способ приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов

Формула изобретения

Способ приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов, включающий инкубирование яиц в течение 9 сут, при этом на 5, 6, 7 сут яйцо облучают в течение 30 с при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт и охлаждают в течение 6-7 сут при температуре 2-4°С с последующими гомогенизацией, разбавлением и фильтрацией, отличающийся тем, что перед гомогенизацией к эмбриональному субстрату дополнительно вводят растительный субстрат в соотношении 1:1, причем в качестве последнего используют побеги, которые отбирают при наличии более 9 суставчиков и листья каллизии душистой (Callisia Fragrans), производят обработку побегов и листьей путем инфильтрации раствора глюкозы в стебель с последующим созданием условий гипоксии и охлаждением, причем яйца с развившимися эмбрионами отбирают перед охлаждением и обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта, затем после охлаждения яйца в скорлупе, побеги листья каллизии душистой обрабатывают 5%-ным спиртовым раствором йода и облучают ультрафиолетовыми лучами в течение 18-20 мин на расстоянии 50-70 см, затем после гомогенизации полученную массу разбавляют янтарной кислотой в соотношении 1:1, так чтобы содержание последней в массе составляло 1%, а после разбавления и фильтрации субстрат подвергают тиндализации при температуре 55-60°С в течение 4-5 сут с последующей лиофильной сушкой.

Описание изобретения к патенту

Область техники к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов.

Уровень техники

Известен способ приготовления биологически активной взвеси из костей, которые консервируют при температуре 2-4°С в течение четырех суток. Затем кости автоклавируют при 4 атм. в течение 3 часов, после чего высушивают в сушильном шкафу при температуре 70-100°С в течение двух суток, измельчают в шаровой мельнице и просеивают через густое сито. Полученную костную муку таким образом смешивают с 0,2%-ным раствором агар-агара в соотношении 1:2 и разливают во флаконы с притертыми пробками и автоклавируют в течение 1 часа при 120°С (см. Техника приготовления тканевых препаратов // Стимулирующая терапия. в ветеринарии. И.А.Калашник. 2-е изд., перераб. и доп. - К.: Урожай, 1990. - с.66-67).

Недостатком данного способа являются высокая стоимость материалов, сложность и многоступенчатость.

Известен способ получения адаптогена из тканей животного и растительного происхождения, включающий измельчение сырья, его гидролиз и выделение целевого продукта, при этом в качестве сырья для получения адаптогена используют листья с мелкими ветками, корневища с корнями, кору, плоды растений и органы и ткани животных, гидролиз которых проводят гидроокисью щелочных металлов, а выделение целевого продукта осуществляют органической или минеральной кислотой.

В способе гидролиз тканей растительного происхождения проводят 1,0-5,0%-ным раствором гидроокиси натрия, или гидроокиси калия, или гидроокиси лития, или их смеси, взятых в равных частях, а гидролиз тканей животного происхождения осуществляют 7,5-12,5%-ным раствором гидроокиси щелочных металлов или их смеси, взятых в равных количествах.

В способе для выделения целевого продукта используют аскорбиновую, янтарную, фумаровую, лимонную, винную, молочную кислоту или их смеси, взятые в равных количествах.

В способе в качестве растворителя для солей щелочных металлов используют водопроводную, минеральную (морскую) воду, аммиак, спирт-ректификат (см. пат. РФ №2089181, кл. А61K 31/00, А61K 35/12, А61K 35/78, опубл. 10.09.1997 г.).

Недостатком данного способа является низкий выход целевого продукта и биологическая активность.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятый авторами за прототип является способ приготовления биостимулятора эмбрионального, включающий гомогенизацию яйца, охлажденного при температуре 2-4°С, разбавление, фильтрацию, при этом перед гомогенизацией яйцо инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают в течение 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С, причем в качестве разбавителя используют физиологический раствор в соотношении 1:10 с добавлением 5%-ного раствора фенола до его концентрации 0,3% (см. пат. РФ №2197251, кл. А61K 35/12, опубл. 27.01.2003 г.).

Недостатком данного способа является невысокая эффективность биостимулятора.

Раскрытие изобретения

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов, обладающего высокой эффективностью биологически активного вещества, повышающего общую и специфическую резистентного организма, а также более простого, дешевого и доступного.

Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения сводится к повышению эффективности биологически активного вещества, общей и специфической резистентности организма, упрощению и удешевлению способа.

Технический результат достигается с помощью способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов, включающий инкубирование яиц в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают в течение 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С с последующими гомогенизацией, разбавлением и фильтрацией, при этом перед гомогенизацией к эмбриональному субстрату дополнительно вводят растительный субстрат в соотношении 1:1, причем в качестве последнего используют побеги, которые отбирают при наличии более 9 суставчиков и листья каллизии душистой (Callisia Fragrans), производят обработку побегов и листьев путем инфильтрации раствора глюкозы в стебель с последующим созданием условий гипоксии и охлаждением, причем яйца с развившимися эмбрионами отбирают перед охлаждением и обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта, затем после охлаждения яйца в скорлупе, побеги и листья каллизии душистой обрабатывают 5%-ным спиртовым раствором йода и облучают ультрафиолетовыми лучами в течение 18-20 мин на расстоянии 50-70 см, затем после гомогенизации полученную массу разбавляют янтарной кислотой в соотношении 1:1, так чтобы содержание последней в массе составляло 1%, а после разбавления и фильтрации субстрат подвергают тиндализации при температуре 55-60°С в течение 4-5 суток с последующей лиофильной сушкой.

Сущность способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки на основе эмбриональных и растительных субстратов заключается в следующем.

Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток с целью получения яично-эмбрионального субстрата, используемого для дальнейшей обработки по методу Филатова. При этом количественное соотношение эмбриональных и внеэмбриональных тканей должно быть примерно одинаково, что обусловливает необходимое содержание ценных компонентов яйца. На 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Это обеспечивает выраженное стимулирующее действие на ткани тимуса, селезенки, печени и сосудистую сеть внезародышевых оболочек эмбриона. Затем яйца с развившимися эмбрионами отбирают из инкубатора с помощью овоскопа по наличию эмбрионов. Очищают от грязи и пыли скорлупу и обрабатывают 70% раствором этилового спирта. Яйца без эмбриона выбраковывают. Далее охлаждают в течение 6-7 суток в холодильной камере при температуре 2-4°С, что обеспечивает максимальное получение биологически активных соединений при помещении эмбриона в условия окружающей среды, неблагоприятные для выживания. Одновременно с этим производят сбор побегов и листьев комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах более 9 суставчиков и создают условия для выработки биогенных стимуляторов, с помощью инфильтрации раствора глюкозы в стебель, с последующим созданием условий гипоксии, и помещения обработанного таким образом сырья в холодильную камеру при температуре 2-4°С. Подобная технология направлена на увеличение содержания органических кислот (в частности, янтарной и фумаровой) в растении, поскольку процесс их образования у растений является следствием окислительной диссимиляции сахаров и повышение содержания в воздухе углекислого газа весьма способствует накоплению данных кислот в листьях.

Далее после извлечения из холодильной камеры яиц в скорлупе и побегов и листьев растения, производят их обработку 5%-ным спиртовым раствором йода и облучают ультрафиолетовыми лампами в течение 18-20 минут на расстоянии 50-70 см для дополнительной стерилизации.

Следующим этапом приготовления кормовой добавки является гомогенизация растительного и эмбрионального сырья в пропорции 1:1. После гомогенизация полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание последней в массе составляло 1%. С ее помощью проходит кислотная экстракция, предотвращается свертываемость яичного белка, а наличие ярко выраженных антибактериальных свойств, дает право использовать ее в качестве консерванта. Кроме того, янтарная кислота является одним из промежуточных соединений в цикле Кребса. Энергетическая мощность процесса синтеза АТФ при окислении янтарной кислоты существенно выше, чем при окислении любого другого субстрата. Она способствует поддержанию естественных компенсаторных реакций организма, повышает активность клеточного дыхания и является природным антиоксидантом.

Далее полученный субстрат фильтруют через ватно-марлевый фильтр, подвергают тиндализации при температуре 55-60°С в течение 4-5 суток, разливают в стерильные флаконы и хранят в холодильнике при температуре 2-4°С. Готовую кормовую добавку возможно подвергнуть лиофильному высушиванию. В этом случае продлевается его срок хранения.

Примеры конкретного выполнения способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов.

Пример 1. Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат.Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков и помещения сырья в холодильную камеру на 7 суток при температуре 2-4°С.

Далее производится обработка всего сырья 5%-ным раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 1 часть эмбрионального и 1 часть растительного субстратов. Фильтруют, полученный раствор разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 55°С в течение 4 суток.

Полученная кормовая добавка не выдерживает тиндализацию.

Пример 2. Проводят аналогично примеру 1, т.е. проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают но 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков и помещения сырья в холодильную камеру на 7 суток при температуре 2-4°С. Далее производится обработка всего сырья 5%-ным спиртовым раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 1 часть эмбрионального и 1 часть растительного субстратов. Полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание ее в массе составляло 10%. Фильтруют, полученную массу разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 60°С в течение 5 суток, хранят в холодильнике при температуре 2-4°С.

Полученная кормовая добавка при данных параметрах выдерживает тиндализацию, но при этом значительно ухудшаются ее вкусовые качества, и происходит удорожание препарата за счет увеличения в ней дорогостоящего компонента - янтарной кислоты, кроме того, растительный субстрат не обладает достаточной биологической активностью.

Пример 3. Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков, затем создают условия для выработки биогенных стимуляторов, с помощью инфильтрации раствора глюкозы в стебель, с последующим созданием условий гипоксии, и помещения обработанного таким образом сырья в холодильную камеру при температуре 2-4°С. Далее производится обработка всего сырья 5%-ным спиртовым раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 1 часть эмбрионального и 1 часть растительного субстратов. После гомогенизации полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание ее в массе составляло 1%. Фильтруют, полученный раствор разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 60°С в течение 5 суток, хранят в холодильнике при температуре 2-4°С. Готовый препарат возможно подвергнуть лиофильному высушиванию.

Полученная кормовая добавка предлагаемым способом выдерживает тиндализацию, обладает в меру кислым вкусом и способствует активизации жизненных процессов в организме животных, профилактики целого ряда заболеваний, повышает продуктивность и, кроме того, обладает более низкой себестоимостью при изготовлении.

Пример 4. Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков, затем создают условия для выработки биогенных стимуляторов, с помощью инфильтрации раствора глюкозы в стебель, с последующим созданием условий гипоксии, и помещения обработанного таким образом сырья в холодильную камеру при температуре 2-4°С. Далее производится обработка всего сырья 5%-ным раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 2 части эмбрионального субстрата и 1 части растительного субстратов. После гомогенизации полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание ее в массе составляло 1%. Фильтруют, полученный раствор разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 60°С в течение 5 суток, хранят в холодильнике при температуре 2-4°С. Готовый препарат возможно подвергнуть лиофильному высушиванию.

Полученная кормовая добавка не имеет значительного преимущества по эффективности в сравнении с кормовой добавкой по примеру 3, но происходит значительное удорожание, так как увеличился расход входящих в состав кормовой добавки эмбриональных тканей, следовательно, оптимальным и эффективным является пример 3.

Таблица 1.
Содержание различных гормонов в эмбрионально-яичной массе по данным клинико-диагностической лаборатории Краевого эндокриналогического диспансера г.Ставрополя.
№ п/п	Наименование гормона	Ед. измерения	Результат
1	фолликулостимулирующий	мме/л	102,4
2	лютеонизирующие	мме/л	201,6
3	эстрадиол	пмоль/л	1630,0
4	пролактин	мме/л	684,3
5	кортизол	нмоль/л	910,3
6	прогестерон	нг/мл	41,7
7	тестостерон	пмоль/л	46,09
8	ТТ3	нмоль/л	4,2
9	СТ4	пмоль/л	37,9
10	ТСГ	мкМе/мл	0,004

Содержание основных гормональных веществ в эмбрионально-яичной массе обуславливает положительное влияние на обмен веществ, иммунную систему и воспроизводительную функцию организма.

Таблица 2.
Содержание биологически активных веществ в соке каллизии душистой по данным ПНИЛ иммуноморфологии, иммунопатологии и иммунобиотехнологии СГУ, в %
Экстрактивные вещества	Полисахариды	Алкалоиды	Сапонины	Дубильные вещества	Органические кислоты	Аскорбиновая кислота	Флавоноиды
34	2,7	1,2	17,15	0,89	0,64	0,002	0,5

Таблица 3.
Содержание макро- и микроэлементов к каллизии душистой по данным Соловьевой В.А.
Элемент	Содержание, мкг/г
	лист	стебель
Калий	16000	6000
Кальций	77000	92000
Ванадий	7	-
Марганец	57	17
Железо	270	104
Кобальт	3,5	1,4
Никель	1,7	1,8
Медь	10	5,5
Цинк	34,3	54,3
Калий	0,3	0,2
Бром	37,5	7,5
Рубидий	11,1	7,1
Стронций	334,9	372,4
Цирконий	4,2	1,2
Свинец	1,9	3,5
Торий	0,3	0,14
Уран	0,92	1,12

Таким образом, кормовая добавка представляет собой комбинированное биологически активное средство, изготовленное из экологически чистого растительного и животного сырья, в данном случае побегов и листьев комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) и эмбрионально-яичной массы. Комбинирование этих субстратов в сочетании с применением потенциально эффективных рациональных технологических приемов их обработки, позволяет использовать высокоактивные компоненты эмбриональной ткани инкубированного яйца и биологически активные составные части лекарственного растения: флавоноиды, сапонины, алкалоиды, гликозиды, фитостерины, витамины, макро- и микро элементы. Химические вещества в составе растения оптимально сбалансированы, и этот баланс в значительной мере сохраняется даже после разрушения самого растения и экстракции входящих в него компонентов, эмбрионально-яичная масса, в свою очередь, в достаточной степени богата основными гормонами, способными оказывать косвенное и непосредственное влияние на обмен веществ и иммунную систему (см. Противоаллергические компоненты биологически активной эмбрионально-яичной массы. Материалы Третьего съезда России им. Ю.Л.Овчинникова Москва, 25-27 октября 2005 г., М.: МАКС Пресс, 2005. - с.84-85, авт.: Тимченко Л.Д., Ржепаковский И.В., Каузова А.С.).

Данная кормовая добавка была испытана на крысах.

Опыт. При проведении опыта крысы были разбиты на две группы по пять животных: контроль и опыт, в каждой группе по три самки и два самца. В опытной группе крыс пропаивают кормовой добавкой по предлагаемому изобретению в течение 10 дней в дозе 0,01 мл на 100 г живой массы 1 раз в сутки, утром натощак, дополнительно к обычной пище.

В контрольной группе крысы получают только обычную пищу.

Результат: в контрольной группе среднесуточного прироста живой массы нет.

В опытной группе - среднесуточный прирост живой массы увеличился на 0,8%, с одновременным повышением общей и специфической резистентности организма крыс. Для этого исследовали кровь перед началом опыта и через 30 дней после последнего приема кормовой добавки. В контрольной группе изменений показаний крови до начала опыта и после нет. В опытной группе показатели крови, а именно содержание лейкоцитов увеличилось на 10% и моноцитов к абсолютному числу составило 3%.

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:

- повышение эффективности биологически активного вещества;

- увеличение сохранности на 4,7% животных и продуктивности среднесуточного прироста живой массы на 0,8%;

- повышение общей и специфической резистентности организма животных;

- упрощение и удешевление способа;

- экологическая чистота кормовой добавки.