилокси-5-бром-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазола (Сравнительное соединение 19)

В синтезе сравнительного соединения 18-1 низкополярную фракцию (Значение Rf:0,52 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.)) концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 1,18 г названного соединения в виде желтого маслянистого вещества (выход: 7%).

Значение Rf: 0,52 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 386, 388 (M ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (СDСl₃ , ч./млн): 1,66-1,79 (m, 3H), 2,04-2,15 (m, 2H), 2,49-2,55 (m, 1H), 3,69-3,78 (m, 1H), 3,98-4,04 (m, 1H), 5,36 (s, 2H), 5,64-5,68 (m, 1H), 7,20 (dd, J1=8,9 Гц, J2=0,9 Гц, 1H), 7,31-7,43 (m, 3H), 7,49-7,60 (m, 3H), 7,99 (d, J=0,9 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 20)

Синтез 1-ацетил-5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксабороланил)-1Н-индазола (Сравнительное соединение 20-1)

270 мг (0,38 ммоль) дихлорбис(трисфенилфосфин)палладия и 18 мл 1,4-диоксана добавляют 1,1 г (3,8 ммоль) 1-ацетил-5-йод-1Н-индазола (Сравнительное соединение 7). Затем 1,7 мл (12 ммоль) 4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолана и 1,6 мл (12 ммоль) триэтиламина добавляют в токе аргона при перемешивании, и смесь перемешивают при 80°С в течение 1 часа.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 50 мл воды, и смесь экстрагируют 200 мл этилацетата. Органический слой последовательно промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=10:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое соединение, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 0,70 г названного соединения в виде желтого порошка (выход: 64%).

Значение Rf: 0,41 (н-гексан:этилацетат =4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 287 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,37 (s, 12H), 2,79 (s, 3Н), 7,98 (dd, J1=8,3 Гц, J2=1,0 Гц, 1Н), 8,12 (d, J=0,7 Гц, 1H), 8,22-8,24 (m, 1H), 8,42 (ddd, J1=8,3 Гц, J2=1,0 Гц, J3=0,7 Гц, 1Н).

Далее сравнительное соединение 20-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 20-1.

4-Бензилокси-1-(тетрагидропиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил [1,3,2]диоксабороланил)-1Н-индазол (Сравнительное соединение 20-2)

Значение Rf: 0,31 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 435 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,36 (s, 12H), 1,65-1,79 (m, 3Н), 2,02-2,18 (m, 2H), 2,49-2,63 (m, 1H), 3,70-3,79 (m, 1H), 4,01-4,07 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 5,66-5,71 (m, 1H), 7,24 (dd, J1=8,4 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,29-7,41 (m, 3Н), 7,57-7,62 (m, 2H), 7,72 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,09 (d, J=0,7 Гц, 1H)

(Сравнительный пример 21)

Синтез 5-гидрокси-4-метилкарбонил-1Н-индазола (Сравнительное соединение 21)

30 г (220 ммоль) хлорида алюминия добавляют к раствору 10 г (67 ммоль) 5-метокси-1H-индазола (см. R.A.Bartsch, et al., J. Heterocyclic Chem., vol. 21, p.1063 (1984)) в 200 мл 1,2-дихлорэтана при комнатной температуре в токе аргона и смесь перемешивают в течение 30 минут. Затем 12 мл (170 ммоль) ацетилхлорида добавляют при комнатной температуре, и смесь перемешивают при 60°С в течение 2,5 часов.

После завершения реакции реакционный раствор оставляют для охлаждения, добавляют воду и смесь экстрагируют хлороформом. Органический слой последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбонатом натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток промывают хлороформом, получая в результате 3,6 г названного соединения в виде желтого порошка (выход: 30%).

Точка плавления 188-191°С

Значение Rf: 0,14 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 177 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 2,79 (s, 3H), 7,05 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7,81 (dd, J1=8,9 Гц, J2=0,9 Гц, 1H), 8,25 (d, J=0,9 Гц, 1H), 12,61 (brs, 1H), 13,38 (brs, 1H)

(Сравнительный пример 22)

Синтез 4-формил-5-метокси-1Н-индазола (Сравнительное соединение 22)

45,0 г (337 ммоль) хлорида алюминия добавляют к раствору 25,0 г (169 ммоль) 5-метокси-1H-индазола в 500 мл метиленхлорида в токе аргона и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Полученную смесь охлаждают до -10°С, 17,5 мл (193 ммоль) дихлорметилметилового эфира добавляют по каплям более 20 минут и смесь перемешивают при 0°С в течение 2 часов.

После завершения реакции 300 мл смешанного раствора метанол:вода =1:1 (об./об.) постепенно вливают в реакционный раствор при 0°С и полученное твердое вещество отфильтровывают и промывают хлороформом. Затем к полученному твердому веществу добавляют 300 мл хлороформа, 150 мл метанола и 150 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Полученный смешанный раствор экстрагируют 150 мл смешанным растворителем хлороформ:метанол =2:1 (об./об.) и органический слой высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Хлороформ добавляют к полученному твердому веществу, смесь подвергают ультразвуковой обработке. Твердое вещество отфильтровывают и промывают хлороформом, получая 7,20 г названного соединения в виде зеленного порошка (выход: 24%).

Значение Rf: 0,50 (этилацетат)

Спектр масс (CI, m/z): 177 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (DMSO-d₆, ч./млн): 4,00 (s, 3H), 7,40 (d, J=9,0 Гц, 1H), 7,93 (dd, J1=9,0 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 8,43 (d, J=1,0 Гц, 1H), 10,57 (s, 1H), 13,32 (brs, 1H)

(Сравнительный пример 23)

Синтез моногидробромида 4-формил-5-гидрокси-1Н-индазола (Сравнительное соединение 23)

Раствор 25,0 г (100 ммоль) трибромида бора в 50 мл метиленхлорида добавляют к раствору 10,1 г (57,3 ммоль) 4-формил-5-метокси-1Н-индазола (Сравнительное соединение 22) в 50 мл метиленхлорида и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляют 50,0 мл 1,0 М раствора трибромида бора/метиленхлорид и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 7 часов.

После завершения реакции реакционный раствор охлаждают до 0°С и к нему постепенно добавляют метанол. Смесь концентрируют при пониженном давлении, добавляют смешанный растворитель диэтиловый эфир:метанол =9:1 (об./об.) и полученное твердое вещество отфильтровывают, получая в результате 11,2 г названного вещества в виде светло-серого порошка (выход: 81%).

Значение Rf: 0,35 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =10:1:0,1 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 163 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 7,09 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7,78 (dd, J1=9,0 Гц, J2=1,0 Гц, 1Н), 8,36 (d, J=1,0 Гц, 1Н), 10,53 (s, 1Н), 10,66 (brs, 2H)

(Сравнительный пример 24)

Синтез 5-трет-бутилдиметилсилилокси-4-формил-1Н-индазола (Сравнительное соединение 24-1)

1,50 мл (8,61 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина и 700 мг (4,64 ммоль) трет-бутилдиметилсилилхлорида добавляют при 0°С к раствору 955 мг (3,93 ммоль) моногидробромида 4-формил-5-гидрокси-1Н-индазола (Сравнительное соединение 23) в 15 мл тетрагидрофурана и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов.

После завершения реакции добавляют воду к реакционному раствору, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют в колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =2:1-1:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 964 мг названного вещества в виде белого твердого вещества (выход: 88%).

Значение Rf: 0,45 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 277 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 0,31 (s, 6Н), 1,06 (s, 9H), 7,11 (d, J=9,1 Гц, 1Н), 7,82 (d, J=9,1 Гц, 1Н), 8,59 (s, 1Н), 10,63 (s, 1Н)

Далее сравнительное соединение 24-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 24-1.

5-трет-Бутилдиметилсилилокси-4-метилкарбонил-1Н-индазол (Сравнительное соединение 24-2)

Значение Rf: 0,28 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 291 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 0,35 (s, 6Н), 1,04 (s, 9H), 2,73 (s, 3H), 7,28 (d, J=9,4 Гц, 1Н); 7,89 (dd, J1=9,4 Гц, J2=0,8 Гц, 1Н), 8,83 (d, J=0,8 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 25)

Синтез 4-формил-5-гидрокси-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазола (Сравнительное соединение 25-1)

34,0 мл (34,0 ммоль) 1,0 М раствора фторида тетрабутиламмония /тетрагидрофуран добавляют к раствору 10,1 г (28,0 ммоль) 5-трет-бутилдиметилсилилокси-4-формил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазола (Сравнительное соединение 18-2) в 150 мл тетрагидрофурана при 0°С и смесь перемешивают при 0°С в течение 1,5 часов.

После завершения реакции добавляют воду к реакционному раствору и смесь экстрагируют хлороформом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют в колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =6:1-3:2 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое соединение, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 4,5 г названного соединения в виде пенистого желтого вещества (выход: 65%)

Значение Rf: 0,10 (н-гексан:этилацетат =4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 247 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,60-1,90 (m, 3H), 1,97-2,30 (m, 3H), 3,70-3,85 (m, 1Н), 4,05-4,20 (m, 1Н), 5,60-5,75 (m, 1Н), 7,00 (d, J=9,3 Гц, 1Н), 7,92 (dd, J1=9,3 Гц, J2=1,0 Гц, 1Н), 8,31 (d, J=1,0 Гц, 1Н), 10,25 (s, 1Н), 12,10 (brs, 1Н)

Далее сравнительное соединение 25-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 25-1.

5-Гидрокси-4-метилкарбонил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Сравнительное соединение 25-2)

Свойство: желтый порошок

Значение Rf: 0.28 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 261 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,62-1,84 (m, 3Н), 2,01-2,12 (m, 1H), 2,13-2,25 (m, 2H), 2,74 (s, 3Н), 3,71-3,82 (m, 1H), 4,08-4,16 (m, 1H), 5,62-5,67 (m, 1H), 7,01 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,89 (dd, J1=9,4 Гц, J2=0,9 Гц, 1H), 8,07 (d, J=0,9 Гц, 1H), 14,09 (s, 1H)

(Сравнительный пример 26)

Синтез 4-формил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-5-трифторметансульфонилокси-2Н-индазола (Сравнительное соединение 26-1)

9,80 г (27,4 ммоль) N-фенилбис(трифторметансульфонамида) и 15,0 мл (108 ммоль) триэтиламина добавляют к раствору 4,50 г (18,3 ммоль) 4-формил-5-гидрокиси-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазола (Сравнительное соединение 25-1) в 100 мл метиленхлорида в токе аргона и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа.

После завершения реакции добавляют воду к реакционному раствору и смесь экстрагируют хлороформом. Органический слой высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =6:1-4:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 6,00 г названного соединения в виде белого порошка (выход: 87%).

Значение Rf: 0,30 (н-гексан:этилацетат =4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 379 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,60-1,90 (m, 3Н), 2,00-2,14 (m, 1H), 2,15-2,30 (m, 2H), 3,74-3,87 (m, 1H), 4,10-4,22 (m, 1H), 5,70-5,80 (m, 1H), 7,30 (d, J=9,3 Гц, 1H), 8,12 (dd, J1=9,3 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 8,96 (d, J=1,0 Гц, 1H), 10,49 (s, 1H)

Далее сравнительное соединение 26-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 26-1.

4-Метилкарбонил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-5-(трифторметансульфонилокси)-2Н-индазол (Сравнительное соединение 26-2)

Свойства: бледно-желтое маслянистое вещество

Значение Rf: 0,74 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 393 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,65-1,87 (m, 3H), 1,97-2,29 (m, 3H), 2,76 (s, 3H), 3,74-3,85 (m, 1H), 4,10-4,18 (m, 1H), 5,67-5,73 (m, 1H), 7,26 (d, J=9,3 Гц, 1Н), 7,96 (dd, J1=9,3 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 8,65 (d, J=1,0 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 27)

Синтез 3-амино-2-метиланизола (Сравнительное соединение 27)

Суспензию 9,98 г 5% водного палладированного угля в 100 мл этанола добавляют к раствору 30,7 г (184 ммоль) 2-метил-3-нитроанизола в 300 мл этанола и смесь перемешивают в течение 3 часов при комнатной температуре в атмосфере водорода.

После завершения реакции реакционный раствор фильтруют через Celite и фильтрат концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 25,5 г названного соединения в виде светло-розового маслянистого вещества (выход: количественный).

Значение Rf: 0.38 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 137 (М⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 2,04-2,05 (m, 3H), 3,60 (brs, 2Н), 3,80 (s, 3H), 6,33-6,37 (m, 2Н), 6,94-7,01 (m, 1H)

(Пример 1)

Синтез 1-ацетил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-1Н-индазола (Соединение 1-1)

1,26 г (3,49 ммоль) 4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)-1-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксабороланил)бензола (Сравнительное соединение 5), 792 мг (5,21 ммоль) фторида цезия, 400 мг (0,346 ммоль) тетракис(трифенилфосфин)палладий и 20 мл 1,2-диметоксиэтана добавляют к 500 мг (1,74 ммоль) 1-ацетила-5-йод-1Н-индазола (Сравнительное соединение 7) смесь перемешивают в течение 2 часов в токе аргона при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 50 мл воды, и смесь экстрагируют 100 мл этилацетата. Органический слой последовательно промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =5:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое соединение, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 385 мг названного соединения в виде белого порошка (выход: 56%).

Значение Rf: 0.48 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс CI, m/z): 394 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,40 (brs, 9H), 1,67 (s, 6H), 2,81 (s, 3H), 4,98 (brs, 1H), 7,48-7,52 (m, 2H), 7,57-7,61 (m, 2H), 7,80 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,7 Гц, 1Н), 7,91 (dd, J1=1,7 Гц, J2=0,8 Гц, 1H), 8,17 (d, J=0,8 Гц, 1H), 8,46-8,50 (m, 1H)

Далее соединения 1-2-1-9 получают в соответствии со способом получения соединения 1-1. Однако в синтезе соединения 1-4 аддукт трис(дибензилиденацетон)дипалладия с хлороформом применяют вместо тетракис(трифенилфосфин)палладия и в синтезе соединений 1-5-1-9, 2 M водный раствор карбоната натрия применяют вместо фторида цезия.

1-трет-Бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-метоксикарбонил-1Н-индазол (Соединение 1-2)

Значение Rf: 0,30 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,40 (brs, 9H), 1,68 (s, 6H), 1,76 (s, 9H), 4,06 (s, 3H), 4,97 (brs, 1H), 7,48-7,52 (m, 2H), 7,61-7,65 (m, 2H), 7,83 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,7 Гц, 1H), 8,24 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 8,44 (dd, J1=1,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1H)

7-трет-Бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-формил-1Н-индазол (Соединение 1-3)

Значение Rf: 0,48 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

1-трет-Бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-нитро-1Н-индазол (Соединение 1-4)

Значение Rf: 0,36 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (FAB, m/z): 496 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,38 (brs, 9H), 1,67 (s, 6H), 1,75 (s, 9H), 4,95 (brs, 1Н), 7,31-7,34 (m, 2H), 7,46-7,51 (m, 2H), 7,60 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 8,42 (d, J=0,7 Гц, 1Н), 8,45 (dd, J1=8,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н)

4-Бензилокси-5-[5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазол (Соединение 1-5)

Значение Rf: 0,36 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 543 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,38 (brs, 9H), 1,68-1,82 (m, 9H), 2,06-2,22 (m, 2H), 2,50-2,65 (m, 1Н), 3,69-3,81 (m, 1Н), 4,01-4,08 (m, 1Н), 4,96 (brs, 1Н), 5,31 (s, 2H), 5,69-5,74 (m, 1Н), 7,26-7,33 (m, 5H), 7,38 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,9 Гц, 1Н), 7,67 (dd, J1=8,4 Гц, J2=2,6 Гц, 1Н), 7,85-7,91 (m, 2H), 8,09 (d, J=0,9 Гц, 1Н), 8,75 (dd, J1=2,6 Гц, J2=0,9 Гц, 1Н)

5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-формил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Соединение 1-6)

Свойство: белый порошок

Значение Rf: 0,46 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 463 (М⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,40 (brs, 9H), 1,62-1,84 (m, 9H), 2,02-2,37 (m, 3H), 3,75-3,87 (m, 1Н), 4,11-4,19 (m, 1Н), 4,98 (brs, 1Н), 5,70-5,77 (m, 1Н), 7,35-7,44 (m, 3H), 7,48-7,54 (m, 2H), 8,02 (dd, J1=9,0 Гц, J2=0,9 Гц, 1Н), 8,95 (d, J=0,9 Гц, 1Н), 10,06 (s, 1Н)

5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-метилкарбонил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Соединение 1-7)

Свойство: бледно-желтый порошок

Точка плавления: 196-198°С

Значение Rf: 0,46 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 477 (М⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,37 (brs, 9H), 1,58-1,86 (m, 9H), 1,94 (s, 3H), 2,01-2,35 (m, 3H), 3,74-3,83 (m, 1Н), 4,10-4,17 (m, 1Н), 4,97 (brs, 1Н), 5,66-5,71 (m, 1H), 7,33-7,39 (m, 3H), 7,45-7,51 (m, 2H), 7,86 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,9 Гц, 1Н), 8,42 (d, J=0,9 Гц, 1Н)

4-Бензилокси-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазол (Соединение 1-8)

Значение Rf: 0,40 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 541 (M ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃ , ч./млн): 1,39 (brs, 9H), 1,60-1,81 (m, 9H), 2,04-2,17 (m, 2H), 2,51-2,63 (m, 1Н), 3,73-3,80 (m, 1Н), 4,03-4,14 (m, 1Н), 4,86 (brs, 1Н), 4,97 (s, 2H), 5,68-5,73 (m, 1Н), 7,18-7,31 (m, 5H), 7,35 (dd, J1=8,5 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 7,39-7,46 (m, 3H), 7,51-7,55 (m, 2H), 8,07 (d, J=0,7 Гц, 1H)

5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-метокси-2-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазол (Соединение 1-9)

Значение Rf: 0,44 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 465 (М ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃ , ч./млн): 1,38 (brs, 9H), 1,68-1,82 (m, 9H), 2,04-2,26 (m, 3H), 3,76-3,84 (m, 4H), 4,13-4,18 (m, 1H), 4,94 (brs, 1H), 5,66-5,71 (m, 1H), 7,30 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7,42-7,55 (m, 5H), 8,30 (d, J=1,0 Гц, 1Н)

(Пример 2)

Синтез 5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-1Н-индазола (Соединение 2)

5 мл тетерагидрофурана, 5 мл метанола и 0,5 мл 1 N водного раствора гидроксида натрия добавляют к 350 мг (0,89 ммоль) 1-ацетил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-1Н-индазола (Соединение 1-1) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 50 мл воды и смесь экстрагируют каждый раз по 50 мл хлороформа три раза. Органический слой промывают последовательно водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. 5 мл метанола и 20 мл диэтилового эфира добавляют к полученным неочищенным кристаллам, получая в результате 209 мг искомого соединения в виде белого порошка (выход: 67%).

Значение Rf: 0,32 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 352 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,35 (brs, 9H), 1,53 (s, 6H), 7,21 (brs, 1H), 7,40 (d, J=8,5 Гц, 2H), 7,59-7,63 (m, 3H), 7,66 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,7 Гц, 1H), 8,00 (dd, J1=1,7 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 8,11 (d, J=1,0 Гц, 1H), 13,10 (brs, 1H)

(Пример 3)

Синтез 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-метоксикарбонил-1Н-индазол (Соединение 3-1)

2 мл тетрагидрофурана, 2 мл метанола и 0,2 мл 1 N водного раствора гидроксида натрия добавляют к 70 мг (0,14 ммоль) 1-трет-бутоксикарбонил-5-[4-(N-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-метоксикарбонил-1Н-индазола (Соединение 1-2) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 50 мл хлороформа, и смесь последовательно промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое соединение, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 51 мг названного соединения в виде белого порошка (выход: 91%).

Значение Rf: 0.24 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 410 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,42 (brs, 9H), 1,68 (s, 6H), 4,07 (s, 3H), 5,05 (brs, 1H), 7,45-7,61 (m, 6H), 8,38-41 (m, 1H), 11,09 (brs, 1H)

Далее соединение 3-2 получают в соответствии со способом получения соединения 3-1.

5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-формил-1Н-индазол (Соединение 3-2)

Значение Rf: 0.45 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 380 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,44 (brs, 9H), 1,68 (s, 6H), 5,12 (brs, 1H), 7,41-7,48 (m, 6H), 8,45-8,47 (m, 1H), 10,31 (s, 1H), 11,26 (brs, 1H)

(Пример 4)

Синтез дигидрохлорида 5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-1Н-индазола (Соединение 4-1)

4 мл метанола и 8 мл 4 N раствора соляной кислоты в 1,4-диоксане добавляют к 285 мг (0,63 ммоль) 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-1Н-индазола (Соединение 2) и смесь перемешивают в токе аргона при комнатной температуре в течение 2,5 часов.

После завершения реакции реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении. Добавляют 1,5 мл метанола и полученный остаток растворяют, добавляют 10 мл 1,4-диоксана и полученное твердое вещество отфильтровывают и промывают диэтиловым эфиром, получая в результате 130 мг названного соединения в виде белого порошка (выход: 63%).

Точка плавления: 268-270°С (разложение)

Значение Rf: 0,30 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =5:1:0,01 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 252 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,68 (s, 6H), 7,62-7,66 (m, 3H), 7,69 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,7 Гц, 1H), 7,77 (d, J=8,8 Гц, 2H), 8,06 (dd, J1=1,7 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 8,14 (d, J=1,0 Гц, 1H), 8,67 (brs, 3H)

Далее соединения 4-2-4-9 получают в соответствии со способом получения соединения 4-1.

Монохлоргидрат 5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-нитро-1Н-индазола (Соединение 4-2)

Точка плавления: 255-261°С (разложение)

Значение Rf: 0,33 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =5:1:0,01 (об./об./об.))

ИК спектр (KВr, см^-1): 1516, 1332

Спектр масс (CI, m/z): 297 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,69 (s, 6Н), 7,47-7,51 (m, 3H), 7,65-7,68 (m, 2H), 8,00 (dd, J1=8,5 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 8,31 (d, J=1,0 Гц, 1H), 8,66 (brs, 3H), 13,93 (brs, 1H)

Тригидрохлорид 5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-диметиламино-1Н-индазола (Соединение 4-3)

Точка плавления: 219-224°С (разложение)

Значение Rf: 0,46 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =5:1:0,01 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 295 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,69 (s, 6H), 2,84 (s, 6H), 7,14 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,21-7,25 (m, 1H), 7,49 (d, J=8,5 Гц, 2H), 7,61 (d, J=8,5 Гц, 2H), 8,34 (s, 1H), 8,64 (brs, 3H)

Тригидрохлорид 5-[5-(1-амино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-циклопропил-1Н-индазола (Соединение 4-4)

Точка плавления: 209-213°С (разложение)

Значение Rf: 0,47 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =5:1:0,01 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 293 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 0,47-0,53 (m, 2Н), 0,86-0,93 (m, 2H), 1,78 (s, 6H), 2,41-2,50 (m, 1H), 7,47 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,52-7,56 (m, 1H), 8,02 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 8,25 (d, J=1,0 Гц, 1H), 8,43-8,46 (m, 1H), 8,99-9,10 (m, 4H)

Моногидрохлорид 5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-циано-1Н-индазола (Соединение 4-5)

Свойство: белый порошок

Точка плавления: 270-272°С

Значение Rf: 0,38 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =10:1:0,1 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 277 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,71 (s, 6H), 7,61 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,69-7,81 (m, 4H), 8,02 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,68-8,85 (m, 3Н), 13,85 (brs, 1H)

Тригидрохлорид 5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(пирролидин-1-ил)-1Н-индазола (Соединение 4-6)

Точка плавления: 218-224°С (разложение)

Значение Rf: 0,4 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =5:1:0,1 (об./об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 320 (М⁺)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,67 (s, 6H), 1,71-1,80 (m, 4H), 3,18-3,34 (m, 4H), 6,91 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,01 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,41 (d, J=8,4 Гц, 2H), 7,54 (d, J=8,4 Гц, 2H), 8,30 (s, 1H), 8,57 (brs, 3Н)

Дигидрохлорид 5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-метокси-1Н-индазол (Соединение 4-7)

Точка плавления: 258-261°С (разложение)

Значение Rf: 0,34 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =5:1:0,01 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 282 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,68 (s, 6H), 4,07 (s, 3Н), 7,24 (dd, J1=8,5 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,29 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,53-7,62 (m, 4H), 8,37 (d, J=0,7 Гц, 1H), 8,61-8,73 (m, 3Н)

Тригидрохлорид 5-[5-(1-амино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-дифторметокси-1Н-индазола (Соединение 4-8)

Точка плавления: 170-173°С

Значение Rf: 0,37 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =5:1:0,01 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 319 (М⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,73 (s, 6H), 7,31 (t, ²J_F-H =73,7 Гц, 1Н), 7,60 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 7,78 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7,88 (dd, J1=8,3 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н), 8,10 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,4 Гц, 1Н), 8,18 (d, J=0,7 Гц, 1Н), 8,69 (brs, 3Н), 8,90 (dd, J1=2,4 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н)

Дигидрохлорид 5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(изоксазол-5-ил)-1Н-индазола (Соединение 4-9)

Свойства: бледно-желтый порошок

Точка плавления: 256-258°С (разложение)

Значение Rf: 0,41 (хлороформ:метанол:28% водный аммиак =10:1:0,1 (об./об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 319 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,68 (s, 6H), 6,24 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7,31-7,37 (m, 2H), 7,42 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 7,56-7,62 (m, 2H), 7,79 (dd, J1=8,5 Гц, J2=1,0 Гц, 1Н), 8,21 (d, J=1,0 Гц, 1Н), 8,59 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 8,63-8,80 (m, 3Н)

(Пример 5)

Синтез 4-амино-1-трет-бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-1Н-индазола (Соединение 5)

10 мл 1,4-диоксана и 20 мл этанола добавляют к 336 мг (0,68 ммоль) 1-трет-бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-нитро-1Н-индазола (Соединение 1-4), затем суспензию 672 мг 5% палладий на угле (водный) в 10 мл этанола добавляют и смесь перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 1 часа.

После завершения реакции реакционную смесь фильтруют через Celite и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют в колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 225 мг названного соединения в виде белого порошка (выход: 81%).

Значение Rf: 0,45 (н-гексан:этилацетат =1:1 (об./об.))

Спектр масс (FAB, m/z): 466 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,40 (brs, 9Н), 1,68 (s, 6H), 1,73 (s, 9H), 4,98 (brs, 1H), 7,30 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,40-7,43 (m, 2H), 7,48-7,51 (m, 2H), 7,56 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 8,14 (s, 1H)

(Пример 6)

Синтез 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-гидроксииминометил-1Н-индазола (Соединение 6-1)

Раствор 194 мг (1,50 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина в 1 мл этанола добавляют к раствору 114 мг (0,300 ммоль) 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-формил-1Н-индазола (Соединение 3-2) в 25 м этанола в токе аргона при перемешивании. Затем добавляют 83,0 мг (1,29 ммоль) моногидрохлорида гидроксиламина и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 7 часов.

После завершения реакции реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении, 50 мл водного насыщенного раствора хлорида аммония добавляют и смесь экстрагируют 100 мл этилацетата. Органический слой последовательно промывают водой и водным насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют в колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 105 мг названного соединения в виде белого порошка (выход: 89%).

Значение Rf: 0,40 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 395 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,35 (brs, 9H), 1,53 (s, 6H), 7,19 (brs, 1H), 7,43 (d, J=8,5 Гц, 2H), 7,57 (d, J=8,5 Гц, 2H), 7,64 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,72 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,7 Гц, 1H), 8,26-8,27 (m, 1H), 8,39 (s, 1H), 11,42 (s, 1H), 13,38 (brs, 1H)

Далее соединение 6-2 получают в соответствии со способом получения соединения 6-1.

5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-гидроксииминометил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Соединение 6-2)

Значение Rf: 0,36 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 479 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (СDСl ₃, ч./млн): 1,39 (brs, 9Н), 1,63-1,85 (m, 9H), 2,02-2,13 (m, 1H), 2,18-2,31 (m, 2H), 3,76-3,85 (m, 1H), 4,11-4,19 (m, 1H), 4,96 (brs, 1H), 5,68-5,73 (m, 1H), 7,25 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,29-7,35 (m, 2H), 7,43-7,50 (m, 2H), 7,79 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,9 Гц, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,71 (d, J=0,9 Гц, 1H)

(Пример 7)

Синтез 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-циано-1Н-индазола (Соединение 7-1)

Раствор 220 мг (1,7 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина в 0,5 мл тетрагидрофурана и раствор 240 мг (1,1 ммоль) трифторуксусного ангидрида в 0,5 мл тетрагидрофурана добавляют к раствору 45 мг (0,11 ммоль) 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-3-гидроксииминометил-1Н-индазола (Соединение 6-1) в 5 мл тетрагидрофурана при 0°С в токе аргона при перемешивании. Смесь перемешивают при 0°С в течение 2 часов, добавляют 100 мг (0,77 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина в 0,5 мл тетрагидрофурана и раствор 100 мг (0,48 ммоль) трифторуксусного ангидрида в 0,5 мл тетрагидрофурана и смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. Затем добавляют 5 мл 28% водного аммиака, прекращают охлаждение, оставляя постепенно нагреваться смесь до комнатной температуры.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 50 мл насыщенного водного раствора хлорида аммония, и смесь экстрагируют 50 мл этилацетата. Органический слой постепенно промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 25 мг искомого соединения в виде белого порошка (выход: 58%).

Значение Rf: 0,43 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 377 (M⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,35 (brs, 9H), 1,54 (s, 6H), 7,21 (brs, 1H), 7,44 (d, J=8,4 Гц, 2H), 7,71 (d, J=8,4 Гц, 2H), 7,81-7,88 (m, 2H), 8,06-8,07 (m, 1H)

Далее соединение 7-2 получают в соответствии со способом получения соединения 7-1.

5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-циано-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазол (Соединение 7-2)

Значение Rf: 0,55 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 460 (M ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃ , ч./млн): 1,39 (brs, 9H), 1,63-1,88 (m, 9H), 2,01-2,32 (m, 3H), 3,78-3,87 (m, 1H), 4,12-4,23 (m, 1H), 4,97 (brs, 1H), 5,72-5,77 (m, 1H), 7,45 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7,50-7,64 (m, 4H), 7,98 (dd, J1=9,0 Гц, J2=0,9 Гц, 1H), 8,41 (d, J=0,9 Гц, 1H)

(Пример 8)

Синтез 1-трет-бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-диметиламино-1Н-индазола (Соединение 8)

4,00 мл (50,6 ммоль) 38% водного раствора формальдегида и суспензию 940 мг 5% палладированного угля (водного) в 10 мл этилацетата добавляют к раствору 470 мг (1,01 ммоль) 4-амино-1-трет и-бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-1Н-индазола (Соединение 5) в 60 мл метанола и смесь перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 4 часов.

После завершения реакции реакционный раствор фильтруют, и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. 200 мл этилацетата добавляют к полученному остатку, смесь последовательно промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 408 мг названного соединения в виде белого порошка (выход: 82%).

Значение Rf: 0,44 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 495 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,38 (brs, 9Н), 1,68 (s, 6H), 1,73 (s, 9H), 2,81 (s, 6H), 4,94 (brs, 1H), 7,34-7,38 (m, 3Н), 7,41-7,45 (m, 2H), 7,75-7,78 (m, 1H), 8,35 (d, J=0,7 Гц, 1H)

(Пример 9)

Синтез 5-[5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)-пиридин-2-ил]-4-гидрокси-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазола (Соединение 9-1)

50 мл тетрагидрофурана и 100 мл этанола добавляют к 7,55 г (13,9 ммоль) 4-бензилокси-5-[5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)-пиридин-2-ил]-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазола (Соединение 1-5), затем добавляют суспензию 3,32 г 5% палладированного угля (водного) в 50 мл этанола и смесь перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 30 минут.

После завершения реакции реакционный раствор фильтруют через Celite и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в 20 мл тетрагидрофурана, добавляют 200 мл н-гексана и полученное твердое вещество отфильтровывают, получая в результате 5,70 г названного соединения в виде светло-желтого порошка (выход: 91%).

Значение Rf: 0,45 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 453 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 1,37 (brs, 9H), 1,60-1,85 (m, 9H), 2,05-2,20 (m, 2H), 2,51-2,63 (m, 1H), 3,70-3,79 (m, 1H), 4,01-4,08 (m, 1H), 4,97 (brs, 1H), 5,65-5,70 (m, 1H), 7,06 (dd, J1=8,8 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,75-7,86 (m, 3Н), 8,24 (d, J=0,7 Гц, 1H), 8,52 (dd, J1=2,2 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 15,84 (brs, 1H)

Далее соединение 9-2 получают в соответствии со способом получения соединения 9-1.

5-[4-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-гидрокси-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазол (Соединение 9-2)

Значение Rf: 0,24 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 452 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (DMSO-d ₆, ч./млн): 1,35 (brs, 9H), 1,48-1,58 (m, 8H), 1,73-1,79 (m, 1H), 1,90-2,06 (m, 2H), 2,34-2,49 (m, 1H), 3,68-3,77 (m, 1H), 3,87-3,92 (m, 1H), 5,73-5,78 (m, 1H), 7,12-7,21 (m, 2H), 7,29-7,36 (m, 3H), 7,49 (d, J-8,5 Гц, 2H), 8,30 (s, 1H), 10,07 (brs, 1H)

(Пример 10)

Синтез 5-[5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-1-(тетрагидропиран-2-ил)-4-трифторметансульфонилокси-1Н-индазола (Соединение 10)

Раствор 1,61 мл (9,57 ммоль) трифторметансульфонового ангидрида в 15 мл метиленхлорида добавляют по каплям к раствору 2,26 г (4,99 ммоль) 5-[5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-гидрокси-1-(тетрагидропиран-2-ил)-N-индазола (Соединение 9-1) и 4,35 мл (23,9 ммоль) N-диизопропилэтиламина в 50 мл метиленхлорида при 0°С в течение более 30 минут и смесь перемешивают в течение 20 минут.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 40 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, и смесь экстрагируют 100 мл хлороформа. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=4:1 до 2:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 2,80 г названного соединения в виде желтоватого пенистого вещества (выход: 96%).

Значение Rf: 0,41 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 585 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,38 (brs, 9H), 1,60-1,84 (m, 9H), 2,09-2,21 (m, 2H), 2,50-2,61 (m, 1H), 3,72-3,81 (m, 1H), 3,99-4,05 (m, 1H), 5,01 (brs, 1H), 5,76-5,80 (m, 1H), 7,59 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,71 (dd, J1=8,7 Гц, J2=0,9 Гц, 1H), 7,77-7,82 (m, 2H), 8,16 (s, 1H), 8,80 (dd, J1=2,6 Гц, J2=0,9 Гц, 1H)

(Пример 11)

Синтез 5-[5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-циклопропил-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазола (Соединение 11)

206 мг (2,40 ммоль) циклопропилборной кислоты, 556 мг (2,40 ммоль) оксида серебра (I), 365 мг (2,40 ммоль) фторида цезия, 185 мг (0,160 ммоль) тетракис(трифенилфосфин)палладия и 20 мл 1,2-диметоксиэтана добавляют к 468 мг (0,801 ммоль) 5-[5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-1-(тетрагидропиран-2-ил)-4-трифторметансульфонилокси-1Н-индазола (Соединение 10) и смесь перемешивают в токе аргона в течение 30 минут при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 100 мл воды, и смесь экстрагируют 100 мл этилацетата. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагеле (элюент: н-гексан:этилацетат=3:1 (об./об.)) и фракцию, содержащую искомое вещество концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 260 мг названного соединения в виде бледно-оранжевого порошка (выход: 68%).

Значение Rf: 0,33 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 477 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl ₃, ч./млн): 0,55-0,61 (m, 2H), 0,82-0,90 (m, 2H), 1,37 (brs, 9H), 1,60-1,86 (m, 9H), 2,06-2,21 (m, 2H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,54-2,65 (m, 1H), 3,70-3,79 (m, 1H), 4,02-4,06 (m, 1H), 4,99 (brs, 1H), 5,70-5,75 (m, 1H), 7,46-7,57 (m, 3H), 7,74 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,6 Гц, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,76 (dd, J1=2,6 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н)

(Пример 12)

Синтез 1-трет-бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-(пиперидин-1-ил)-1Н-индазола (Соединение 12-1)

Суспензию 320 мг 5% палладий на угле (водный) в 3 мл этанола и 6,87 мл 50% водного раствора глутаральдегида добавляют к раствору 160 мг (0,343 ммоль) 4-амино-трет-бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил) фенил]-1Н-индазола (Соединение 5) в 30 мл этанола и смесь перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 5 часов. Затем добавляют 3,44 мл 50% водного раствора глутаральдегида и смесь перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 2 часов.

После завершения реакции реакционный раствор фильтруют через Celite и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Добавляют воду к полученному остатку и конечный осадок отфильтровывают и промывают водой. Полученный порошок хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=6:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 163 мг названного соединения в виде пенистого белого вещества (выход: 89%).

Значение Rf: 0,38 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 535 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,27-1,54 (m, 15H), 1,68 (s, 6H), 1,73 (s, 9H), 3,05-3,10 (m, 4H), 4,97 (brs, 1H), 7,35 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,40-7,45 (m, 4H), 7,79 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 8,34 (s, 1H)

Далее соединение 12-2 получают в соответствии со способом получения соединения 12-1.

В данном случае сукцинальдегид, применяемый для получения соединения 12-2, синтезирован по A.R.Katritzky, et al., J. Org. Chem., vol. 65, p.3683 (2000).

1-трет-Бутоксикарбонил-5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-(пирролидин-1-ил)-1Н-индазол

(Соединение 12-2)

Значение Rf: 0,46 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 521 (М⁺+1)

¹ Н-ЯМР спектр (CDCl₃, ч./млн): 1,37 (brs, 9H), 1,67 (s, 6H), 1,72 (s, 9H), 1,77-1,82 (m, 4H), 3,23-3,28 (m, 4H), 4,94 (brs, 1H), 7,25-7,40 (m, 5H), 7,58-7,62 (m, 1H), 8,41 (d, J=0,7 Гц, 1H)

(Пример 13)

Синтез 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-дифторметокси-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазола (Соединение 13-1)

1,47 г (4,51 ммоль) карбоната цезия и 458 мг (3,00 ммоль) хлордифторацетата натрия добавляют к раствору 680 мг (1,50 ммоль) 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-гидрокси-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазола (Соединение 9-2) в 10 мл N,N-диметилформамида и смесь перемешивают в токе аргона при 100°С в течение 45 минут.

После завершения реакции реакционный раствор вливают в 50 мл воды, и смесь экстрагируют 50 мл толуола. Органический слой последовательно промывают водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 343 мг названного соединения в виде белого порошка (выход: 46%).

Значение Rf: 0,46 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 501 (M ⁺)

¹Н-ЯМР спектр (DMSO-d ₆, ч./млн): 1,35 (brs, 9H), 1,48-1,85 (m, 9H), 1,95-2,12 (m, 2H), 2,34-2,57 (m, 1H), 3,72-3,82 (m, 1H), 3,86-3,94 (m, 1H), 5,89-5,95 (m, 1H), 7,10 (t, ²J_F-H=74,0 Гц, 1H), 7,18 (brs, 1H), 7,37-7,48 (m, 4H), 7,49 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7,75 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,15 (s, 1H)

Далее соединение 13-2 получают в соответствии со способом получения соединения 13-1.

5-[5-(1-трет-Бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-дифторметокси-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-индазол (Соединение 13-2)

Значение Rf: 0,29 (н-гексан:этилацетат=2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 503 (M ⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (DMSO-d ₆, ч./млн): 1,34 (brs, 9H), 1,50-1,86 (m, 9H), 1,96-2,12 (m, 2H), 2,34-2,53 (m, 1H), 3,72-3,83 (m, 1H), 3,86-3,95 (m, 1H), 5,89-5,96 (m, 1H), 7,26 (t, ²J_F-H=74,0 Гц, 1H), 7,33 (brs, 1H), 7,72 (dd, J1=8,5 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,76-7,88 (m, 3Н), 8,18 (s, 1H), 8,66 (dd, J1=2,4 Гц, J2=0,7 Гц, 1H)

(Пример 14)

Синтез 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-(3-диметиламиноакрилоил)-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазола (Соединение 14).

2,0 мл (15 ммоль) N,N-диметилформамиддиметилацеталя добавляют к раствору 500 мг (1,05 ммоль) 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-метилкарбонил-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазола (Соединение 1-7) в 6 мл N,N-диметилформамида в токе аргона и смесь перемешивают при 70°С в течение 1,5 часов и затем при 100°С в течение 4 часов.

После завершения реакции реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент:этилацетат), и фракцию, содержащую искомое соединение, концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в хлороформе и добавляют к нему этилацетат и н-гексан, и полученное твердое вещество отфильтровывают, получая в результате 450 мг названного соединения в виде желтого порошка (выход: 81%).

Точка плавления: 191-194°С

Значение Rf: 0,22 (этилацетат)

Спектр масс (Cl, m/z): 533 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (СDСl₃, ч./млн): 1,39 (brs, 9H), 1,59-1,82 (m, 9H), 1,97-2,11 (m, 1H), 2,14-2,30 (m, 2H), 2,45 (brs, 3H), 2,90 (brs, 3H), 3,73-3,83 (m, 1H), 4,08-4,19 (m, 1H), 4,71-4,80 (m, 1H), 4,94 (brs, 1H), 5,64-5,69 (m, 1H), 7,34 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,35-7,45 (m, 5H), 7,77 (dd, J1=8,8 Гц, J2=1,0 Гц, 1H), 8,38-8,42 (m, 1H)

(Пример 15)

Синтез 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-(изоксазол-5-ил)-1Н-индазола (Соединение 15)

150 мг (2,2 ммоль) гидрохлорида гидроксиламина и 150 мг (1,1 ммоль) карбоната калия добавляют к раствору 400 мг (0,75 ммоль) 5-[4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)фенил]-4-(3-диметиламиноакрилоил)-2-(тетрагидропиран-2-ил)-2Н-индазола (Соединение 14) в 5 мл этанола в токе аргона и смесь перемешивают в течение 3 часов при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении, добавляют к нему воду и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.)), и фракцию, содержащую искомое вещество, концентрируют при пониженном давлении, получая в результате 300 мг названного соединения в виде бледно-желтого соединения (выход: 95%).

Значение Rf: 0,33 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 419 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (СDСl₃, ч./млн): 1,39 (brs, 9Н), 1,68 (s, 6H), 5,02 (brs, 1H), 5,48-5,60 (m, 1H), 7,21-7,28 (m, 2H), 7,40 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,41-7,48 (m, 2H), 7,55-7,62 (m, 1H), 8,09 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,57 (s, 1H), 10,41 (brs, 1H)

[Примеры приготовления препаратов]

Далее будут представлены основные примеры приготовления препаратов, содержащих производные индазола в соответствии с настоящим изобретением.

1) Таблетка

Рецептура 1 (на 100 мг)

Производное индазола	1 мг
Лактоза	66,4 мг
Кукурузный крахмал	20 мг
Кальций карбоксиметилцеллюлоза	6 мг
Гидроксипропилцеллюлоза	4 мг
Стеарат магния	0,6 мг

Таблетка вышеуказанной рецептуры покрыта 2 мг глазировочного средства (обычным глазировочным средством, например гидроксипропилметилцеллюлозой, макроголом или силиконовой смолой), в результате чего получается искомая таблетка. Кроме того, искомая таблетка может быть получена соответствующим изменением вида и/или количества производного и/или производных индазола.

2) Капсула

Рецептура 2 (на 150 мг)

Производное индазола	5 мг
Лактоза	145 мг

Искомая капсула может быть получена соответствующим изменением при смешивании в определенном соотношении производного инзадазола и лактозы.

3) Глазные капли

Рецептура 3 (на 100 мл)

Производное индазола	100 мг
Хлорид натрия	900 мг
Полисорбат 80	200 мг
Гидроксид натрия	q.s.
Соляная кислота	q.s.
Стерилизованная очищенная вода	q.s.

Искомые глазные капли могут быть получены соответствующим изменением вида и/или количества производного индазола и/или добавок.

[Фармакологический тест]

Для нахождения нового медицинского применения производному индазола был определен и изучен эффект по защите нейронных клеток сетчатки производным индазола от гибели нейронных клеток сетчатки, вызванной глутаматом, с применением эмбриональных нейронных клеток сетчатки крысы.

В данном случае соединения 4-2-4-9 применяются в качестве тестируемых соединений.

(1) Выделение культуры нейронных клеток сетчатки

Лапаротомией под общим наркозом матку беременной крысы Wistar поместили в лоток, содержащий сбалансированный солевой раствор Хэнкса (Hanks) (HBSS). Эмбрионы крысы выделяют из матки и отбирают глазные яблоки эмбрионов крысы. Сетчатку выделяют из глазных яблок под стереоскопическим микроскопом и разрезают на части хирургическим ножом. Затем сетчатку далее измельчают до клеточного уровня и пропускают через нейлоновую сетку (No. 305, производимую NBC Industries Co., Ltd.) для удаления агрегатов клеток, и затем полученный фильтрат центрифугируют при 1000 об/мин в течение 4 минут. Маточник удаляют и добавляют соответствующее количество модифицированной среды Eagle's medium (MEM), содержащей 10% бычьей плодной сыворотки (FBS), к оставшимся клеткам для их суспендирования. Затем считают количество клеток на гемоцитометре, добавляют MEM среду, содержащую 10% FBS, получая в результате суспензию клеток с концентрацией 0,8×10 ⁶ клеток/мл. Суспензию клеток инокулируют в количестве 80 мкл на каждый пластиковый диск, покрытый полиэтиленимином, и диски оставляют в инкубаторе (37°С, 5% CO₂). День инокулирования клеток обозначают как первый день культуры, и замену среды производят на четный день. В данном случае, до четвертого дня применяют MEM среду, содержащую 10% FBS, и на день 8 и применяют MEM среду, содержащую 10% лошадиной сыворотки (HS). В данном случае, на шестой день применяют среду, содержащую цитарабин (Аrа-С) (1,5×10^-5 М в MEM среде, содержащей 10% FBS), для удаления пролиферативных клеток.

(2) Получение бессывороточной MEM среды, содержащей тестируемое соединение и глутамат

Каждое из тестируемых соединений растворяют в бессывороточной MEM среде, дополненной глутаматом (1 мМ), получая в результате бессывороточную MEM среду, содержащую 10 мкМ глутамата и тестируемого соединения.

(3) Оценка гибели клеток

На 9-й день культивирования пластиковые диски, в которых инокулировали и культивировали клетки, переносят в бессывороточную MEM среду и инкубируют в течение 24 часов (37°С, 5% СО₂). На 10-й день культивирования пластиковые диски, в которых инокулировали и культивировали клетки, переносят в бессывороточную MEM среду, содержащую тестируемые соединения и глутамат, и инкубируют в течение 10 минут, затем переносят в бессывороточную MEM среду и инкубируют в течение 1 часа (37°С, 5% CO₂). Клетки окрашивают 1,5% раствором трипанового синего в течение 10 минут и фиксируют добавлением 10% фиксирующего раствора формалина. После промывания клеток физиологическим солевым раствором считают под инвертированным микроскопом окрашенные и неокрашенные клетки (одна группа состоит из 3-5 клеток).

В данном случае группа, в которой выполняют тест, описанный выше, за исключением того, что бессывороточную MEM среду, содержащую глутамат, применяют вместо вышеуказанной бессывороточной MEM среды, содержащей тестируемое соединение и глутамат, обозначена как среда дополнительной группы.

Кроме того, группа, в которой выполняют тот же тест, что и вышеуказанный, за исключением того, что бессывороточная MEM среда, не содержащая глутамата, применятся вместо вышеуказанной бессывороточной MEM среды, содержащей тестируемое соединение и глутамат, обозначена как группа, не обработанная глутаматом.

Выживаемость в среде дополнительной группы и группы тестируемого соединения рассчитывают на основе следующего уравнения. Далее рассчитывают отношение выживаемости в группе тестируемого соединения к выживаемости в среде дополнительной группы (отношение выживаемости: %) и оценивают эффект защиты нейронных клеток сетчатки тестируемым соединением.

Выживаемость (%)={(число неокрашенных клеток)/(число неокрашенных клеток + число окрашенных клеток)}×100

(4) Результаты и обсуждение

По сравнению с группой, не обработанной глутаматом, около 35-55% гибели нейронных клеток сетчатки наблюдается в среде дополнительной группы. Когда рассчитывают отношение выживаемостей (отношение выживаемости) каждой группы, в которой бессывороточная MEM среда, содержащая 10 мкм глутамата и тестируемого соединения, применяется в качестве среды сравнения выживаемости с выживаемостью в среде дополнительной группы, как показано на чертеже, выживаемость группы с тестируемым соединением составляет 100% или выше, и вызванная глутаматом гибель нейронных клеток сетчатки ингибируется. Таким путем подтвержден эффект защиты нейронных клеток сетчатки тестируемым соединением.