водный инъекционный раствор антагониста lhrh и способ его получения

Формула изобретения

1. Водный инъекционный раствор антагониста рилизинг-гормона лютеинизирующего гормона (LHRH), содержащий глюконовую кислоту, наполнитель и, необязательно, поверхностно-активное вещество, отличающийся тем, что антагонист LHRH выбран из группы веществ: цетрореликс, тевереликс, D-63153 (Ac-D-Nal-pCl-D-Phe-3-D-Pal-Ser-N-Me-Tyr-D-H-Cit-Nle-Arg-Pro-D-Ala-NH ₂), ганиреликс, абареликс, антид или азалин В; глюконовая кислота в форме дельта-лактона в количестве, больше эквимолярного по отношению к количеству антагониста LHRH, a наполнителем является маннит.

2. Водный инъекционный раствор по п.1, отличающийся тем, что поверхностно-активным веществом является Твин 80.

3. Водный инъекционный раствор по п.1, отличающийся тем, что он содержит, г:

цетрореликс	0,5
-лактон глюконовой кислоты	2,4
Твин 80	2,0
маннит	95,0

в 2 л воды для инъекций.

4. Водный инъекционный раствор по п.1, отличающийся тем, что он

содержит, мг:

D-63153	500
Твин 80	100
маннит	475

доведенных до объема 50 мл насыщенным раствором -лактона глюконовой кислоты.

5. Водный инъекционный раствор по п.1, отличающийся тем, что он содержит, мг:

тевереликс	100
Твин 80	100
маннит	475

доведенных до объема 10 мл насыщенным раствором -лактона глюконовой кислоты.

6. Способ приготовления водных инъекционных растворов антагониста LHRH по любому из пп.1-5, заключающийся в том, что антагонист LHRH, глюконовую кислоту в форме дельта-лактона в количестве больше эквимолярного по отношению к количеству антагониста LHRH, маннит в качестве наполнителя и, необязательно, поверхносто-активное вещество соответственно растворяют в воде для инъекций, гомогенизируют для получения инъекционного препарата, или антагонист LHRH, наполнитель маннитол и, необязательно, поверхностно-активное вещество растворяют в водном насыщенном растворе глюконовой кислоты, находящейся в форме дельта-лактона, гомогенизируют и получают инъекционный препарат.

7. Способ приготовления водных инъекционных растворов антагониста LHRH по п.6, отличающийся тем, что в качестве поверхностно-активного вещества используется Твин 80.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Данное изобретение касается водных инъекционных растворов антагониста LHRH (рилизинг-гормона лютеинизирующего гормона), в которых используют добавки органических физиологически приемлемых кислот и/или поверхностно-активных веществ, и их получения, обеспечивающего предупреждение агрегации антагониста LHRH в растворе. Кроме того, инъекционные растворы, приготовленные согласно изобретению, приводят к повышению биодоступности и делают возможным снижение инъецируемого объема.

Уровень техники

При контролируемой стимуляции яичников с последующим забором яйцеклетки и использованием технологий искусственного оплодотворения, кроме агонистов LHRH (например, трипторелина, бусерелина), с некоторого времени использовали главным образом антагонисты LHRH (цетрореликс, ганиреликс), поскольку они позволяют избежать изначального повышения секреции эндогенного гонадотропина и сразу приводят к конкурентному ингибированию рилизинг-гормона гонадотропина (см. ЕР 0788799 А2, ЕР 0299402 В1). Антагонист LHRH ганиреликс в настоящее время используют в препарате, который содержит 0,25 мг ганиреликса в 0,5 мл водного раствора, содержащего маннит, в готовой инъекционной форме (Оргалутран (Orgalutran)®). Антагонист LHRH цетрореликс (Цетротид (Cetrotide)®) в настоящее время производят в двух формах для введения: лиофилизат, содержащий 0,25 мг цетрореликса с комбинации со шприцом, готовым к употреблению, который содержит 1 мл воды для восстановления, и лиофилизат, содержащий 3 мг цетрореликса с комбинации со шприцом, готовым к употреблению, который содержит 3 мл воды для восстановления. Однако антагонисты LHRH используют не только для контролируемой стимуляции яичников, но также для терапии гормонально-зависимых типов рака, таких как, например, карцинома простаты. Такие субстанции, как абареликс (см. WO 98/25642) или цетрореликс (см. WO 00/47234) можно было бы использовать для этих целей, поскольку антагонисты LHRH могли бы в данном способе терапии служить альтернативой агонистам, преобладающим на рынке (лейпролиду, госерелину). Принимая во внимание относительно плохую растворимость абареликса в воде или физиологических средах, для достижения длительного действия следует использовать депо-препарат. Однако имеются данные о том, что длительное действие могло бы также быть вызвано хорошей растворимостью антагонистов LHRH (см. статью G.Jiang, J.Stakewski, R.Galyean, J.Dykert, C.Schteingart, P.Broqua, A.Aebi, M.L.Aubert, G.Semple, P.Robson, K.Akinsanya, R.Haigh, P.Riviere, J.Trojnar, J.L.Junien и J.E.Rivier, J. Med. Chem., 44: 453-467, (2001)).

Раскрытие изобретения

Задачей изобретения является приготовление инъекционного раствора, позволяющего обойтись малым объемом инъекции в сочетании с повышенной концентрацией антагониста LHRH за счет улучшенной растворимости последнего. В то же самое время предупреждается агрегация антагониста LHRH в относительно высококонцентрированном инъекционном растворе.

Неожиданно было обнаружено, что органические физиологически приемлемые кислоты, в частности карбоновые кислоты, в особенности гидроксикарбоновые кислоты, предпочтительно глюконовая кислота, сами по себе или в комбинации с поверхностно-активными веществами, такими, как, например, Твин, значительно улучшают растворимость антагонистов LHRH, и, следовательно, значительно снижают тенденцию к их агрегации.

Вследствие этого изобретение делает возможным приготовление антагонистов LHRH в относительно высокой концентрации в водных растворах для инъекций. К антагонистам LHRH, которые могут быть упомянуты, относятся, например, цетрореликс, тевереликс, D-63153 (Ac-D-Nal(2)¹-D-Cpa ²-D-Pal(3)^з-Ser⁴ -N-Me-Tyr⁵-D-Hci⁶ -NLe⁷-Arg⁸-Pro ⁹-D-Ala¹⁰-NH2), ганиреликс, абареликс, антид, азалин В. Обнаружено, что должен быть использован избыток соответствующей карбоновой кислоты, поскольку эквимолярные количества неэффективны. Очевидно, что данный эффект нельзя объяснить только образованием соли in situ с остатками присутствующих основных аминокислот, таких как, например, аргинин, пиридилаланин, лизин. Аналогичным образом не должна быть выбрана слишком высокая концентрация поверхностно-активного вещества, поскольку в противном случае растворы очень сильно пенятся и поверхностно-активные вещества, в свою очередь, вызывают агрегацию.

В то же самое время данные добавки делают возможным повышение биодоступности, так как они также явно снижают спонтанную агрегацию в организме после инъекции или делают возможным ускоренное всасывание субстанции из участка введения. Обнаружено, что пониженный рН данных инъекционных растворов (например, рН 2,5-3) не оказывает воздействия на местную переносимость инъекции. Посредством повышения концентрации возможно уменьшить вводимый объем, например, в случае цетрореликса от 3 мл до 1 мл для формы 3 мг. Аналогично показано, что с помощью данных добавок может быть достигнута хорошая стабильность при хранении (см. Пример 1). Хотя хранение в течение более 6 месяцев при 25°С и 60% относительной влажности приводило к увеличению количества примесей, объем содержимого в каждом случае явно превышал 90% (как правило, самая низкая величина для технических условий периода использования фармацевтических продуктов). Мутность как признак агрегации повышалась лишь незначительно. Величины мутности до 8 FTU (формазиновая единица мутности в соответствии с Европейской фармакопеей) являются вполне приемлемыми.

Консерванты, такие как, например, фенол или p-хлор-m-крезол, не мешают и могут быть дополнительно использованы для консервации растворов. Применение принятых наполнителей, таких как маннит, лактоза, глюкоза и фруктоза, также является возможным.

Осуществление изобретения

Пример 1

500 мг цетрореликса,

2 г Твин 80,

2,4 г -лактона глюконовой кислоты,

95 г маннита

смешивают с водой для инъекций и доводят до объема 2 л с получением гомогенного раствора. Затем раствор отфильтровывают в стерильных условиях и разливают в ампулы. Изначально и после хранения в течение 6 месяцев при 2-8°С и 25°С/60% относительной влажности проводят аналитическое исследование ампул на чистоту (ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография)), содержание (ВЭЖХ), рН и агрегацию (мутность).

Результаты аналитического исследования приведены в таблице.

	Исходное исследование	Исследование через 6 месяцев, хранение при 2-8°С	Исследование через 6 месяцев, хранение при 25°С/60% относительной влажности
Чистота (%)	0,37	0,69	2,32
Содержание (%)	100,0	98,7	95,4
РН	3,12	3,16	3,16
Мутность (%)	1,88	2,62	3,92

Пример 2

Приблизительно 500 мг D-63153,

Приблизительно 100 мг Твин 80,

Приблизительно 475 мг маннита

доводят до рН 2,5 с использованием водного насыщенного раствора -лактона глюконовой кислоты. В результате получают объем приблизительно 50 мл. Смесь перемешивают до образования прозрачного раствора.

Результаты аналитического исследования

Исходно мутность раствора составляет 2,4 FTU. Через 24 часа измеряют FTU, получая значение 2,1. Профиль чистоты и содержимое раствора (по данным ВЭЖХ) остаются неизменными.

Структура антагониста LHRH D-63153:

Ac-D-Nal(2)¹-D-Cpa ²-D-Pal(3)³-Ser⁴ -N-Me-Tyr⁵-D-Hci⁶ -NLe⁷-Arg⁸-Pro ⁹-D-Ala¹⁰-NH2

Пример 3

Приблизительно 100 мг тевереликса,

Приблизительно 100 мг Твин 80,

Приблизительно 475 мг маннита

доводят до рН 2,5 с использованием водного насыщенного раствора -лактона глюконовой кислоты. В результате получают объем приблизительно 10 мл. Смесь перемешивают до образования прозрачного раствора.

Результаты аналитического исследования

Исходно мутность раствора составляет 6,8 FTU. Через 24 часа измеряют FTU, получая значение 8,4. Профиль чистоты и содержимое раствора (по данным ВЭЖХ) остаются неизменными.

Структура антагониста LHRH тевереликса:

Ac-D-Nal-pCl-D-Phe-3-D-Pal-Ser-Tyr-D-H-Cit-Leu-iPr-Lys-Pro-D-Ala-NH2.