эмульсионный лосьон с активным витамином d₃

Формула изобретения

1. Эмульсионный лосьон с активным витамином D₃ для лечения заболеваний кожи, содержащий следующие компоненты: (а) терапевтически эффективное количество активного витамина D₃, (b) компонент масляной фазы, содержащий твердый масляный компонент, включающий белый вазелин и высший спирт, и жидкий масляный компонент, включающий сквалан, (с) компонент водной фазы, содержащий ионный полисахарид, и (d) неионогенное поверхностно-активное вещество, в котором (1) содержание указанного ионного полисахарида составляет 0,3-1,0 часть от общего веса препарата, (2) содержание указанного высшего спирта составляет 0,2-1,0 часть от общего веса препарата и (3) гидрофильно-липофильный баланс (HLB) указанного неионогенного поверхностно-активного вещества имеет значение 10 или более.

2. Лосьон по п.1, в котором весовое соотношение между указанным компонентом масляной фазы и указанным компонентом водной фазы (компонент масляной фазы/компонент водной фазы) имеет значение в интервале от 15/85 до 3/97.

3. Лосьон по п.1 или 2, в котором содержание указанного неионогенного поверхностно-активного вещества составляет 1,8-5,2 части от общего веса препарата.

4. Лосьон по любому из пп.1-3, в котором указанный активный витамин D₃ представляет собой активный витамин D₃, выбранный из группы, состоящей из 1, 24-дигидроксивитамина D₃, 1, 25-дигидроксивитамина D₃ и 1-гидроксивитамина D₃.

5. Лосьон по любому из пп.1-4, в котором указанный ионный полисахарид представляет собой ксантановую смолу и/или каррагенин.

6. Лосьон по любому из пп.1-5, вязкость которого, измеренная при 25^oС, на ротационном вискозиметре Brookfield, с использованием шпинделя LV4, вращающегося со скоростью 60 об/мин, составляет от 500 до 1400 мПас.

7. Лосьон по любому из пп.1-6, где указанные заболевания кожи представляют собой псориаз или кератоз.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к эмульсионному лосьону на основе активного витамина D₃, и особенно, к эмульсионному лосьону на основе активного витамина D₃, содержащему специфический компонент масляной фазы, специфический компонент водной фазы и неионогенный поверхностно-активный агент, в котором ионный полисахарид содержится в компоненте водной фазы в определенном количестве, высший спирт содержится в компоненте масляной фазы в определенном количестве и HLB (гидрофильно-липофильный баланс) указанного неионогенного поверхностно-активного агента имеет определенное значение.

Поскольку, например, 1,25-дигидроксихолекальциферол или 1,24-дигидроксихолекальциферол представляет собой вещество, обладающее способностью регулировать содержание Са, которая, как известно, составляет физиологическую функцию витамина D₃, на это вещество ссылаются, как на активный витамин D₃. Хотя физиологическое действие активного витамина D₃ носит несколько иной характер, что, по-видимому, связано со способностью активного витамина D₃ индуцировать дифференцировку и ингибировать рост, были получены данные, констатирующие тот факт, что активный витамин D₃ обладает эффективностью против псориаза, являющегося резизстентным заболеванием кожи, причем механизм его действия состоит в нормализации недостаточной дифференцировки и ускоренного роста эпидермальных клеток, являющихся, как считается, причиной этого заболевания (см., например, Т. Matsunaga et al., J/Dermatol., т. 17, 3, стр. 135 (1990)).

Поскольку такие заболевания кожи, как псориаз, являются болезнями эпидермиса внешнего слоя кожи, в плане биодоступности более выгодно осуществлять местное применение, а не системное введение в виде перорального приема, инъекций и т.д. Кроме этого, такой тип применения также предпочтителен с точки зрения возможного предотвращения нежелательных системных побочных эффектов. Примерами лекарственных форм для местного применения могут служить такие полутвердые препараты, как мази и кремы; такие жидкие препараты, как лосьоны и линименты; лейкопластыри; припарки и порошки. Однако с учетом патологии псориаза, предпочтительными формами являются полутвердые препараты и жидкие препараты.

Известные примеры полутвердых препаратов включают масляные мази, содержащие в качестве основного лекарственного средства 1,24-дигидроксивитамин D₃ и белый вазелин, в качестве основы (Японская послеэкспертизная патентная публикация 3-68009), кремовые препараты, содержащие компонент масляной фазы, включающий такой регулятор вязкости, как цетиловый спирт и такой липофильный солюбилизатор, как жидкий парафин, такой поверхностно-активный агент, как моностеарат сорбита (span 60), и такой компонент водной фазы, как пропиленгликоль (Японская патентная выкладка 4-210903), а также O/W (масло/вода) эмульсионную мазь, содержащую в качестве основного лекарственного средства 1,24-дигидроксивитамин D₃, и содержащую компонент масляной фазы, включающий такой твердый масляный компонент, как белый вазелин, поверхностно-активное соединение, включающее лаурилсульфат натрия и т.п. и компонент водной фазы, включающий пропиленгликоль и т.п. (Японская послеэкспертизная патентная публикация 3-68009). Кроме этого, пример известного препарата в виде крема содержит, в качестве основного лекарственного средства, 1,24-дигидроксивитамин D₃ и твердый масляный компонент, включающий белый вазелин и т.п., компонент масляной фазы, содержащий жидкий масляный компонент, включающий сквалан и т.п., такое поверхностно-активное вещество, как полиоксиэтиленовое гидрированное касторовое масло 60, и такой компонент водной фазы, как пропиленгликоль (публикация WO 95/6482).

Вместе с тем, с учетом патологии кожных заболеваний, предпочтительными препаратами для местного применения являются жидкие косметические препараты. Поскольку, согласно грубой оценке, 1/3 пациентов, страдающих псориазом на волосистом участке кожи головы, имеют волосы, лосьоны являются предпочтительными препаратами, поскольку они не липнут к тем местам, где имеются волосы, легко наносимы и имеют оптимальную вязкость для подавления распространения болезни (они имеют вязкость порядка 500-1400 мПас, согласно измерению, проведенному на ротационном вискозиметре Brookfield, с использованием шпинделя LV4, при скорости вращения 60 об/мин и температуре 25^oС). Помимо этого, желательно, чтобы на вязкость не оказывали заметного влияния такие внешние воздействия, как температура или вибрация и чтобы она все время оставалась постоянной. Более того, поскольку патология псориаза включает аномалию, при которой происходит разрушение эпидермальных клеток кожи, и имеются указания на слабую устойчивость к действию раздражающих веществ, предпочтительно, чтобы препараты, применяемые для лечения псориаза, имели низкий уровень раздражающего воздействия.

Как правило, жидкие косметические средства могут быть грубо классифицированы на лосьоны типа раствора и лосьоны типа эмульсии.

Из лосьонов с активным витамином D₃, лосьоны типа раствора с кальципотриолом или производным (20)R-22-окса-витамина D₃ раскрыты в публикации WO 91/12807 и публикации WO 92/01454. Поскольку в таких лосьонах применяется такой растворитель, как этанол, придающий лосьону низкую вязкость, такие препараты не только легко стекают при нанесении, препятствуя задержке препарата на подверженных заболеванию участках, но и при нанесении на волосяную линию лба, возникает проблема, связанная с попаданием препарата в глаза. Более того, следует также иметь в виду раздражающее действие таких органических растворителей, как этанол, используемых в качестве растворителя или усилителя поглощения.

Пример лосьона типа эмульсии описан, например, в японской патентной выкладке 60-174705, причем такой лосьон содержит активный витамин D₃ и его производные, такой компонент масляной фазы, как спермацетовый воск, цетанол, вазелин или сквалан, такое поверхностно-активное вещество, как моностеарат полиоксиэтилена (10 мол) или моноолеат сорбита, и такой компонент водной фазы, как глицерин. Кроме этого, в японской послеэкспертизной патентной публикации 3-68009 также раскрыт лосьон эмульсионного типа, который содержит 1,24-дигидроксивитамин D₃, компонент масляной фазы, включающий такой твердый масляный компонент, как стеариловый спирт и такой жидкий масляный компонент, как жидкий парафин, а также поверхностно-активное вещество, включающее лаурилсульфат натрия.

Если такие лосьоны типа эмульсии хранят, например, при температуре 50^oС или ниже, либо воздействуют на них вибрацией, то происходит изменение вязкости и наблюдается образование геля.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что традиционные эмульсионные лосьоны с активным витамином D₃ не всегда удовлетворительны в том, что касается фармакологической активности и химической стойкости основного лекарственного средства, вопросов оптимальной вязкости, касающихся, например, предотвращения прилипания к участкам волос, обеспечения легкости нанесения и предотвращения стекания, вопроса ощущений при нанесении, и вопроса физической стабильности препарата в условиях длительного хранения, воздействия тепла или вибраций и т.д.

Цель настоящего изобретения заключается в создании эмульсионного лосьона с активным витамином D₃, в котором сохраняется фармакологическая активность и химическая стойкость основного лекарственного средства в виде активного витамина D₃.

Другая цель настоящего изобретения состоит в разработке эмульсионного лосьона с активным витамином D₃, который сохраняет фармакологическую активность и химическую стойкость основного лекарственного средства в виде активного витамина D₃ и/или обладает превосходной фармакологической активностью и химической стойкостью и имеет вязкость, подходящую для нанесения, например, на участки волос.

Еще одна цель настоящего изобретения заключается в создании эмульсионного лосьона с активным витамином D₃, который сохраняет фармакологическую активность и химическую стойкость основного лекарственного средства в виде активного витамина D₃ и/или обладает превосходной фармакологической активностью и химической стойкостью, имеет вязкость, подходящую для применения, например, на участках волос, обладает отличной физической стабильностью при длительном хранении препарата, или воздействии на него тепла и вибраций, и характеризуется низким уровнем раздражающего воздействия на кожу.

С учетом отмеченных выше целей, в результате проведения предварительных исследований по разработке эмульсионного лосьона типа масло в воде (O/W) на базе активного витамина ₃, удовлетворяющего условиям (1) не прилипания, при легкости нанесения и при вязкости, препятствующей растеканию даже при применении на участках волос, (2) сохранения фармакологической активности и химической стойкости активного витамина D₃, достаточных для применения в качестве фармацевтического препарата, (3) обеспечения достаточной физической стабильности для применения в качестве фармацевтического препарата, и (4) обеспечения низкого уровня раздражающего воздействия на кожу, было обнаружено, что отмеченные выше цели могут быть достигнуты в результате сочетания применения специального компонента масляной фазы, добавления ионного полисахарида к компоненту водной фазы, применения неионогенного поверхностно-активного вещества, а также применения определенного количества указанного неионогенного поверхностно-активного вещества, определенного количества указанного ионного поверхностно-активного вещества, определенного количества высшего спирта в компоненте масляной фазы и при определенном значении HLB для указанного неионогенного поверхностно-активного вещества, что привело к созданию настоящего изобретения.

Если говорить более конкретно, то настоящее изобретение обеспечивает эмульсионный лосьон с активным витамином D₃, предназначенный, например, для лечения заболеваний кожи, включающий:

(a) терапевтически эффективное количество активного витамина D₃,

(b) компонент масляной фазы, содержащий твердый масляный компонент, включающий белый вазелин и высший спирт, и жидкий масляный компонент, включающий сквалан,

(c) компонент водной фазы, содержащий ионный полисахарид, и

(d) неионогенное поверхностно-активное соединение; где

(1) содержание указанного ионного полисахарида составляет от 0,3 до 1,0 весовых частей от общего веса препарата,

(2) содержание указанного высшего спирта составляет от 0,2 до 1,0 весовых частей от общего веса препарата, и

(3) HLB указанного неионогенного поверхностно-активного соединения имеет значение, равное 10 или более.

На фиг.1 изображена схема, отображающая пример способа производства лосьонов настоящего изобретения.

Фиг. 2 представляет собой график, показывающий результаты теста на кумулятивное раздражение кожи кроликов для лосьона примера 1 настоящего изобретения и лосьонов сравнительных примеров 9 и 10.

Компонент масляной фазы, который образует лосьон с активным витамином D₃ настоящего изобретения, содержит твердый масляный компонент, включающий белый вазелин и высший спирт и жидкий масляный компонент, включающий сквалан.

Белый вазелин настоящего изобретения очищали обесцвечиванием смеси углеводородов, полученных из нефти, причем стандарты качества, оговоренные, например, в Японской фармакопее, использовали в качестве стандартов его качества. В частности, белый вазелин высокой чистоты предпочтителен для обеспечения стойкости активного витамина ₃, например, 1,24-дигидроксивитамина D₃, причем предпочтительно применять вазелин с пероксидным числом порядка 0,5 или менее.

Кроме этого, сквалан настоящего изобретения представляет собой насыщенный углеводород, полученный, например, восстановлением углеводородов, добытых из масла печени океанических акул, обитающих на больших глубинах, причем качественные стандарты, оговоренные, например, в Японских стандартах косметического сырья применяются как стандарты качества такого углеводорода.

Как было установлено с помощью тестов на первичное раздражение кожи у кроликов, описанный выше компонент масляной фазы на основе углеводородов обладает более низкой раздражающей способностью, чем такие компоненты полярной масляной фазы, как эфиры жирных кислот. Использование такого компонента масляной фазы с низким уровнем раздражающего действия позволяет получать лосьон с низким уровнем раздражающего действия, который можно наносить на пораженные участки кожи, например, при заболевании псориазом.

В соответствии с настоящим изобретением, предпочтительно, чтобы содержание высшего спирта составляло от 0,2 до 1,0 весовых частей от веса всего препарата. Если такое количество выше 1,0 вес. части, то проявляется тенденция к затруднению процесса получения лосьона с такой вязкостью, которая не будет изменяться под воздействием тепла или вибраций. Если же это количество ниже 0,2 вес. частей, то затрудняется формирование защитного слоя (фаза D) вокруг масляной фазы. В результате усиливается подверженность системы явлению разделения фаз на масляную и водную фазы, что в конечном итоге может приводить к существенному снижению химической стойкости активного витамина D₃.

Предпочтительным примером вязкости лосьона настоящего изобретения может служить вязкость лосьона от 500 до 1400 мПас, измеренная на роторном вискозиметре Brookfield, с использованием втулки LV4, при скорости вращения 60 об/мин и температуре 25^oС.

Более конкретно, количества белого вазелина, высшего спирта и сквалана, образующих компонент масляной фазы настоящего изобретения, предпочтительно формируют твердый масляный компонент, включающий от 2 до 5 весовых частей белого вазелина и от 0,2 до 0,5 весовых частей высшего спирта, и жидкий масляный компонент, содержащий от 1 до 2,5 весовых частей сквалана, в рамках количественных интервалов, удовлетворяющих указанному выше весовому соотношению между твердым масляным компонентом и жидким масляным компонентом.

Помимо упомянутых выше белого вазелина, высшего спирта и сквалана, в компонент масляной фазы настоящего изобретения могут добавляться другие твердые масляные и жидкие масляные компоненты. Примерами твердых масляных компонентов могут служить твердый парафин, спермацетовый воск и пчелиный воск. Эти вещества должны добавляться в количествах, лежащих в интервалах, обеспечивающих достижение одной из целей изобретения, например, поддержание физической стабильности. В качестве примера добавляемого количества, можно привести 1/4 весовой части или менее твердого масляного компонента настоящего изобретения, которое является предпочтительным в плане обеспечения вязкости лосьона, подходящей для нанесения его на те участки, где имеются волосы. Примерами жидкого масляного компонента могут служить такие сложные эфиры, как триглицериды жирных кислот со средней длиной цепи, диизопропиладипат, и изопропилмиристат, жидкий парафин и диметилполисилоксан. Добавляемые количества таких жидких масляных компонентов должны лежать в интервале, который обеспечивает достижение одной из целей изобретения, например, физической стабильности. Так например, количество сквалана настоящего изобретения, равное 1/2 весовой части или менее, является предпочтительным для достижения вязкости лосьона, подходящего для применения на тех участках, где имеются волосы. Более того, в том что касается раздражающего действия, было установлено, что применение компонента масляной фазы, отличного от компонента масляной фазы на основе углеводородов, приводит в результате к некоторому усилению раздражающего воздействия в сравнении с использованием компонента масляной фазы на основе углеводородов.

К компоненту масляной фазы настоящего изобретения может добавляться антиоксидант. Примерами антиоксидантов могут служить бутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол и d1--токоферол, причем предпочтительно добавлять d1--токоферол. Обычно, количество указанного антиоксиданта составляет от 0,001 до 2,0 весовых частей, и более предпочтительно, от 0,01 до 1,0 весовых частей.

Компонент водной фазы настоящего изобретения содержит ионный полисахарид в определенной концентрации. Кроме этого, ионный полисахарид, применяемый в настоящем изобретении, относится к полисахаридам, сахарная цепь которых содержит, например, карбоксильную группу или сульфатную группу и имеет структуру сахарной цепи, которая ионизируется в водном растворе. Вследствие содержания ионного полисахарида, эмульсионный лосьон настоящего изобретения почти не подвержен изменениям вязкости при воздействии таких внешних стимулов, как тепло или вибрация. Помимо этого, такой компонент служит средством стабилизации эмульсии, предотвращающим разделение фаз. Более того, даже в том случае, когда активный витамин D₃, основное лекарственное средство настоящего изобретения, нестабилен в воде, как это имеет место при использовании 1,24-дигидроксивитамина D₃, наблюдается эффект предотвращения ухудшения стабильности основного лекарственного средства.

Примерами ионного полисахарида могут служить ксантановая смола и/или карагенин, причем ксантановая смола является предпочтительным агентом. Количество таких ионных полисахаридов, предпочтительно, составляет от 0,3 до 1,0 весовых частей от общего веса препарата, и более предпочтительно, от 0,4 до 0,8 весовых частей.

Кроме этого, к компоненту водной фазы может добавляться агент, удерживающий влагу, антисептик, хелатирующий агент, буфер и т.п. Примером агента, удерживающего влагу, может служить пропиленгликоль, глицерин и сорбит, вводимые в количестве от 1 до 20 весовых частей, и предпочтительно, 2-15 весовых частей. Примерами антисептических добавок могут служить такие парабены, как метилпарабен, пропилпарабен и их смеси, хлорбутанол, монотиоглицерин, сорбиновая кислота, сорбат калия и бензиловый спирт, добавляемые в количестве от 0,001 до 10,0 весовых частей, и предпочтительно, от 0,01 до 5,0 весовых частей. Примерами хелатирующих агентов могут служить лимонная кислота, цитрат натрия и эдетат натрия, добавляемые в количествах от 0,001 до 5,0 весовых частей, и, предпочтительно, от 0,01 до 3,0 весовых частей. В качестве буферов могут использоваться вторичный кислый фосфат натрия, первичный кислый фосфат натрия и первичный кислый фосфат калия, добавляемые в весовых соотношениях, требуемых для установления рН компонента водной фазы в интервале 6,5-8,5.

В лосьоне настоящего изобретения весовое соотношение между упомянутыми выше компонентом масляной фазы и компонентом водной фазы (компонент масляной фазы/компонент водной фазы) составляет величину в интервале 15/85-3/97. В случае выхода за пределы указанного интервала, не удается обеспечить упомянутые выше вязкость и стабильность, предпочтительные для применения препарата в качестве лосьона.

Лосьон настоящего изобретения с активным витамином D₃ может также содержать неионогенное поверхностно-активное соединение. Такой неионогенный поверхностно-активный агент состоит из двух или более типов поверхностно-активных веществ. Примеры таких поверхностно-активных добавок настоящего изобретения включают один или более типов поверхностно-активных соединений, выбранных из группы, состоящей из таких поверхностно-активных веществ с низким HLB, как моноолеат сорбита, моностеарат сорбита, сесквиолеат сорбита, триолеат сорбита, моностеарат глицерина, моноолеат глицерина и моносеарат пропиленгликоля, и таких поверхностно-активных веществ, с высоким значением HLB, как сорбитотетраолеат полиоксиэтилена (30, 40 или 60), касторовое масло, отвержденное с помощью полиоксиэтиленового гидрированного касторового масла 60, монолаурат сорбита, монопальмитат сорбита, монолаурат полиоксиэтилен (20) сорбита, монопальмитат полиоксиэтилен (20) сорбита, моностеарат полиоксиэтилен (20) сорбита, моноолеат полиоксиэтилен (20) сорбита, монолаурат полиоксиэтилена (10) и цетиловый эфир полиоксиэтилена (23, 25 или 30). Обычно, поверхностно-активное вещество с низким значением HLB объединяют с поверхностно-активным веществом с высоким значением HLB для регулирования HLB с целью стабилизации эмульсии.

Содержание неионогенного поверхностно-активного вещества настоящего изобретения, предпочтительно, составляет от 1,8 до 5,2 весовых части от общего веса препарата. Кроме того, в данном случае предпочтительно, чтобы весь неионогенный поверхностно-активный агент имел значение HLB, равное 10 или более, и, предпочтительно, 11,0 или более с тем, чтобы упомянутый выше ионный полисахарид смог проявить превентивный эффект в отношении разделения фаз. Более предпочтительно, чтобы общее содержание неионогенного поверхностно-активного соединения составляло от 11,5 до 14,5.

Примерами активного витамина D₃ настоящего изобретения могут служить активный витамин D₃, выбранный из группы, состоящей из 1,24-дигидроксивитамина D₃, 1,25-дигидроксивитамина D₃ и 1-гидроксивитамина D₃. Предпочтительными веществами являются 1,24(R)-дигидроксивитамин D₃ и 1,24(S)-дигидроксивитамин D₃, причем особенно предпочтительным агентом, в силу его превосходной фармакологической активности, является 1,24(R)-дигидроксивитамин D₃. Кроме этого, кристаллическая форма 1,24(R)-дигидроксивитамина D₃ предпочтительна в отношении чистоты и может использоваться, например, его 1 гидратная форма.

Количество активного витамина D₃ настоящего изобретения представляет собой дозировку, являющуюся эффективной для лечения того заболевания кожи, для которого применяется лекарство и, обычно, концентрация этого вещества в лосьоне имеет значение в интервале 0,00005-0,01 весовых частей.

Лосьон настоящего изобретения с активным витамином D₃ производят в соответствии с общепринятыми способами, путем растворения требуемого количества активного витамина D₃ в компоненте масляной фазы в присутствии поверхностно-активного соединения, при нагревании; смешивания полученного раствора с компонентом водной фазы или компонентом водной фазы, не содержащим раствора ионного полисахарида, который нагревают в эмульгирующем устройстве; эмульгирования смеси с образованием однородной эмульсии, или, по мере необходимости, добавления к смеси раствора ионного полисахарида с последующим эмульгированием смеси с образованием однородной эмульсии; и окончательного охлаждения.

Лосьон с активным витамином D₃ настоящего изобретения может использоваться в качестве терапевтического агента для лечения таких заболеваний кожи, как псориаз, пустулезный псориаз, каплевидный псориаз, эритродермальный псориаз, артропатический псориаз, тяжелый псориаз и другие типы псориаза и кератоза. Хотя дозировка препарата может изменяться в зависимости от тяжести заболевания и т. п. , предпочтительно, например, применять на пораженных участках лосьон с концентрацией 1,24-дигидроксивитамина D₃ от 100 до 0,1 мкг/г лосьона, от одного до нескольких раз в день.

Таким образом, предлагается эмульсионный раствор, содержащий активный витамин D₃, имеющий вязкость, которая подходит для нанесения на участки, где есть волосы, обладающий удовлетворительной фармакологической активностью, стабильностью основного лекарственного средства и физической стабильностью, и имеющий низкий уровень раздражающего воздействия на кожу. Кроме этого, следует отметить чрезвычайно высокое значение разработки такого эмульсионного лосьона с активным витамином D₃ для клинической практики.

Примеры

Хотя ниже приводится дополнительное разъяснение настоящего изобретения с помощью примеров его воплощения, следует отметить, что изобретение никоим образом не ограничивается этими примерами. Вначале приведено пояснение, касающееся различных типов методов тестирования, используемых в примерах.

Краткое описание и цели тестирования.

В таблице 1 указано содержание и цели проводимых тестов.

Ниже приведено подробное описание методов испытания, указанных в таблице 1.

Метод испытания 1: Способ тестирования вязкости раствора

Образцом лосьона заполняли стеклянную пробирку с завинчивающейся крышкой (Maruem, 3L), имеющую диаметр 21 мм, диаметр входного отверстия 12 мм и глубину 50 мм, причем заполнение проводили до стеклянной резьбы с целью предотвращения попадания пузырьков воздуха. Испытание проводили в окружающей среде при 25^oС при следующих условиях, соответствующих требованиям, изложенным в разделе "Способ измерения вязкости" Общих методов испытаний Японской фармакопеи.

Метод 2: метод с использованием ротационного вискозиметра.

Условия испытания:

Аппаратура: Одноцилиндровый ротационный вискозиметр DV-II+ (Brookfield).

Ротор: LV4 ротор.

Скорость вращения: 60 об/мин.

Измерение: вязкость измеряли после вращения ротора в течение 3 минут.

Основой оценочного критерия служила вязкость 500-1400 мПас, принятая за оптимальную вязкость (см. Справочный тест 1).

Справочный тест 1: Оценка вязкости лосьона с использованием сенсорных тестов

Способность к прилипанию и легкость нанесения оценивали на ощупь, а сопротивление растеканию оценивали визуально, сравнением коммерчески доступных лосьонов с испытуемыми лосьонами. Следует отметить, что коммерчески доступные лосьоны были помещены, и их использовали из контейнеров, в которых они продавались, тогда как испытуемые лосьоны помещались в полиэтиленовые контейнеры.

В таблице 2 приведены критерии оценки, а полученные результаты, представлены в таблице 3.

Испытательные примеры А-D описаны в табл. 4.

В соответствии с результатами, приведенными в таблице 2, установлено, что оптимальное значение вязкости для эффективного достижения пораженного участка, безопасности применения и легкости обращения при внешнем медикаментозном лечении заболеваний кожи при применении на участках волос и т.п., составляет величину в интервале 500-1400 мПа.с.

Метод испытания 2: Методы тестирования физической стабильности лосьона

2-1. Тест с использованием гравитационной нагрузки

Образец лосьона весом 1 г помещали в пробирку центрифуги и вынимали после центрифугирования в течение 1 часа со скоростью 3750 об/мин. Исследовали внешний вид лосьона и проводили проверку на наличие признаков разделения масляной и водной фаз.

Критерием оценки служило отсутствие признаков разделения фаз и пятен.

2-2. Тест с использованием тепловой нагрузки (тест на нагревание)

Восемь грамм образца лосьона помещали в стеклянную трубку для проб. Трубку закрывали и затем хранили в бане с постоянной температурой 50 или 40^oС. Исследование внешнего вида лосьона и измерение вязкости проводили во времени и лосьон проверяли на предмет наличия признаков разделения между водной и масляной фазами, и изменений вязкости.

Критерием оценки служило отсутствие признаков разделения фаз и пятен.

Метод испытания 3: Лосьон с 1,24-дигидроксивитамином D₃

Метод испытания на химическую стойкость

500 мг лосьона помещали в пробирку центрифуги с последующим добавлением 50 мкл внутреннего стандарта (преднизолон, 100 мкг/мл) и 5 мл дихлорметана, после чего образец центрифугировали в течение 10 минут со скоростью 3000 об/мин и далее охлаждали до 5^oС после встряхивания в течение 10 минут. Нижний дихлорметановый слой удаляли и часть подвергали ЖХВР анализу для определения количества 1,24-дигидроксивитамина D₃. Использовали следующие условия ЖХВР:

Колонка: Intertsil SIL 4,6-250 мм.

Температура колонки: 40^oС.

Элюент: н-гексан/EtOH (89/11).

Скорость потока: 1 мл/мин.

Детектор: УФ 265 нм.

Хотя согласно критерию оценки остаточная норма основного лекарственного компонента в 95% или более обусловливает его стойкость, принимая во внимание ошибку измерения (2%), остаточная норма порядка 93% или более оценивается, как предпочтительная.

Метод испытания 4: Лосьон с 1,24-дигидроксивитамином D₃

Метод испытания фармакологической активности

Клеточно-ростовую ингибиторную активность 1,24-дигидроксивитамина D₃ при испытании на псориазной животной модели оценивали с использованием ODC (орнитин декарбоксилаза) активности в качестве маркера клеточно-ростовой активности. Рост эпидермальной клетки ускоряется в результате обработки кожи, лишенной волосяного покрова мыши ТРА (12-O-тетрадеканоилфорбол-13-ацетатом), с последующим применением лосьона с 1,24-дигидроксивитамином D₃ и измерением ингибирования клеточного роста по ODS активности. Более подробно, 10 нмол ТРА вначале применяли на лишенном волосяного покрова участке мышиной спины размером 33 см² с тем, чтобы ускорить рост эпидермальных клеток. Затем, 50 мг испытуемого образца (лосьон) применяли на тех же участках кожи животных группы, получавшей препарат (на животных контрольной группы лосьон не применяли). Через пять часов кожу на участке применения вырезали и измеряли ODS активность в соответствии со способом, описанным Ciba, К., et al. (Cancer Res. , 44: 1387-1391 (1984)). Соотношение между ODS активностью группы, получавшей препарат, и соответствующим значением в контрольной группе использовали для представления о скорости ингибирования, которую, в свою очередь, применяли в качестве индикатора фармакологической активности лосьона с ,24-дигидроксивитамином D₃.

Критерием оценки служила эквивалентность действию мази Teijin Bonalpha Ointment (мазь с ,24-дигидроксивитамином D₃), которая была ранее выпущена на рынок и применялась клинически. Кроме этого, эквивалентность такого рода описана в испытании биологической эквивалентности в соответствии с руководством Pharmaceutical manufacturing guidelines (Yakugyo Jihosha Publishing).

Испытательный метод 5: Сравнительный метод тестирования кумулятивного раздражающего действия на кожу кроликов.

По 0,05 г препарата примера и сравнительного примера применяли ежедневно в течение 7 дней (обтурирующая аппликация) на участке спинной кожи (6,25 см²) самцов японских белых кроликов, с последующей оценкой кумулятивного раздражения (покраснение) спины, в соответствии с методом оценки по Dray.

Критерии такой оценки представлены в таблице 5. Следует отметить, что препараты с оценкой ниже 1 в результатах, полученных на 7 день, оценивались, как имеющие низкий уровень раздражающего воздействия.

Пример 1

Композиция, приготовленная в Примере 1, описана в таблице 6, в то время, как схема способа получения представлена на фиг.1.

Пояснения к способу приготовления

Указанный выше твердый масляный компонент (компоненты 4-6), жидкий масляный компонент (компонент 7) и неионогенное поверхностно-активное вещество (компоненты 8-10) смешивали друг с другом и нагревали до 75-85^oС с образованием однородного расплава. Раствор 1,24-дигидроксивитамина D₃ (компонент 1) и антиоксиданта (компонент 2) в растворителе (компонент 3) добавляли в указанную выше смесь с последующим нагреванием до однородного растворения (раствор А). Кроме этого, антисептик (компоненты 11 и 12), (стабилизатор (компонент 13), влагоудерживающий агент (компонент 14) и буфер (компоненты 16 и 17) нагревали до 75-85^oС в очищенной воде (компонент 18) с получением однородного раствора (раствор В). Ионный полисахарид (в качестве ионного полисахарида использовали ксантановую смолу (компонент 15)) растворяли в очищенной воде с получением раствора ионного полисахарида (раствор С).

Растворы А, В и С смешивали в вакуумном эмульгаторе (Mizuho) с целью эмульгации и получения однородной первичной эмульсии. Затем ее охлаждали до комнатной температуры с получением белого лосьона (Пример 1).

Кроме этого, номера, указанные для каждого компонента в таблице 2, могут использоваться в последующих примерах и сравнительных примерах вместо названий каждого из них в примере 1. Примеры и сравнительные примеры, описанные в тексте, приготовлены в соответствии с упомянутым выше способом получения (фиг.1) на основе Примера 1.

Примеры 2-10 и сравнительные примеры 1-10

Краткое изложение примеров и сравнительных примеров приведено в таблице 7, а составы композиций раскрыты в таблицах 8-10.

Тесты на физическую и химическую стабильность

Физическую стабильность лосьонов из примеров 1-10 и сравнительных примеров 1-10 определяли с использованием методов испытания 1 и 2, а их химическую стабильность определяли по методике испытаний 3. Критерии оценки представлены в таблице 11, а полученные результаты приведены в таблице 12.

В соответствии с данными таблицы 12, лосьоны примеров 1-10 и сравнительных примеров 9 и 10 были оценены, как применимые, в соответствии с испытаниями на гравитационную и тепловую нагрузку, проведенными для исследования физической стабильности. На основании этих данных было установлено, что физически стабильный лосьон получен в результате синергических эффектов трех таких факторов, как весовое количество высшего спирта, весовое количество ксантановой смолы и величина HLB поверхностно-активного вещества.

Кроме этого, было установлено, что те жидкие косметические композиции, в которых происходит разделение фаз, демонстрируют очень плохую химическую стойкость 1,24-дигидроксивитамина D₃ и не способны сохранять стабильность в случае их применения в качестве фармацевтических препаратов.

Более того, лосьоны сравнительных примеров 9 и 10 оказались неудовлетворительными в описанном ниже тесте на раздражающее воздействие на кожу.

Тест на фармакологическую активность лосьона примера 1

Результаты тестов на фармакологическую активность лосьона из примера 1 (хотя содержание 1,24-дигидроксивитамина D₃ в таком лосьоне составило 2 мкг/г) и мази Bonalpha от Teijin (мазь с активным 1,24-дигидроксивитамином D₃, содержащимся в мази в количестве 2 мкг/г), проведенных в соответствии с методом испытания 4, представлены в таблице 13.

Согласно результатам таблицы 13, лосьон настоящего изобретения (пример 1) демонстрирует фармакологическую активность 1,24-дигидроксивитамина D₃ на животных моделях псориаза, равную активности мази.

Тест на раздражающее действие лосьона примера 1 на кожу

Результаты сравнительного испытания кумулятивного раздражающего воздействия на кожу кроликов лосьона из примера 1 (хотя он содержит 2 мкг/г 1,24-дигидроксивитамина D₃) и лосьона из сравнительного примера 9 (содержащего ,24-дигидроксивитамин D₃ в количестве 2 мкг/г), проведенного в соответствии с методикой испытания 5, представлены на фиг.2.

Пример 11.

Композиция, полученная как Пример 11, представлена в таблице 14, при этом способ получения такой композиции в общем виде показан на фиг.1.

Объяснение способа получения

Указанный выше твердый компонент (компоненты 4-6), жидкий масляный компонент (компонент 7) и неионное ПАВ (компоненты 8-10) смешивали и нагревали до 75-85^oС с образованием однородного расплава. Раствор 1,25-дигидроксивитамина D₃ (компонент 1) и антиоксиданта (компонент 2) в растворителе (компонент 3) добавляли к полученной смеси с последующим нагреванием до однородного растворения (Раствор А). С другой стороны, антисептик (компоненты 11-12), стабилизатор (компонент 13), агент удерживания влаги (компонент 14) и буферный агент (компоненты 16 и 17) нагревали до 75-85^oС в дистиллированной воде (компонент 18) с получением однородного раствора (Раствор В). Ионный полисахарид (ксантановую смолу использовали в качестве ионного полисахарида (компонент 15)) растворяли в дистиллированной воде с получением раствора ионного полисахарида (Раствор С).

Растворы А, В и С смешивали в вакуумном аппарате для эмульгирования (Mizuho) для эмульгирования и получения однородной первичной эмульсии. Затем ее охлаждали до комнатной температуры с получением белого лосьона (Пример 11).

Пример 12

Композиция, полученная как Пример 12, представлена в таблице 15, при этом способ получения такой композиции в общем виде показан на фиг.1.

Объяснение способа получения

Указанный выше твердый компонент (компоненты 4-6), жидкий масляный компонент (компонент 7) и неионное ПАВ (компоненты 8-10) смешивали и нагревали до 75-85^oС с образованием однородного расплава. Раствор 1-дигидроксивитамина D₃ (компонент 1) и антиоксиданта (компонент 2) в растворителе (компонент 3) добавляли к полученной смеси с последующим нагреванием до однородного растворения (Раствор А). С другой стороны, антисептик (компоненты 11-12), стабилизатор (компонент 13), агент удерживания влаги (компонент 14) и буферный агент (компоненты 16 и 17) нагревали до 75-85^oС в дистиллированной воде (компонент 18) с получением однородного раствора (Раствор В). Ионный полисахарид (ксантановую смолу использовали в качестве ионного полисахарида (компонент 15)) растворяли в дистиллированной воде с получением раствора ионного полисахарида (Раствор С).

Растворы А, В и С смешивали в вакуумном аппарате для эмульгирования (Mizuho) для эмульгирования и получения однородной первичной эмульсии. Затем ее охлаждали до комнатной температуры с получением белого лосьона (Пример 12).