способ прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области

Формула изобретения

Способ прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области путем исследования витаминов в плазме крови, отличающийся тем, что определяют количество витаминов А, Bc, D, К, Е, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^-, количество витаминов B ₁, В₂, В₆, С, РР, В₃, В₁₂, H, выделяющих данные ионы при преобразовании витаминов в активные витамины, коферменты, простетические группы, затем вычисляют коэффициент синергизма Кс по формуле

Кс=(A+Bc+E+D+K)/(B ₁+B₂+B₆+C+PP+B₃+B ₁₂+H)

и при его значении большем 1,1449 прогнозируют антиоксидантное действие, а при значении меньшем 1,1449 - отсутствие антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, а именно челюстно-лицевой хирургии и биохимии.

Результаты исследований витаминной обеспеченности населения России свидетельствуют о массовом распространении полигиповитаминозов среди значительной части взрослого населения. Гиповитаминозный фон значительно усугубляется при любых заболеваниях. Поэтому лечение практически любого больного должно включать коррекцию витаминного дефицита включением в комплексную терапию поливитаминных препаратов [16]. Однако в большинстве стран рынок заполнен неэффективными и нерациональными комбинированными поливитаминными препаратами, а также витаминами в высоких дозах, что представляет угрозу для здоровья и оборачивается дополнительными расходами. Из 4 регионов мира в обзоре руководств по назначению было указано в 1990-1991 годах, что более 80% из 636 витаминов нельзя было рекомендовать. В США в сообщении 1991 года указывалось на обнаруженные огромные различия в количестве витаминов в более чем 3400 различных препаратов, находившихся на рынке в 1986 году. В состав препаратов могли входить любые количества витаминов от 7% рекомендуемой суточной потребности витамина Е до 50000% суточной потребности витамина В₆ в препаратах с одним ингредиентом; и от менее 0,5% суточной потребности витамина А, Е, B₁, В₃ , В₆ до 53333% суточной потребности витамина B ₁ в препаратах поливитаминов [21, 22]. Известно, что витамины могут взаимно усиливать оказываемые ими физиологические эффекты, взаимно уменьшая токсичность [10]. При этом количественная характеристика этого явления синергизма остается абсолютно неизученной.

При воспалении активируется свободнорадикальное окисление. Установлено также, что противомикробная защита осуществляется при непременном участии свободных радикалов и инициируемых ими реакций [19].

Точный механизм бактерицидного действия О^2- неизвестен; однако in vitro мощный окислитель О^2- вызывает (неизвестным путем) нарушение структуры нуклеиновых кислот и полисахаридов и окисляет тиоловые группы в белках [13].

Таким образом, организмы, использующие кислород, должны, сталкиваться с угрозой внутриклеточного образования О₂ ^- и Н₂О₂. Для защиты от этих реакционоспособных соединений кислорода служат ферментативные защитные механизмы. Организмы, которые не выработали такие защитные механизмы, могут обитать только в анаэробных условиях [12].

Результаты исследований, полученные С.Г.Сулеймановой с соавт., 1992, показывают, что течение всех 3 форм гнойно-воспалительных заболеваний ЧЛО, а именно: абсцесс, флегмона, хронический остеомиелит нижней челюсти, сопровождается развитием синдрома липидной гипероксидации, выражающейся в увеличении содержания гидроперекисей липидов в плазме и эритроцитах крови на фоне низкого уровня -токоферола [17].

Активация процесса ПОЛ вызывает существенные изменения в составе биологических мембран клеток. Образующиеся при окислении ненасыщенных жирных кислот токсичные продукты (перекиси, эпоксиды и др.) разрушают структуру и нарушают функцию различных биологических мембран, вызывают инактивацию ферментов, повреждают белки и нуклеиновые кислоты, влияя тем самым на функциональную активность организма в целом [17].

Уровень свободнорадикальных (СР) процессов и активность параметров антиоксидантной системы (АОС) в перефирической крови в известной мере отражают общее состояние этой системы, функционирование которой обеспечивает устойчивость организма к внешним воздействиям [6].

При этом известно, что в отличие от других незаменимых пищевых веществ (незаменимых аминокислот, полиненасыщенных жирных кислот) витамины не служат пластическим материалом или источником энергии [18]. Следовательно, такие продукты, как Н⁺ , ОН^-, О^2-, образующиеся при преобразовании витамина в активный метаболит, кофермент или простетическую группу, должны утилизовываться организмом чтобы избежать мутагенных последствий этих веществ.

Таким образом, все витамины можно разделить на две группы:

1-я группа - это витамины, нейтрализующие свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН ^-.

2-я группа - это витамины, являющиеся источником свободных радикалов О^2- и ионов Н⁺, ОН ^-.

1-я группа.

Витамин А.

При всасывании в кишечнике эфиров витамина А, растворенных в жирах пищи, их молекула подвергается ряду превращений: гидролизу с образованием витамина А-спирта, эмульгированию его желчными кислотами с образованием мицелл, всасыванию и реэтерификации в кишечных ворсинках с последующим поступлением эфиров витамина А в составе хиломикронов по лимфатическим путям в печень. В печени хиломикроны, содержащие эфиры витамина А, подвергаются расщеплению с высвобождением ретинилпальмитата, который гидролизуется с образованием свободного ретинола. Последний снова эстерифицируется и превращается вторично в пальмитат витамина А, который соединяясь с белками печени, образует запасную форму этого витамина [4].

Предварительным этапом включения витамина А в метаболические процессы является расщепление его эфиров, в основном ретинилпальмитата, с образованием активной формы витамина А-ретинола [4].

Первым этапом окислительного превращения витамина А и промежуточным этапом в процессе превращения каротина является альдегид витамина А-ретиналь. Окисление витамина А-спирта в витамин А-альдегид носит обратимый характер и катализируется алкогольдегидрогеназой и альдегидредуктазой в присутствии НАД и НАДФ [4].

Витамин А-кислота (ретиноевая кислота) является продуктом необратимого окисления ретиналя. В процессе обмена ретиноевая кислота, как и ретинол, подвергается окислительному декарбоксилированию. Соединение, образующееся при 14-С-декарбоксилировании ретиноевой кислоты, окончательно идентифицировано. Этот процесс прослежен in vivo. Возможно, начальный этап процесса связан с механизмом реакции образования свободных радикалов. Однако независимо от пускового механизма сам факт декарбоксилирования in vivo небольших количеств ретинола и ретиноевой кислоты показывает, что этот процесс является, по-видимому, одним из нормальных путей обмена витамина А, а не реакцией, связанной с детоксикацией вводимых извне больших доз ретиноевой кислоты [4].

Следовательно, в основе обмена витамина А лежат процессы его этерификации (с образованием сложного эфира и воды, где катализатором являются ионы Н⁺), гидролитического расщепления эфиров (взаимодействие с ионами воды Н⁺ и ОН^-, т.е. ионом водорода и гидроксила воды) и ферментативного окисления витамина А-спирта (взаимодействие витамина А-спирта и О^2- с последующим образованием витамина А-альдегида и воды).

Таким образом, в организме витамин А препятствует образованию свободных радикалов О^2- и ионов H⁺, ОН^-.

Витамин D.

Биологически активными продуктами превращения витамина D в тканях, обладающие более полярным характером, чем холекальциферол (витамин D₃) и эргокальциферол (витамин D₂ ) является 25-оксихолекальциферол и 25-оксиэргокальциферол, а также 1,25-диоксихолекальциферол соответственно [4].

Образование из холекальциферола 25-оксихолекальциферола происходит за счет присоединения О^2- в положении 25 атома, а 1,25-диоксихолекальциферол образуется за счет присоединения к 25-оксихолекальциферолу О ^2- в положении 1 атома [4].

Таким образом, в организме витамин D препятствует образованию свободных радикалов О ^2-.

Витамин Е.

В понятие "витамин Е" объединена сравнительно большая группа природных и синтетических веществ, являющихся производными токола и обладающих в разной степени биологической активностью -токоферола.

Токоферолы легко вступают во взаимодействие со свободными радикалами и активными формами кислорода. Это обуславливает их способность тормозить свободнорадикальные процессы перекисного окисления органических соединений (в частности, ненасыщенных жирных кислот) молекулярным кислородом.

Токоферолы чувствительны к кислороду воздуха (ультрафиолетовому свету и другим окислителям), которые превращают их в соответствующие хиноны [18].

Данное превращение происходит при окислении витамина Е (взаимодействие -токоферола и О^2- с последующим образованием -токохинона и воды) [7,18].

Токофероновая кислота и токоферонолактон являются активными формами -токоферола. Лишь небольшая часть -токоферола, превращающегося в токоферонолактон, проходит через стадию -токохинона [4].

Данное превращение происходит при взаимодействии -токоферола и О^2- с последующим образованием токофероновой кислоты и токоферонолактона [7].

Таким образом, в организме витамин Е препятствует образованию свободных радикалов О^2-.

Витамин К.

Витамины группы К представлены в живых организмах различными производными 2-метил-1,4-нафтохинона, различающимися характером боковых цепей. К данной группе относятся два типа хинонов с изопреноидными боковыми цепями: витамин K ₁ (филлохинон) и витамин К₂ (менахинон), природные аналоги которых способны превращаться друг в друга.

При восстановлении хинонов образуются соответствующие гидрохиноны за счет присоединения 2Н⁺ в положении 1 и 4 атомов [4].

Таким образом, в организме витамин К способен связывать ионы Н⁺.

Витамин В_с (фолиевая кислота).

Фолиевая кислота (В_с) метаболически неактивна, но является предшественником коферментов, включающихся в обменные процессы.

Важной химической особенностью фолиевой кислоты является способность ее птеридинового кольца к восстановлению путем присоединения 4 водородных атомов в 5, 6, 7 и 8 положениях с образованием тетрагидрофолиевой кислоты (ТГФК) [4].

Таким образом, в организме витамин В_с при преобразовании в кофермент ТГФК связывает 4 атома Н⁺.

2-я группа.

Витамин B₁ (тиамин).

Биологически активной формой, с которой связаны основные функции витамина B₁ в живых организмах, является пирофосфорный эфир тиамина, в образовании которого принимает участие АТФ, ионы магния и специфический фермент - тиаминкиназа. Опытами с меченным ³²P АТФ доказан перенос на тиамин целиком пирофосфатной группы тиаминкиназы [2].

Реакция идет по общему уравнению [4]:

Таким образом, при фосфорилировании тиамина происходит замещение атома водорода Н⁺ пирофосфатной группой.

Витамин В₂ (рибофлавин).

Рибофлавин, всосавшийся в кишечнике, подвергается фосфорилированию. При этом образуются две коферментные формы: флавинмононуклеотид (ФМН) и флавинадениндинуклеотид (ФАД) [4].

Простетическая группа флавопротеидов представлена не свободной молекулой рибофлавина, а в виде комплексов с фосфатом, называемый рибофлавин-5'-фосфатом или флавинмононуклеотидом (ФМН), или с адениловой кислотой, называемый флавинадениндинуклеотидом (ФАД) [2].

ФМН синтезируется в организме животных из свободного рибофлавина и АТФ при участии специфического фермента - флавинокиназы. Реакцию синтеза этого кофермента можно представить следующим уравнением [2]:

Образование ФАД в тканях также протекает при участии специфического фермента - флавиннуклеотифосфорилазы (или ФАД-синтетазы). Исходным веществом для синтеза является ФМН:

Таким образом, при фосфорилировании рибофлавина происходит замещение атома водорода Н⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании ФМН. В ФМН также замещается атом водорода H⁺ остатком мононуклеотида адениловой кислоты при преобразовании в ФАД.

Витамин РР (никотиновая кислота, никотинамид, ниацин).

НАД⁺ и НАДФ⁺ образуются в организме человека из витамина ниацина. Ниацин включает никотиновую кислоту и ее амид (никотинамид) - каждое из этих соединений может выполнять функции витамина в пищевом рационе. Для синтеза НАД⁺ или НАДФ⁺ ферменты, находящиеся в цитозоле большинства клеток, используют только никотиновую кислоту, но не никотинамид.

Никотиамидный фрагмент НАД⁺ образуется из никотинатного фрагмента, когда последний находится в составе нуклеотида; амидная группа поступает из глутамата и замещает атом Н⁺ никотиновой кислоты [8].

При фосфорилировании 2'-гидроксильной группы аденозинового фрагмента НАД⁺ происходит замещение атома водорода Н⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании НАДФ ⁺ [8].

Витамин В₃ (пантотеновая кислота)

Пантотеновая кислота является амидом, образованным пантоевой кислотой и -аланином. Пантотеновая кислота легко всасывается в кишечнике и затем фосфорилируется АТФ с образованием 4'-фосфопантотената (данной реакции предшествует процесс диссоциации пантотеновой кислоты на ионы с выделением иона H⁺, который не участвует в дальнейших превращениях). На пути превращения в активный кофермент А к фосфопантотенату присоединяется цистеин, затем отщепляется карбоксильная группа последнего (что равносильно присоединению тиоэтиламина), в результате образуется 4'-фосфопантетеин. Подобно многим коферментам, в состав которых входят водорастворимые витамины, активная форма пантотената содержит адениловый нуклеотид; 4'-фосфопантетеин аденилируется с образованием дефосфокофермента А. На конечной стадии АТФ фосфорилирует дефосфокофермент А по 3'-гидроксильной группе рибозы с образованием кофермента А [8].

Таким образом, при образовании из пантотеновой кислоты кофермента А происходит отщепление атома водорода H⁺ .

Витамин В₆ (пиридоксин).

Формами витамина В₆ являются пиридоксин, пиридоксаль и пиридоксамин.

Основной метаболически активной формой витамина В₆ является фосфорный эфир пиридоксаля - пиридоксаль-5-фосфат.

Биосинтез пиридоксальфосфата в организме может осуществляться либо путем фосфорилирования пиридоксаля при участии пиридоксалькиназы, либо путем фосфорилирования пиридоксина и пиридоксамина и последующего окисления их пиридоксинофосфатоксидазой [4].

Таким образом, при фосфорилировании витамина В₆ происходит замещение атома водорода H⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании пиридоксаль-5-фосфата.

Витамин B₁₂.

Последовательность превращения витамина B₁₂ в кофермент: кобаламин (оксикобаламин (Со¹⁺) 5'-дезоксиаденозилкобаламин (Со¹⁺) или метилкобаламин (Со¹⁺).

Образование Со¹⁺-производных кофермента может происходить путем -элиминирования (отщепления атома водорода из -положения рибозильного остатка кофермента) в результате взаимодействия кофермента с оксигруппой апофермента [4].

Таким образом, при превращении витамина B₁₂ происходит отщепление атома водорода Н⁺.

Витамин С (аскорбиновая кислота).

Приматы (человек и высшие обезьяны), морская свинка и некоторые другие животные не способны к биосинтезу аскорбиновой кислоты. Они нуждаются в экзогенном витамине С.

При окислении аскорбиновой кислоты в организме животных и человека образуется дегидроаскорбиновая кислота (ДАК) (эта реакция сопровождается выделением двух атомов водорода Н⁺), которая затем превращается в 2,3-дикето-L-гулоновую кислоту (эта реакция сопровождается выделением H₂O). При распаде последней образуется щавелевая кислота. Кроме того, в результате декарбоксилирования дикетогулоновой кислоты из нее образуется ксилоза, которая далее по обычной схеме превращается в глюкозу.

Для поступления витамина С в клетки важен переход аскорбиновой кислоты в ДАК. Такие данные имеются для эритроцитов, в которые ДАК диффундирует без энергетических затрат. ДАК в клетке за счет НАДФ Н быстро восстанавливается в аскорбиновую кислоту, Скорость выхода аскорбиновой кислоты из эритроцита приблизительно в 40 раз меньше по сравнению с вхождением ДАК в эритроцит. Это объясняется тем, что ДАК, являясь неионизированной и жирорастворимой формой витамина С, более способна к диффузии, чем отрицательный ион аскорбиновой кислоты, поскольку мембрана эритроцита имеет заряд отрицательного знака. Таким образом, есть основание считать, что ДАК является транспортной формой витамина С, во всяком случае в отношении ее включения в эритроциты [4].

Таким образом, для поступления витамина С в клетки важен переход аскорбиновой кислоты в ДАК, то есть ее транспортную форму, что сопровождается выделением двух атомов водорода H⁺.

Биотин (витамин Н).

В биотиновых ферментах карбоксильная группа биотина соединена с -NH₂-группой лизина ферментного белка ковалентной связью. Таким образом, биотиновый фермент представляет собой молекулу ацетилкоэнзим-А-карбоксилазы, в которой кофактор биотин ковалентно связан с апоферментом. Образование данного фермента происходит с отщеплением гидроксила воды ОН^- от биотина в положении 10 атома.

Биотин является коферментом ацетилкоэнзим-А-карбоксилазы. Существует также еще другая форма битинфермента - это -метил-кротонилкоэнзим-А-карбоксилаза, данная форма способна карбоксилировать свободный биотин, переводя его в 1'-N-карбоксибиотин в реакции карбоксилирования или фиксации СО₂ (с участием CO₂ ил НСО₃ ^-) сопряженные с распадом АТФ в соответствии с уравнением:

RH+НСО₃ ^-+АТФ R-COOH+АДФ+Н₃PO₄

В то же время известно, что органические кислоты, аналогично неорганическим кислотам, обладают ярко выраженными кислотными свойствами и в воде происходит их диссоциация на ионы:

R-COOH R-COO^-+H⁺

При этом R-COO ^- - это СО₂˜биотинфермент, структура которого считается общепринятой [4].

Таким образом, при образовании из биотина (витамина Н) CO₂˜биотинфермента происходит выделение иона водорода Н⁺ и гидроксила воды ОН ^-.

Таким образом, все рассмотренные витамины можно разделить на две группы:

1-я группа - это витамины, нейтрализующие свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН ^-. К ним можно отнести витамины А, В_с, Е, D, К.

2-я группа - это витамины, являющиеся источником ионов Н⁺ и ОН^-. К ним можно отнести витамины B₁, В₃, В₆, С, РР, В₅ , Н, В₁₂.

Следовательно, количество витаминов, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионов Н ⁺, ОН^-, должно быть равно количеству витаминов, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, а их соотношение должно приближаться в плазме крови к цифре "1". Такое соотношение двух групп было рассмотрено нами как коэффициент синергизма витаминов (К_с):

К_с=1-я группа/2-я группа

К_с=(А+В_с+Е+В+К)/(В₁+В ₂+В₆+С+РР+В₃+В₁₂+Н)

Исходя из имеющихся литературных данных [4, 9, 18], приведенных в таблице 1, было проведено исследование К_с для содержания витаминов в плазме крови, пище и моче. Причем было обнаружено, что данный коэффициент существенно отличается по содержанию в пище и плазме крови. Так если при максимальном содержании витаминов в плазме крови он составил 1,1449 ( 1,2), то есть приближается к "1", то при минимальном содержании витаминов в крови он повышается до 2,1 (что можно рассматривать как адаптацию антиоксидантной системы организма). При этом К_с для суточной нормы содержания витаминов в пище составил 0,3-0,4.

Следовательно, если в поливитаминном препарате К_с будет выше 1,2, дополнительно к лечебному действию, оказываемому витаминами, он будет обладать выраженным антиоксидантными свойствами.

При исследовании К_с в комплексном поливитаминном препарате "Винибис" было обнаружено, что значение К_с составляет 15 (таблица 1). При этом содержание в минимальной суточной лечебной дозе данного препарата (4 г) большинства витаминов от 2 и более 1000 раз меньше минимальной лечебной дозы (таблица 1). Ранее было обнаружено, что антиоксиданты оказывают выраженное действие и в сверхмалых дозах [20]. Поэтому было предположено, что комплексный поливитаминный препарат "Винибис" сохранит лечебное действие в дозе меньшей 4 г. С целью подтвердить сделанное нами предположение, было проведено исследование лечебного действия препарата "Винибис" на очаг воспаления при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области в дозе от 1,3 до 3,25 г, что соответствует 2-5 таблеткам данного препарата.

Известно, что при остром одонтогенном остеомиелите, осложненном флегмоной, в ротовой жидкости увеличивается содержание элементов, которые преимущественно содержатся в костной ткани [11], что позволяет судить о динамике патологического процесса. Известно, что кальций является основным структурным элементом костей скелета и зубов человека: 99% кальция содержится в костной и хрящевой ткани. Кроме того, известно также, что стронций в организме человека конкурирует с кальцием за включение в кристаллическую решетку оксиапатита кости. При увеличении концентрации кальция в рационе в 5 раз накопление стронция в организме снижается вдвое [1]. Кроме того, известно также, что около 80-87% всего фосфора находится в скелете человека.

Обмен кальция и кремния тесно связан между собой. Кремний способствует биосинтезу коллагена и образованию костной ткани. Установлено, что при переломах костей количество кремния в области перелома возрастает почти в 50 раз [3].

Поэтому было выбрано изучение содержания фосфора (Р), кальция (Са), кремния (Si) и стронция (Sr) в ротовой жидкости в процессе комплексного лечения препаратом "Винибис" при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области, а также определение соотношения концентраций этих элементов как критерия диагностики и лечения.

Известно, что атомно-абсорбционные методы дают возможность определения практически всех элементов периодической системы и отличаются высокой избирательностью и чувствительностью (до 10^-14 г). Поэтому был выбран прямой электротермический атомно-абсорбционный анализ ротовой жидкости на содержание данных элементов.

Материалы и методы исследования.

Обследовано 39 больных в возрасте от 19 до 68 лет (таблица 2, таблица 3, таблица 4), из них:

- с острым одонтогенным гнойным периоститом (ОП) - 6 человек;

- с острым одонтогенным остеомиелитом (OO) - 6 человек;

- с травматическим переломом нижней челюсти, осложненным нагноением костной раны (НКР) - 6 человек;

- с острым одонтогенным остеомиелитом, осложненным флегмоной (ОФ) - 8 человек;

- с хроническим травматическим остеомиелитом, осложненным гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях (ТОФ) - 6 человек;

- с одонтогенной аденофлегмоной (АФ) - 6 человек.

Исследовали смешанную нестимулированную слюну (ротовую жидкость) у 6 практически здоровых людей без стоматологических заболеваний в возрасте от 20 до 27 лет (контрольная группа) (таблица 5, таблица 6).

Курс лечения комплексным поливитаминным препаратом "Винибис" при остром одонтогенном гнойном периостите и при остром одонтогенном остеомиелите составлял 5 дней по 1 таблетке 2 раза в день (1,3 г в сутки); при нагноении костной раны составлял 7 дней по 1 таблетке 2 раза в день (1,3 г в сутки); при остром одонтогенном остеомиелите, осложненном флегмоной, составлял 5 дней по 1 таблетке 3 раза в день (1,95 г в сутки); при хроническом травматическом остеомиелите, осложненном гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, составлял 5 дней по 1 таблетке 4 раза в день (2,6 г в сутки); при одонтогенной аденофлегмоне составлял 5 дней по 1 таблетке 5 раз в день (3,25 г в сутки).

Методика исследования смешанной нестимулированной слюны (ротовой жидкости). Пациент предварительно поласкает рот бидистилированной водой в количестве 50 мл в течение 5 мин. Ротовую жидкость набирают в сухую чистую полиэтиленовую пробирку в количестве 2,0 мл. Ротовая жидкость отбирается микропипеткой объемом 10-20 мкл и вводится в кювету атомно-абсорбционного спектрометра. Регистрируется сигнал атомной абсорбции соответствующего элемента. Условия регистрации: спектрометр AAS-30 с атомизатором ЕА-3 фирмы "Carl-Zeiss-Yena" (Германия) предварительно градуируется по растворам фосфора (Р), кальция (Са), кремния (Si) и стронция (Sr) с известной концентрацией. По этому результату выдается сразу в единицах концентрации. Полное время анализа (от момента взятия пробы у пациента до получения результата анализа) составляет 2 минуты.

Забор биологической пробы проводился через 2-3 часа после завтрака (10-11 часов утра). Перед сбором слюны обследуемые тщательно прополаскивали рот бидистилированной водой (50 мл), 2-3 раза сплевывали в раковину, после чего в течение 10-15 мин способом сплевывания собирали слюну в чистые полиэтиленовые пробирки. Слюну собирали в хорошо освещенном помещении, при этом обследуемые сидели, дышали через нос, не разговаривали и не курили.

Полученные данные обработаны методом вариационной статистики. Расчеты производили с помощью персонального компьютера типа IBM PC/XT. При обработке цифровых данных проводилось вычисление средней арифметической, средней ошибки средней арифметической, определение достоверности разности средних величин (по критерию t Стьюдента).

Были получены результаты, которые представлены в таблице 2, таблице 3, таблице 4, таблице 5, таблице 6.

Результаты исследования.

В процессе лечения острого одонтогенного гнойного периостита препаратом "Винибис" (группа из 3 человек) из-за увеличения Sr соотношение Ca/Sr уменьшилось с 1881±378 до 513±170 (р<0,05). Без использования препарата "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение Ca/Sr уменьшалось незначительно (р>0,05).

В процессе комплексного лечения острого одонтогенного остеомиелита препаратом "Винибис" (группа из 3 человек) концентрация Р не изменялась по сравнению с контрольной группой (6 человек) 192,77±29,67 мкг/мл (р>0,05). Без "Винибиса" (группа из 3 человек) его концентрация наоборот увеличивалась с 196,47±33,12 до 302,73±14,27 мкг/мл (р<0,05).

В процессе лечения нагноения костной раны соотношение Ca/Si увеличивалось до значений контрольной группы (6 человек). Без использования препарата "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение Ca/Si увеличивалось незначительно (р>0,05). С использованием препарата (группа из 3 человек), соотношение Ca/Si увеличивалось значительно при выздоровлении (р<0,05).

У пациентов с острым одонтогенным остеомиелитом, осложненным флегмоной, при лечении без использования препарата "Винибис" (группа из 5 человек) концентрация Са в ротовой жидкости увеличивалась с 75,71±14,63 до 95,56±7,37 мкг/мл (р>0,05). С использованием препарата (группа из 3 человек) концентрация Са уменьшалась с 112,09±8,05 до 60,49±2,75 мкг/мл (р<0,05). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) концентрация Са составила 54,78±4,47 мкг/мл.

В процессе лечения хронического травматического остеомиелита, осложненного гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, с препаратом "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение Ca/Si уменьшалось с 258±60 до 98±35 (р>0,05). Без "Винибис" (группа из 3 человек) это соотношение наоборот увеличивалось с 330±151 до 427±35 (р<0,01). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) оно составило 133±29.

У пациентов с одонтогенной аденофлегмоной при лечении без использования препарата "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение концентраций Ca/Sr не изменялось и составило 511±108. С использованием препарата (группа из 3 человек) соотношение Ca/Sr увеличивалось с 208±59 до 975±98 (р<0,05). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) оно составило 3656±925.

Вывод: Использование препарата "Винибис" в комплексном лечении при остром одонтогенном гнойном периостите способствует уменьшению срока пребывания в стационаре с 8 до 5 койко-дней и способствует выведению Sr из костной ткани.

Использование данного препарата при остром одонтогенном остеомиелите предупреждает увеличение концентрации Р и развитие остеопороза, и уменьшает срок лечения с 13 до 11 койко-дней.

При травматическом переломе нижней челюсти, осложненного нагноением костной раны, препарат "Винибис" прекращает патологический процесс в костной ране и увеличивает соотношение Ca/Si из-за уменьшения концентрации Si, поступающего из линии перелома. Без использования данного препарата соотношение Ca/Si в среднем на 17 день после травмы достоверно не изменяется (р>0,05) вследствие процесса резорбции соединительной ткани в области линии перелома. Следовательно, данный комплексный поливитаминный комплекс способствует более ранней консолидации отломков и уменьшает срок пребывания в стационаре с 17 до 15 койко-дней при нагноении костной раны (Патент РФ №2232008).

Использование препарата "Винибис" в комплексном лечении острого одонтогенного остеомиелита, осложненного флегмоной, прекращает остеопороз, снижает концентрацию Са и уменьшает срок лечения с 13 до 11 койко-дней (Патент РФ №2232029).

При хроническом травматическом остеомиелите, осложненном гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, "Винибис" способствует прекращению резорбции костной ткани, уменьшает соотношение Ca/Si из-за снижения концентрации Са и уменьшает срок лечения с 28 до 17 койко-дней (Патент РФ №2232025).

Использование препарата "Винибис" в комплексном лечении одонтогенной аденофлегмоны увеличивает отношение Ca/Sr из-за снижения концентрации Sr в ротовой жидкости и уменьшает срок лечения с 18 до 9 койко-дней (Патент РФ №2210378).

Заключение.

Таким образом, предположение, что препарат "Винибис" как антиоксидант сохранит лечебное действие на очаг воспаления при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области в дозе, меньшей 4 г, а именно от 1,3 до 3,25 г, что соответствует 2-5 таблеткам данного препарата, подтверждается полученными результатами исследований.

Следовательно, соотношение количества витаминов, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН ^-, к количеству витаминов, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, возможно использовать как коэффициент синергизма для прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса.

Таблица 1
Витамин	Содержание в 4 г (6 таблеток) "Винибис"	Максимальная суточная потребность	Минимальная суточная потребность	Содержание в суточной моче	Содержание в плазме крови
A	667 мкг	1500 мкг	1500 мкг	-	150-600 мкг/л
D	64 мкг	15000 мкг	12000 мкг	-	15-40 мкг/л
E	3,6 мг	30 мг	20 мг	-	9-19 мг/л
К	+ (следы)	15 мг	10 мг	-	0,2-3,2 мкг/л
B c	24 мкг	200 мкг	100 мкг	5-10 мкг	6-20 мкг/л
B 1	33 мкг	2000 мкг	1500 мкг	150-500 мкг	10-90 мкг/л
B2	71 мкг	4000 мкг	2000 мкг	30-1000 мкг	26-37 мкг/л
PP	15 мкг	20 мг	15 мг	7-12 мг	0,2-1,5 мг/л
В3	76 мкг	10000 мкг	5000 мкг	1400-7000 мкг	60-350 мкг/л
В 6	22 мкг	3000 мкг	2000 мкг	1500-2500 мкг	10-180 мкг/л
B12	5 мкг	5 мкг	2 мкг	0,02-0,27 мкг	0,15-1,0 мкг/л
С	70 мкг	120 мг	100 мг	20-30 мг	4-15 мг/л
Н	2,4 мкг	200 мкг	150 мкг	29-52 мкг	9-16 мкг/л

Таблица 2
Ds1	№ гр 2	№пц 3	При поступлении				При выписке
			Са	Sr	Si	Р	Са	Sr	Si	Р
ОП	1	1	101,73	0,031	1,3968	236,3	60,25	0,0272	0,3823	177,5
		2	77,5	0,0152	0,3333	216,3	103,57	0,0686	0,2336	325,8
		3	46,62	0,0118	0,3552	152,9	44,3	0,0258	0,5328	201,5
	2	4	123,9	0,049	1,25	390,8	89,2	0,109	0,49	341,6
		5	52,4	0,028	0,63	176,9	61,7	0,255	0,68	153,7
		6	47,2	0,038	1,06	144,6	58,1	0,121	2,32	160,0
ОО	1	7	61,47	0,1488	0,2922	159,8	54,92	0,0366	0,7853	312,6
		8	165,11	0,3122	0,9762	261,3	137,89	0,1306	0,4412	275,1
		9	71,8	0,0724	0,592	168,3	95,16	0,0846	0,2037	320,5
	2	10	156,7	0,204	1,02	200,4	149,9	0,212	1,14	332,9
		11	87,7	0,2	1,58	139,2	59,8	0,099	0,63	87,7
		12	51,3	0,14	1,35	102,8	63,1	0,15	1,32	150,6
ОФ	1	13	104,97	0,0378	0,4939	151,3	108,95	0,0298	0,5013	266,1
		14	115,69	0,0562	0,2529	306,2	115,64	0,0508	0,1657	174,6
		15	60,6	0,0188	6,808	153,6	79,73	0,0186	3,8895	281,3
		16	48,6	0,038	0,62	152,2	92,4	0,09	1,74	148,1
		17	48,7	0,036	1,14	82,2	81,1	0,061	0,79	254,9
	2	18	126,79	0,0656	0,7034	346,3	62,64	0,013	0,4289	223,1
		19	99,7	0,0476	0,296	129,9	55,09	0,0054	0,1184	233,4
		20	109,79	0,0924	4,9581	354,3	63,73	0,0244	1,6212	464,1
АФ	1	21	76,27	0,2418	7,0664	139,9	99,8	0,1464	0,5328	301,6
		22	50,42	0,0938	0,7634	248,7	36,09	0,0717	2,6463	373,3
		23	72,54	0,1064	6,3659	204,0	45,65	0,7992	0,4854	110,3
	2	24	99,2	0,725	2,53	128,2	63,6	0,062	1,0	106,1
		25	73,0	0,226	0,51	152,6	56,8	0,072	1,49	124,1
		26	83,5	0,51	0,58	180,2	48,9	0,044	0,87	97,1
НКР	1	27	36,09	0,0717	2,6463	62,9	90,53	0,0466	0,8305	412,3
		28	58,65	0,1918	2,8208	215,5	73,82	0,044	0,2867	210,4
		29	70,5	0,035	3,9331	227,1	72,11	0,4062	0,888	440,1
	2	30	42,69	0,1198	0,5091	85,1	34,61	0,0174	0,2249	159,5
		31	76,07	0,0796	4,5291	54,3	52,13	0,0204	0,3562	194,0
		32	50,73	0,0202	2,1519	185,3	55,05	0,0392	0,275	153,1
ТОФ	1	34	52,43	0,0222	0,1905	110,3	67,58	0,02	0,1489	118,4
		35	95,84	0,1958	0,1559	135,0	89,44	0,0468	0,1862	192,5
		36	66,64	0,11	0,6571	311,7	71,82	0,0358	0,2009	158,2
	2	37	47,76	0,0062	0,2368	131,8	43,98	0,0644	0,6512	70,9
		38	67,48	0,0392	0,3434	307,3	50,47	0,0172	0,5506	264,8
		39	73,58	0,0668	0,1952	120,6	53,04	0,0206	0,3966	76,2
Примечание: Ds 1 - диагноз пациента;

№гр 1 - номер группы: 1-я группа - пациенты, которым проводилось комплексное лечение без препарата "Винибис", 2-я группа - пациенты, которым в комплексное лечение был включен данный препарат; №пц 2 - порядковый номер пациента.
Таблица 3
Диагноз	Эл1	Содержание Р, Са, Si, Sr в биологической пробе ротовой жидкости (мкг/мл)
		1-я группа 2		2-я группа 3
		При поступлении	При выписке	При поступлении	При выписке
ОП	Р	201,8±25,61	234,9±46,82	237,4±78,7	218,43±62,77
	Са	75,28±16,24	69,37±18,03	74,5±25,21	69,67±10,0
	Si	0,6951±0,3575	0,3829±0,0881	0,98±0,1868	1,1633±0,5882
	Sr	0,0193±0,0041	0,0405±0,0137	0,0383±0,0058	0,1616±0,1442
ОО	Р	196,47±33,12	302,73±14,27	147,47±29,0	190,4±75,13
	Са	99,46±33,57	95,99±24,4	98,57±31,49	90,93±30,05
	Si	0,6201±0,2016	0,4767±0,172	1,3167±0,1655	1,03±0,2105
	Sr	0,1778±0,072	0,0839±0,0279	0,1813±0,0212	0,1537±0,0444
НКР	Р	168,5±53,9	354,27±73,74	108,23±40,29	168,87±12,93
	Са	55,08±10,27	78,82±5,95	56,49±10,23	47,26±6,49
	Si	3,1334±0,4106	0,6684±0,1951	2,3967±1,1889	0,2854±0,039
	Sr	0,0995±0,0481	0,1656±0,1224	0,0732±0,0291	0,0257±0,0072
ОФ	Р	169,1±37,47	225,0±27,08	276,8±74,88	306,87±80,15
	Са	75,71±14,63	95,56±7,37	112,09±8,05	60,49±2,75
	Si	1,863±1,2655	1,4173±0,6823	1,9858±1,51	0,7228±0,4666
	Sr	0,0374±0,0055	0,05±0,0126	0,0685±0,0131	0,0143±0,0061
ТОФ	Р	185,67±64,61	156,37±21,8	186,57±61,59	137,3±64,97
	Са	71,64±13,02	76,28±6,65	62,94±7,93	49,16±2,72
	Si	0,3345±0,1646	0,1786±0,0161	0,2585±0,0449	0,5328±0,0755
	Sr	0,1093±0,0509	0,0342±0,0083	0,0374±0,0178	0,0341±0,0149
АФ	Р	197,53±32,17	261,73±79,97	153,67±15,29	109,1±8,08
	Са	66,41±8,21	60,51±20,2	85,23±7,75	56,43±4,32
	Si	4,7319±2,0313	1,2215±0,7259	1,2067±0,6744	1,12±0,1923
	Sr	0,1473±0,0483	0,3389±0,1885	0,487±,1472	0,0593±0,0072
Примечание: Эл1 - элементы;

2 - 1-я группа - пациенты, которым проводилось комплексное лечение без препарата "Винибис"; 3 - 2-я группа - пациенты, которым в комплексное лечение был включен данный препарат.
Таблица 4
Диагноз	К.Э.1	Соотношение Р/Са, Ca/Si, Ca/Sr в биологической пробе ротовой жидкости (мкг/мл)
		1-я группа		2-я группа
		При поступлении	При выписке	При поступлении	При выписке
ОП	Р/Са	2,8±0,29	3,5±0,51	3,23±0,09	3,03±0,4
	Ca/Si	145,5±47,53	227,96±111,85	75,57±16,51	99,23±46,37
	Ca/Sr	4109±540	1814±213	1881±378	513±170
ОО	Р/Са	2,17±0,3	3,7±1,13	1,63±0,2	2,03±0,27
	Ca/Si	166,86±26,23	283,16±117,7	82,37±36,65	91,36±24,65
	Ca/Sr	644±179	1226±140	524±125	577±85
НКР	Р/Са	2,83±0,58	4,46±0,97	2,06±0,85	3,66±0,55
	Ca/Si	17,45±2,12	149,2±55,7	41,4±21,7	166,7±17,1
	Ca/Sr	941±549	1265±559	1274±654	1983±338
ОФ	Р/Са	2,26±0,31	2,42±0,4	2,4±0,57	5,03±1,16
	Ca/Si	159,98±83,33	218,24±126,49	179,74±92,55	216,83±130,35
	Ca/Sr	2138±390	2515±647	1736±286	5877±2296
ТОФ	Р/Са	2,7±0,98	2,0±0,19	2,93±0,86	2,73±1,25
	Ca/Si	330,45±153	430,5±37,5	258,3±60,4	97,6±19,7
	Ca/Sr	1152±617	2432±483	3508±2144	2063±711
АФ	Р/Са	3,17±0,93	5,23±2,61	1,87±0,29	1,96±0,14
	Ca/Si	29,41±18,66	98,3±58,13	108,72±35,41	52,63±7,71
	Ca/Sr	511±108	414±189	208±59	975±98
Примечание: С.Э.1 - соотношение элементов.

Таблица 5
Содержание Р, Са, Si, Sr в биологической пробе ротовой жидкости (мкг/мл) в контрольной группе
№пц 1		Са	Sr			Si	Р
1		61,31	0,0408			0,27	313,1
2		70,32	0,017			1,4104	178,2
3		44,08	0,0072			0,3344	125,8
4		41,54	0,0158			0,6834	240,7
5		55,3	0,0088			0,2835	141,3
6		56,15	0,0447			0,445	157,5
Примечание: №пц 1 - порядковый номер практически здорового человека без стоматологических заболеваний.
Таблица 6
Содержание Р, Са, Si, Sr и соотношение Р/Са, Ca/Si, Ca/Sr в биологической пробе ротовой жидкости в контрольной группе
Эл1	Содержание Р, Са, Si, Sr (мкг/мл)			С.Э. 2	Соотношение элементов Р/Са, Ca/Si, Са/Sr (мкг/мл)
Р	192,77±29,67			Р/Са	3,61±0,19
Са	54,78±4,47			Ca/Si	131,7±29,38
Si	0,5711±0,1819			Ca/Sr	3656±925
Sr	0,0224±0,0061
Примечание: Эл1 - элементы; С.Э. 2 - соотношение элементов.

Библиографический список.

1. Бабков А.В., Москалев Ю.И. Стронций // БМЭ. - 3-е изд. - М., 1985. - Т.24. - С.322-324.

2. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник. / Под ред. С.С.Дебова. - М.: Медицина, 1983, 752 с., ил.

3. Борисенкова Р.В. Кремний // БМЭ. - 3-е изд. - М.,1979. - T.11. - С.520-523.

4. Витамины. Под редакцией М.И.Смирнова. - М.: Медицина, 1974. - 495 с., ил.

5. Воспалительные заболевания челюстно-лицевой области и шеи: (Руководство для врачей) / Под ред. проф. А.Г.Шаргородского. - М.: Медицина, 1985. - 352 с.; ил.

6. Диагностическое значение соотношения показателей про- и антиоксидантных систем периферической крови в профилактике осложнений у больных после операций на мягких тканях лица и шеи / Ч.Р.Рагимов, Н.Ю.Касаганова, Г.П.Тер-Асатуров, Ю.Н.Сергеев, В.В.Захаров // Стоматология. -1991. - №1. - С.45-47.

7. Жиряков В.Г. Органическая химия. - М.: Химия, 1971. - 496 с.

8. (301-1). Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. T.1. Пер. с англ.: - М.: Мир, 1993. - 384 с., ил.

9. Кровь // БМЭ. - 3-е изд. - М.: Советская энциклопедия, 1980. - Т.12. - С.93-132.

10. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2 т. Т2. - 14-е изд., перераб., испр. и доп.- М.: ООО "Издательство Новая волна": Издатель С.Б.Дивов, 2002. - 608 с., 8 с. ил.

11. Мубаракова Л.Н. Морфофункциональная оценка состояния очага острых одонтогенных гнойно-воспалительных заболеваний методом лучевой диагностики: Автореф. дис. канд. мед. наук. - Казань, 1999. - 20 с.

12. Основы биохимии / А.Уайт, Ф.Хендлер, Э.Смит, Р.Хилл, И.Леман; пер. с англ. В.П.Сукачева, Л.М.Гинодмана, Т.В.Марченко; под ред. и с предисл. Ю.А.Овчинникова. - М.: Мир, 1981. - T.1. - 534 с.; ил.

13. Основы биохимии / А.Уайт, Ф.Хендлер, Э.Смит, Р.Хилл, И.Леман; пер. с англ. Л.М.Гинодмана; под ред. и Ю.А.Овчинникова. - М.: Мир, 1981. - Т.3. - 726 с.; ил.

14. Рагимов Ч.Р. Эффективность препаратов антиоксидантного действия в комплексном лечении флегмон челюстно-лицевой области // Стоматология. - 1992. - №3-6. - С.35-37.

15. Рагимов Ч.Р., Захаров В.В., Сергеев Ю.Н. Оценка течения раневого процесса после оперативных вмешательств на мягких тканях лица и шеи по показателям свободнорадикального окисления периферической крови // Стоматология. - 1990. - №4. - С.40-42.

16. Резолюция Всесоюзной конференции по клинической витаминологии 18-20 июня 1991 г., Москва // Вопросы медицинской химии, 1992. - Т.38, Выпуск 4. - С.61-62.

17. Сулейманова С.Г., Сеидбеков О.С., Алекперова Н.В. Состояние перекисного окисления липидов при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области // Стоматология. - 1992. - №1. - С.36-37.

18. Тутельян В.А., Спиричев В.Б., Суханов Б.П., Кудашева В.А. Микронутриенты в питании здорового и больного человека (справочное руководство по витаминам и минеральным веществам). - М.: Колос, 2002. - 424 с.: ил. (Учебники и учебные пособия для студентов высших учебных заведений).

19. Черкашин С.И. Состояние перекисного окисления липидов у лиц с хроническим одонтогеннымм очагами инфекции // Стоматология. - 1989. - Т.68. - №3. - С.15-17.

20. Шамсиев Ф.Х. Антиоксиданты в комплексном лечении пародонтитов // "Стоматология на пороге третьего тысячелетия". Сборник тезисов. М.: Авиаиздат, 2001 - С.283-284.

21. Chetley A., Gilbert D., Problem Drugs, The Hague, HAL 1986, 6 of Vitamins section.

22. Park Y.K., Kirn I., Yetley E.A. Characteristics of vitamin and mineral supplement products in the United States // American Journal of Clinical Nutrition, Vol.54, 750-759, Copyright © 1991 by The American Society for Clinical Nutrition, Inc.