препарат для профилактики и лечения заболеваний животных и птиц, вызванных микоплазмами или серпулинами в ассоциации с бактериями

Формула изобретения

1. Препарат для профилактики и лечения заболеваний животных и птиц, вызванных микоплазмами или серпулинами в ассоциации с бактериями, включающий тиамулин и целевую добавку, отличающийся тем, что дополнительно содержит полимиксин или антибиотик тетрациклинового ряда при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Тиамулин	0,25-90,0
Полимиксин или антибиотик
тетрациклинового ряда	2,5-90,0
Целевая добавка	Остальное

2. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве антибиотика тетрациклинового ряда содержит тетрациклин, окситетрациклин, хлортетрациклин, доксициклин, моноциклин.

3. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве полимиксина содержит полимиксин-В, полимиксин-М, полимиксин-Е-колистин.

4. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве целевой добавки содержит растворитель, стабилизатор, консервант и наполнитель.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения болезней, вызываемых ассоциацией бактерий и микоплазм или бактерий и серпулин.

Известны препараты, содержащие антибиотики тетрациклинового ряда, активные в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, но практически не активные или слабо активные в отношении Mycoplasmas и Treponema hyodysenteriae (Merck Veterinary Manual /8 ediction/ Merck&Co., Inc., Whitehouse Station, USA / 1998, p.1771-1775).

Известен препарат, содержащий тиамулин, который применяют для лечения микоплазмоза животных и птиц и дизентерии свиней, но он практически не активен при лечении бактериальных инфекций, вызванных грамотрицательными микроорганизмами (Фармакологические препараты в ветеринарной медицине. - М.: Аквариум. - 2002. - с.734-735). Кроме этого, для обеспечения терапевтической эффективности тиамулин применяют в достаточно высокой дозе 15 мг/кг, которая помимо токсического действия на животных может вызывать аллергические реакции у людей, работающих с этим антибиотиком. Данный препарат принят за прототип.

Задачей настоящего изобретения является усиление противомикоплазменного и противосерпулинного действия с одновременным расширением антимикробного спектра при одновременном снижении содержания тиамулина в лечебной дозе.

Поставленная задача решается за счет того, что препарат, содержащий тиамулин и целевые добавки, согласно изобретению дополнительно содержит полимиксин или антибиотик тетрациклинового ряда.

Целесообразно компоненты препарата использовать при следующем соотношении компонентов, в мас.%:

Тиамулин	0,25-90,0
Полимиксин или антибиотик
тетрациклинового ряда	2,50-90,0
Целевые добавки	Остальное

Рекомендуется в качестве антибиотика тетрациклинового ряда использовать тетрациклин, окситетрациклин, хлортетрациклин, доксициклин или миноциклин.

Рекомендуется также в качестве полимиксина использовать полимиксин-В, полимиксин-М или полимиксин-Е - колистин.

В качестве целевых добавок целесообразно использовать растворитель, стабилизатор, консервант и наполнитель.

В качестве растворителя используют воду, диметилсульфоксид, диметилацетамид, диметиформамид, N-метилпирролидон, спирты, полиэтиленгликоли, пропиленгликоли, триглицериды, спирты, бензиловый эфир бензойной кислоты, глицерол формаль, масла (кунжутное, оливковое, персиковое, абрикосовое, миндальное). В качестве стабилизатора - лимонную кислоту, аскорбиновую кислоту, пропионовую кислоту, ЭДТУ, гидроокись натрия, а в качестве консерванта - бензиловый спирт, бутиловый спирт, метилпарабен, пропилпарабен.

Наполнителем для порошков могут быть сахара (лактоза, глюкоза, фруктоза, декстроза), цеолиты, бентонит, мел, тальк, мука, отруби, аэросил.

Полимиксин (полимиксин-В, полимиксин-М и полимиксин-Е - колистин) представляет собой полипептидный антибиотик с молекулярной массой около 1000, синтезируемый аэробной спорообразующей палочкой Bacillus polymyxa. Полимиксин активен в отношении только гамотрицательных микроорганизмов, но не действует на Mycoplasmas и Treponema hyodysenteriae. Полимиксин взаимодействует с цитоплазматической мембранной бактериальной клетки, связываясь с фосфолипидами. В результате повреждения структуры мембраны происходит изменение ее проницаемости как для внутри-, так и внеклеточных компонентов, что приводит к гибели микроорганизма (Hancock R.E.W., Chapple D.S. Peptide antibiotics. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 1317-1323).

Антибиотики тетрациклинового ряда объединяют антибиотики, родственные по химическому строению, антимикробному спектру, фармакокинетическим свойствам, характеру побочных эффектов. Тетрациклины действуют на микробную клетку бактериостатически, являются ингибиторами синтеза белка на уровне рибосом. К группе тетрациклинов относятся антибиотики тетрациклин, окситетрациклин, хлортетрациклин, доксициклин и миноциклин (Белоусов Ю.Б., Моисеев B.C., Лепахин В.К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. М.: Универсум Паблишинг. - 1997, с.330-332).

Технический результат, обеспечиваемый изобретением, состоит в повышении профилактической и лечебной эффективности препарата, расширении антимикробного спектра при одновременном снижении количества действующих веществ.

Препарат может быть использован в форме растворов: инъекционных и оральных, капель, суспензий, эмульсий, аэрозолей, а также в виде порошков, таблеток, болюсов и мазей.

Препарат для профилактики и лечения заболеваний животных и птиц, вызванных микоплазмами и серпулинами в ассоциации с бактериями, согласно изобретению иллюстрируется следующими примерами, которые, однако, не охватывают, а тем более не ограничивают весь объем притязаний данного изобретения.

Пример 1. Получение препарата.

Получают препарат путем смешивания или растворения компонентов, а затем препарат при необходимости фильтруют, стерилизуют, расфасовывают во флаконы или ампулы.

Препарат содержит следующие компоненты, в мас.%:

Тиамулин - 46,0

Тетрациклин - 46,25

Аэросил - 1,0

Лактоза - 6,75

Пример 2. Препарат содержит тиамулин в количестве 90,0 мас.%, полимиксин 2,50 мас.%, кунжутное масло 7,5 мас.%.

Примеры, приведенные ниже, характеризуют биологическую активность предложенного препарата.

Пример 3

Чувствительность Mycoplasma synoviae к тиамулину и полимиксину-В, а также к комбинации этих антибиотиков

Антибиотик	Кол-во штаммов	Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл)
Тиамулин	4	0,045±0,003
Полимиксин-В		>100
Тиамулин + полимиксин		0,01+5

При совместном применении двух антибиотиков антимикоплазменная концентрация тиамулина в отношении Mycoplasma synoviae снижается в 4 раза при одновременном уменьшении количества полимиксина в 20 раз.

Пример 4

Чувствительность Mycoplasma synoviae к тиамулину и тетрациклину, а также к комбинации этих антибиотиков

Антибиотик	Кол-во штаммов	Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл)
Тиамулин	4	0,045±0,003
Тетрациклин		0,78±0,01
Тиамулин + тетрациклин		0,0028+0,13

При совместном применении двух антибиотиков антимикоплазменная концентрация тиамулина в отношении Mycoplasma synoviae снижается в 16 раз при одновременном уменьшении количества тетрациклина в 6 раз.

Пример 5.

Чувствительность Mycoplasma gallisepticum к тиамулину и хлортетрациклину, а также к комбинации этих антибиотиков

Антибиотик	Кол-во штаммов	Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл)
Тиамулин	9	0,022±0,001
Хлортетрациклин		1,17±0,02
Тиамулин + тетрациклин		0,0018+0,13

При совместном применении двух антибиотиков антимикоплазменная концентрация тиамулина в отношении Mycoplasma gallisepticum снижается в 12 раз при одновременном уменьшении количества хлортетрациклина в 9 раз.

Пример 6

Чувствительность Serpulina hyodysenteriae к тиамулину и полимиксину-Е, а также к комбинации этих антибиотиков

Антибиотик	Кол-во штаммов	Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл)
Тиамулин	7	0,098±0,006
Полимиксин-Е		>100
Тиамулин + полимиксин-Е		0,015+10

При совместном применении двух антибиотиков антисерпулинная концентрация тиамулина в отношении Serpulina hyodysenteriae снижается в 6 раз при одновременном уменьшении количества полимиксина-Е в 10 раз.

Пример 7

Чувствительность Serpulina hyodysenteriae к тиамулину и окситетрациклину, а также к комбинации этих антибиотиков

Антибиотик	Кол-во штаммов	Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл)
Тиамулин	7	0,098±0,006
Окситетрациклин		>50
Тиамулин + окситетрациклин		0,0225+6,25

При совместном применении двух антибиотиков антисерпулинная концентрация тиамулина в отношении Serpulina hyodysenteriae снижается в 4,3 раза при одновременном уменьшении количества окситетрациклина в 8 раз.

Пример 8

Чувствительность Serpulina hyodysenteriae к тиамулину и миноциклину, а также к комбинации этих антибиотиков

Антибиотик	Кол-во штаммов	Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл)
Тиамулин	7	0,098±0,006
Миноциклин		>50
Тиамулин + миноциклин		0,006+2,1

При совместном применении двух антибиотиков антисерпулинная концентрация тиамулина в отношении Serpulina hyodysenteriae снижается в 16 раз при одновременном уменьшении количества миноциклина в 23,8 раз.

Пример 9

Телят, больных бронхопневмонией, вызванной микоплазмой в ассоциации с пастереллой, стафилококками и стрептококками, разделенных по принципу аналогов на три группы, лечили соответственно тиамулином в сочетании с хлортетрациклином в форме оральной суспензии, только тиамулином и только хлортетрациклином по следующей схеме:

Показатели	Группы телят
	Тиамулин + хлортетрациклин	Тиамулин	Хлортетрациклин
Количество телят в опыте (голов)	26	7	24
Возраст телят (дни)	63-80	67-78	64-83
Суточная доза препарата (мг/кг веса)	5+10	20	30
Срок лечения (суток)	7,4±1,1	7	9±1,9
Пало (голов)	-	1	1
Вынуждено убито (голов)	1	2	3
Выздоровело (голов)	25	4*	20
Терапевтическая эффективность (%)	96,15	57,14	83,33
* - переведены на лечение другими антибактериальными препаратами

В результате исследований было установлено, что при совместном применении тиамулина и хлортетрациклина проявляется синергидный эффект. При этом при уменьшении дозы тиамулина в 4 раз и хлортетрациклина в 3 раза терапевтическая эффективность совместного применения двух препаратов повышается на 39,01% и 13,17% соответственно в сравнении с раздельным применением этих антибиотиков. При этом следует отметить, что при применении тиамулина совместно с хлортетрациклином температура у телят нормализовалась на 3-4 день лечения, одного хлортетрациклина - на 5-8 день, а одного тиамулина - не нормализовалась до окончания срока наблюдения.

Пример 10

На 74 головах поросят в возрасте 53-57 дней, больных дизентерией, вызванной Serpulina hyodysenteriae в ассоциации с энтеропатогенной эшерихией серотипа О138, испытали инъекционную лекарственную форму тиамулина с доксициклином в суточной дозе соответственно по 2,5 и 5 мг ДВ/кг, которую вводили внутримышечно один раз в сутки в течение 3 дней. В результате лечения было установлено, что 71 животное выздоровело, т.е. терапевтическая эффективность составила 95,9%.

Одновременно 31 поросенка лечили инъекционным тиамулином в суточной дозе 10 мг/кг массы тела и 11 поросят инъекционным доксициклином в суточной дозе 30 мг/кг массы тела. При этом после 3 суток лечения было установлено, что терапевтическая эффективность тиамулина составила 90,3% (28 животных выздоровело), а применение доксициклина было неэффективным, т.к. 5 поросят погибло, а остальные 6 продолжали болеть.

Высокий терапевтический эффект предложенной лекарственной формы, в которой содержание тиамулина снижено в 2 раза, обусловлен присутствием в препарате доксициклина.

Пример 11

268 поросят, больных дизентерией (Serpulina hyodysenteriae) в ассоциации с колибактериозом (Е.coli), разделенных по принципу аналогов на пять групп, лечили соответственно тиамулином в сочетании с полимиксином-В, тиамулином в сочетании с полимиксином-М, тиамулином в сочетании с полимиксином-Е, только тиамулином и только полимиксином-Е. Полимиксин-В и полимиксин-М в опыте не использовали из-за их низкой эффективности. Препараты применяли в форме порошка в смеси с кормом.

Показатели	Группа поросят
	Тиамулин + Полимиксин-В	Тиамулин + Полимиксин-М	Тиамулин + Пояимиксин-Е	Тиамулин	Полимиксин-Е
Количество поросят в опыте (голов)	59	62	73	65	9
Суточная доза препарата (мг/кг массы тела)	1,5+10	2,5+5	5+2	10	20
Срок лечения (суток)	5	5	5	5	5
Пало (голов)	1	2	2	2	4
Вынуждено убито (голов)	2	2	-	5	1
Выздоровело (голов)	56	58	71	58	4*
Терапевтическая эффективность (%)	94,92	93,55	97,26	89,23	44,44
* - переведены на лечение другими антибактериальными препаратами

В результате исследований было установлено, что при совместном применении тиамулина и полимиксинов проявляется синергидный эффект. При этом при уменьшении дозы тиамулина в 2-6,6 раз и полимиксинов в 2-10 раз терапевтическая эффективность совместного применения двух препаратов повышается на 4,25-8,37% и 49,11-52,82% соответственно в сравнении с раздельным применением этих антибиотиков.

Дополнительные примеры.

Пример 12

Цыплят-бройлеров, больных микоплазмозом в ассоциации с колибактериозом, вызванной Mycoplasma gallisepticum и E.coli, лечили препаратом в форме порошка следующего состава, в мас.%: тиамулин 0,25; окситетрациклин 90,0 и в качестве целевой добавки лактозу 9,75 по следующей схеме:

Результаты исследований показывают, что применение препарата, содержащего в своем составе тиамулин 0,25% и окситетрациклин 90% обеспечивает сохранность 92,7% птиц, тогда как применение одного окситетрациклина в эквивалентной дозе обеспечивает сохранность только 83,1% цыплят. При этом для достижения указанного эффекта достаточно применять препарат всего в течение 3 дней, а окситетрациклин в течение 7 дней. Применение одного тиамулина при ассоциированной инфекции, вызванной микоплазмой и эшерихией, было неэффективно, и на 4 день опыта вся птица в этой группе пала. Применение окситетрациклина здоровой птице (контрольная группа) в дозе, аналогичной в препарате (360 мг/кг), в течение 7 дней не вызывало гибели птицы, что свидетельствует о безопасности испытанной дозы для цыплят.

Пример 13

С лечебно-профилактической целью при микоплазмозе в ассоциации с колибактериозом цыплятам-бройлерам применяли препарат в форме порошка следующего состава, в мас.%: тиамулин 90; доксициклин 2,5 и в качестве целевой добавки цеолит 7,5 по следующей схеме:

Результаты исследований показывают, что применение с лечебно-профилактической целью препарата, содержащего в своем составе тиамулин 90% и доксициклин 2,5%, обеспечивает сохранность 96,99% птиц, тогда как применение одного доксициклина в четырехкратной дозе обеспечивает сохранность только 91,78%, а одного тиамулина в эквивалентной препарату дозе - 87,52% цыплят. Применение тиамулина здоровой изолированной птице (контрольная группа) в дозе, аналогичной в препарате (45 мг/кг), не вызывало гибели птицы (срок наблюдения 60 дней), что свидетельствует о безопасности испытанной дозы для цыплят.

Пример 14

Поросят больных дизентерией, вызванной Serpulina hyodysenteriae в ассоциации с энтеропатогенной эшерихией, лечили препаратом в форме порошка следующего состава, в мас.%: тиамулин 45,0; полимиксин-Е 45,0 и в качестве целевой добавки лактозу 10,0 по следующей схеме:

Результаты исследований показывают, что применение препарата, содержащего в своем составе тиамулин 45% и полимиксин-Е 45%, при дизентерии, ассоциированной с колибактериозом, обеспечивает сохранность 95,5% поросят, тогда как применение одного тиамулина в двукратной дозе, а колистина-Е в четырехкратной дозе по отношению к препарату обеспечивает сохранность соответственно только 83,67% и 58,33% животных. Применение одного тиамулина при ассоциированной инфекции, вызванной серпулиной и эшерихией, было неэффективно, и на 4 день опыта всех оставшихся выживших в этой группе животных перевели на лечение другими антибактериальными препаратами.