препарат для профилактики и лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии сельскохозяйственных животных

Формула изобретения

1. Препарат для профилактики и лечения респираторных и желудочно-кишечных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии сельскохозяйственных животных, включающий тетрациклин (окситетрациклин) и полиэтиленгликоль, отличающийся тем, что дополнительно содержит поливинилпирролидон, химическое вещество - коммерческий водный раствор Версена (этилендиаминтетраацетат) и водный раствор трипсина, при следующих соотношениях компонентов, об.%:

15-20%-ный водный раствор полиэтиленгликоля
(MM 2000-6000), (ПЭГ)	10-15
15-20%-ный водный раствор поливинилпирролидона
(MM 280000-360000), (ПВП)	10-20
0,01-0,02%-ный коммерческий раствор Версена	10-15
8-10%-ный водный раствор тетрациклина	10-15
0,01-0,25%-ный коммерческий раствор трипсина
(100-128 ЕД)	Остальное

2. Способ профилактики и лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии сельскохозяйственных животных, преимущественно поросят, отличающийся тем, что препарат, охарактеризованный в п.1 формулы, вводят однократно внутримышечно в дозе 0,5-1,0 мл на голову поросенка.

Описание изобретения к патенту

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной иммунологии и химиотерапии, в частности к получению препарата для лечения респираторных и желудочно-кишечных бактериальных и вирусных заболеваний сельскохозяйственных животных и к способу их профилактики и лечения.

В настоящее время легочные и желудочно-кишечные заболевания имеют повсеместное распространение и наносят значительный ущерб, складывающийся из большого отхода и снижения веса молодняка сельскохозяйственных животных.

Известен препарат для лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекций сельскохозяйственных животных бактериальной этиологии - левотетрасульфин [1], включающий, об.%:

Левомецитин ВДВ	4 г
Тетрациклин АДВ (окситетрациклин)	4 г
Сульфадемизин АДВ	2 г
Аскорбиновая кислота	0,1 г
Новокаин	1 г
Полиэтиленгликоль	20 г
1,2 Пропиленгликоль	До 100 мл

Известен также препарат для лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекций сельскохозяйственных животных бактериальной этиологии Левотетрасульфин [2], включающий, г/100 мл:

Левомецитин сукцинат (по АДВ)	3,0-5,0
Тетрациклин (окситетрациклин) (по АДВ)	3,0-5,0
Сульфаэтидол (по АДВ)	1,5-2,5
Новокаин	0,8-1,2
Аскорбиновая кислота	0,08-0,12
Твин - 80 (официнальный)	18,0-22,0
1,2 Пропиленгликоль	До 100 мл

Способ профилактики и лечения заключается во внутримышечном применении препарата 2- 3-кратном введении на телятах, ягнятах и поросятах в дозах соответственно от массы тела животных [2. Прототип].

В задачу исследований входило расширение ассортимента иммунологических препаратов и получение препарата, обладающего помимо иммуностимулирующего эффекта профилактическим и лечебным свойством против респираторных и желудочно-кишечных заболеваний животных бактериальной и вирусной этиологии.

Это удалось достичь благодаря подбору компонентов предложенного препарата, который включает:

водный раствор полиэтиленгликоля и поливинилпирролидона, коммерческий раствор Версена, водный раствор тетрациклина и коммерческий раствор трипсина, при следующем соотношении компонентов, об.%:

15-20%-ный водный раствор полиэтиленгликоля
(ММ 2000-6000) (ПЭГ)	10-15
15-20%-ный водный раствор поливинилпирролидона
(280000-360000), (ПВП)	10-20
0,01-0,02% коммерческий раствор Версена	10-15
8-10%-ный водный раствор тетрациклина	10-15
0,01-0,25% коммерчесмкий раствор трипсина
(100-128 ЕД) (химопсина, химотрипсина)	Остальное

Предложенный препарат готовят следующим образом:

Пример 1. В 100 мл дистиллированной воды вносят 20 г ПЭГ и 20 г ПВП, тщательно перемешивают, после полного растворения стериллизуют автоклавированием при 121°С 45 минут.

Далее в стерильном флаконе смешивают путем взбалтывания по 20 мл ПЭГ и ПВП, добавляют 15 мл 0,02%-ного Версена, а также 10 г тетрациклина гидрохлорида и 0,25%-ный раствор трипсина (100-128 ЕД), доводя их объем состава до 100 мл.

Полученный таким образом препарат готов к применению.

Срок годности: препарат 12 месяцев при хранении в режиме 3+6°С.

Были приготовлены и испытаны следующие составы препарата - см., таблицу 1, 2 и 3.

Разработанные лекарственные формы обладают высокой лечебно-профилактической эффективностью, низким уровнем токсичности и иммуностимулирующим действием.

Предложенный препарат обладает широким спектром активности в отношении микробных и вирусных инфекций и является иммуностимулятором.

Внесение в состав 20%-ного водного раствора ПЭГ (ММ - 2000-6000) более 23 мл вызывает появление некробиоза или некроза на месте введения препарата, а количество ниже 10 мл не обеспечивает должного эффекта. Внесение в состав 20%-ного раствора ПЭГ обеспечивает эффект пролонгации. 20%-ный водный раствор ПВП (ММ - 28000-360000), превышающий 23 мл в составе, вызывает на месте введения некротические и дистрофические изменения тканей, меньшее количество (10 мл) - низкий уровень лечебного эффекта.

Состав, содержащий 20%-ный раствор ПВП, обладает иммуностимулирующим эффектом.

0,02%-ный коммерческий раствор Версена (этилендиаминтетраацет), (ЭДТА), внесенный в состав в превышающих количествах (более 15 мл), способствует развитию некроза и дистрофии с последующей атрофией тканей, а в уменьшенных количества (менее 10 мл), недостаточная эффективность выздоровления животных.

Использование в составе 0,02%-ного раствора Версена вызывает иммуномодулирующий эффект, разрушение микробов и вирусов в организме.

10%-ный водный раствор тетрациклина (окситетрациклина) гидрохлорида, превышающий максимальный уровень в составе (более 15 мл) вызывает некротические, некробиотические и дистрофические нарушения, а в меньших количествах (менее 10 мл) - низкий эффект лечения.

Использование в составе 10%-ного раствора тетрациклина гидрохлорида обеспечивает широкий спектр антимикробного, антивирусного действия.

Использование в составе 0,25%-ного раствора трипсина обеспечивает эффект пролонгации и иммуностимуляции, а также деструкцию вирусов микробов в организме.

Способ лечения и профилактики предложенным препаратом заключается во внутримышечном или подкожном его применении при заболеваниях респираторного и желудочно-кишечного тракта и т.д., вызванных вирусами и микробами.

Препарат вводят однократно в дозах: для мышей массой 12-28 г 0,5-0,8 мл подкожно, крысам массой 100-200 г и морским свинкам массой 200-350 г - 0,5-0,8 мл и кроликам массой 1,5-2,5 кг. - 0,5-1,0 мл для поросят на голову 0,5-1 мл.

Приводим конкретные примеры осуществления способа лечения.

Пример 1. Лечение трансмиссивного гастроэнтерита кроликов (ТГК).

Под опытом находилось 3 группы кроликов массой 2-3 кг., по 10 голов в каждой: 1 группе предложенный препарат (Повин-ВМ) вводился в дозе 1 мл. на голову. При проведении повторных экспериментов доза препарата колебалась от 1-2 мл./гол. Апробированы также и другие составы препарата. См. табл.1, 2, 3.

2 группа - введение левоэритроциклина (ЛЭЦ) в объеме 1 мл/гол., 3-я группа - 0,1 г/гол, тетрациклина по 1 мл (контроль).

Кратность применения и сроки лечения составили: для 1-й группы - однократное применение на весь курс лечения (5-7 дней), для 2-й - 2 раза, с интервалом в 3 дня, в течение 5-7 дней, а в 3 группе 2 раза в сутки в течение 5-7 дней. Результаты отражены в таблице 4.

Были проведены иммунологические исследования для определения эффективности иммуностимуляции предложенным препаратом. Для этого исследования проводили по общепринятой методике: определение антителообразующих клеток (АОК), реакцию торможения миграции лейкоцитов крови (РТМЛ), реакцию спонтанного изменения прилипаемости лейкоцитов (РСИПЛ).

Настоящий эксперимент проводили на 90 головах по 30 голов в каждой группе, с трехкратным повторным исследованием (результаты отражены в таблице 4).

Из представленных в таблице результатов по сравнительному определению лечебной эффективности можно отметить преимущество предложенного препарата. При этом из 30 леченных - 29 голов выздоровело полностью, что составляет 96,6% лечебной эффективности. Это в 1,5 раза превышает терапевтическую активность ЛЭЦ и в 14,6 раза - результаты лечения в 3-й группе (санация тетрациклином).

Следует отметить, что в группе, санированной предложенным препаратом, не отмечено ни одного случая рецидивов заболевания, тогда как в группе, получившей ЛЭЦ, частота рецидивов охватила 8 голов или 42,2% от числа выздоровевших.

Результаты иммунологических исследований по сравнению предложенного и известных препаратов позволило выявить значительное преимущество первого. Так, количество АОК, как показатель гуморального иммунитета в случаях применения предложенного препарата, превышало таковые показатели в прототипе в 1,8, а в аналоге - в 2,6 раза. Показатели РТМЛ свидетельствуют о том, что индекс торможения к 0,1% фитогемагглютинину был на 1,2 раза активнее при лечении предложенным препаратом по сравнению с прототипом и на 1,3 раза в аналоге. Это говорит о клеточной стимуляции предложенного препарата. Результаты по РСИПЛ также представляют факт клеточной стимуляции предложенного препарата. При этом процент прилипших лейкоцитов при лечении предложенным препаратом был в 1,3 раза выше по сравнению с прототипом и в 1,5 - по сравнению с аналогом.

Таким образом, проведенные испытания сравнительной лечебной эффективности предложенного препарата позволили отметить высокий терапевтический эффект при однократном применении, в отличие от однократного применения ЛЭЦ и многократного введения тетрациклина.

Пример 2.

Сравнительная лечебная эффективность предложенного препарата при пневмоэнтеритах у морских свинок.

В опытах использовали по 25 голов морских свинок, составивших три группы:

1 группа - лечение предложенным препаратом в дозе 1 мл/гол., однократно, внутримышечно, на весь курс лечения (состав препарата табл.2),

2 группа - лечение ЛЭЦ в дозе 1-2 мл/гол. однократно, внутримышечно и в

3 группа - внутримышечное введение иммуноглобулина в объеме 3-5 мл/гол, двукратно и 4-я группа - применение тетрациклина в дозе 0,1-0,3 г/гол., 2 раза в день, внутримышечно. За подопытными животными осуществляли наблюдение в течение 6-8 месяцев с целью выявления случаев рецидивов заболеваний респираторной и желудочно-кишечной системы у морских свинок.

Результаты представлены в табл.5.

Анализ таблицы показал, что терапевтический эффект в случае применения предложенного препарата составляет 96,0%, что более чем в 1,5 превышает данные по лечению во 2-й группе и приблизительно в 2 раза, в 3-й и 4-й группах.

Проведенные наблюдения за санированными морскими свинками всех 4-х групп (в течение 6-8 месяцев) позволили установить отсутствие рецидивов в 1 группе. Во 2, 3 и 4 группах их количество составило, соответственно 5 голов (38,4%), 4 гол. (34.3%) и 6 гол. (54,5%) от числа клинически выздоровивших морских свинок.

Надо отметить также хорошую переносимость предложенного препарата у морских свинок в период наступления лечебного эффекта. Сопоставляя эти результаты можно отметить, что в 1 группе наступление лечебного эффекта действия препарата было отмечено уже спустя 6-10 часов, тогда как во 2, 3 и 4-й группах спустя 12-15 и 16-22 часа, соответственно. Лечебный эффект сочетался из показаний температуры тела, одышки, клиники респираторного синдрома, прекращению диареи, поедаемости кормов, общего состояния.

Обращает на себя внимание и такой немаловажный факт, как кратность применения препаратов, составляющих в 1 и 2 группах - 1 раза, в 3-2 раза и в 4-10-14 раз. В качестве положительного момента следует отметить и дешевизну предложенного препарата.

Лечебная эффективность предложенного препарата при наличии полиэтилогического фактора заболевания составила 96,0%. При этом от применения ЛЭЦ, тетрациклина и миксоглобулина была в 2 раза ниже и составили соответственно 52,0%, 44,0% и 48,0%.

Повин-ВМ применен однократно, внутримышечно на поросятах в четырехдневном или 2-4 месячном возрасте, в дозе 0,5-1,0 мл/гол., независимо от массы тела.

Контрольную группу составили животные, получившие только вакцины.

Профилактическая эффективность предложенного препарата на свиньях для предотвращения респираторных и желудочно-кишечных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии отражена в таблице 6.

Анализ полученных результатов по апробации "Повина-ВМ" выявили его перспективное значение. Препарат применяют однократно в течение всего периода выращивания и сдачи на мясокомбинат.

Очевиден низкий уровень падежа (в 3,7 раз) и вынужденного убоя животных (в 0,3 раз).

Отменен высокий процент выживаемости свиней (в 1,2 раза), среднесуточный привес (в 0,7 раза), вес поголовья при сдаче на мясо (в 0,8 раза).

Повин-ВМ позволил предупредить вирусные и микробные заболевания в связи с входящими в препарат ингредиентами.

Побочных реакций не отмечено, как в момент отъема, так и в возрасте 2-4 месяцев. Животные, получившие Повин-ВМ, гораздо активнее.

Таким образом, разработанный иммуностимулятор однократного применения с профилактической целью, Повин-ВМ, позволил избежать многократного использования традиционных вакцин и др. препаратов, повысил сохранность поголовья, привесы, значительно сократил падеж и вынужденный убой свиней, что позволит сдать государству дополнительные тысячи тонн мяса.

Во всех группах, санированных предложенным препаратом, ЛЭЦ и тетрациклином у разных видов лабораторных и сельхозживотных (свиней) при той или иной этиологии заболевания проведено микроскопическое исследование пораженных тканей (легкие, желудок, кишечник, молочные железы и т.д.). Осуществлено микроскопичское и электронномикроскопическое изучение препаратов, приготовленных по общепринятым методикам. Результаты проведенных исследований показали, что только в группах животных, санированных предложенным препаратом (Повином-ВМ) отмечена не только полная деструкция и лизис микроорганизмов, но и структурные изменения клеточной стенки у них. Так, в частности, у микробов выявлено набухание, разрыхление и частичный лизис внешней оболочки, а у вирусов - разбухание вирионов, рельефность и утонченность суперкапсидной оболочки, а также комкование нуклеокапсида.

На основании проведенных экспериментов по применению предложенного препарата можно с уверенностью отметить следующие его преимущества:

- обладает высоким терапевтическим эффектом (95,0-96,0%) при широком этиологическом спектре возбудителей заболеваний (вирусы, микробы);

- безвреден при однократном мышечном введении лабороторным животным и сельхозживотным (свиньям). Химиотерапевтический индекс составил 5,5;

- однократная инъекция обеспечивает полный курс лечения при инфекционных заболеваниях различной системой локализации;

- препарат можно приготовить в лабораторных условиях и сохранить терапевтическую активность при 3+6°C в течении 12 месяцев;

- обладает не только пролонгированным антибактериальными противовирусным, но и иммуностимулирующим действием. Кроме того, он способен нейтрализовать возбудителя с сохранением его антигенной структуры в той или иной степени, что важно в контексте выработки специфической защиты у организма.

Предложенный препарат, применяемый предложенным способом для профилактики и лечения легочных и желудочно-кишечных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии у сельхозживотных, апробирован с положительным результатом с 1990 по 2005 г. во Владимирской, Самарской и Тверской областях.

Препарат и способ его применения найдет широкое распространение в в свиноводческих хозяйствах и частных секторах Российской Федерации и позволит резко сократить вышеупомянутые заболевания и увеличить выход полноценного молодняка и мяса.

Просим препарат назвать ПОВИН-ВМ согласно разрабатываемой документации.

Источники информации

1. Каталог отечественных и зарубежных препаратов. - М.: ИРИС ПРЕСС, 1994 г., стр.74.

2. Патент РФ №2214821, кл. А 61 К 31/00, А 61 Р 1/00, 2003 г.

Таблица 1
Компоненты и последовательность их растворения	Требуется компонентов на 100 мл. (об.%)
15%-ный водный раствор ПЭГ (ММ 2000-6000)	10 мл
15%-ный водный раствор ПВП (ММ 280000-36000)	10 мл
0,01%-ный коммерческий раствор Версена	10 мл
8%-ный водный раствор тетрациклина гидрохлорида (окситетрациклина)	10 мл
0,01%-ный коммерческий раствор трипсина 128 ЕД (химопсин, химотрепсин)	До 100 мл
Таблица 2
Компоненты и последовательность их растворения	Требуется компонентов на 100 мл (об.%)
20%-ный водный раствор ПЭГ (ММ 2000-6000)	15 мл
20%-ный водный раствор ПВП (ММ 280000-360000)	20 мл
0,025-ный коммерческий раствор Версена	15 мл
10%-ный водный раствор тетрациклина гидрохлорида (окситетраыиклина)	15 мл
0,25%-ный коммерческий раствор трипсина 100 ЕД (химопсин, химотрипсин)	До 100 мл
Таблица 3
Конкретные примеры составов препарата (Повин-ВМ)
Компоненты и последовательность их растворения	Требуется компонентов на 100 мл. (об.%)
22%-ный водный раствор ПЭГ (ММ 2000-6000)	12,5 мл
23%-ный водный раствор ПВП (ММ 280000-360000)	15 мл
0,015%-ный коммерческий раствор Версена	12,5 мл
9%-ный водный раствор тетрациклина щдрохлорида (окситетрациклина)	12,5 мл
0,15%-ный коммерческий раствор трипсина 128 ЕД (химопсин)	До 100 мл

Таблица 4
Сравнительная лечебная эффективность препаратов при трансмиссивном гастроэнтерите у кроликов.
№ п/п	Название препарата	Результаты лечения
							иммунологический статус
		кол-во голов	выздоровело		пало		АОК	РТМЛ	РСИПЛ
			гол.	%	гол.	%	(индекс)	(индекс)	%
1.	Предложенный препарат (Повин-ВМ)	30	29	96,6	1	3,3	58,24±5,4	0,61±0,02	98,2±2,3
2.	ЛЭЦ	30	19	63,3	11	36,6	32,15±2,7	0,79±0,04	74,3±2,8
3.	Тетрациклина гидрохлорид	30	2	6,6	28	93,3	21,93±3,6	0,81±0,02	65,8±4,0
Примечание: наблюдение за клинически выздоровевшими (рековнвалесцентами) составило 6-8 месяцев.
Таблица 5
Лечение пневмоэнтеритов у морских свинок
№ п/п	Название препарата	Результаты лечения
			клинически выздоровело					падеж
		кол-во	голов		%			голов	%
1.	Предложенный препарат (Повин-ВМ)	25	24		96,0			1	4
2.	ЛЭЦ	25	13		52,0			12	48,0
3.	Миксоглобулин	25	12		48,0			13	52,0
4.	Тетрациклин	25	11		44,0			14	56,0

Таблица 6
Результаты испытания "Повина-ВМ" на свиньях.
№	Показатели	"Повин-ВМ"	Контроль (вакцины) против чумы, респираторных заболеваний и др.
1	Доза (мл/гол)	0,5-1,0	0,5-2,0
2	Кратность введения препарата	1	4 и более раз
3	Количество голов в начале опыта	1149	1201
4	Количество голов на конец опыта	1108	884
5	Сохранность (%)	96,3	73,6
6	Среднесуточный привес на откорме (г)	622,75	442,88
7	Средний вес при сдаче на мясокомбинат (кг)	126,71	120,63
8	Падеж во время откорма (гол./%)	12 (5,2%)	46 (19,4%)
9	Вынужденный убой (гол.)	8	19