мазь нистатина на полимерной основе, обладающая противогрибковым действием

Формула изобретения

Мазь нистатина, обладающая противогрибковым действием, отличающаяся тем, что в качестве вспомогательных веществ содержит пропиленгликоль и полиэтиленоксид 1500 при следующем соотношении компонентов, г:

Нистатин - 2,0 - 2,4 (9 - 11 млн ЕД)

Пропиленгликоль - 25 - 35

Полиэтиленоксид 1500 - 60 - 70

Описание изобретения к патенту

Среди противогрибковых средств для лечения поверхностных микозов особое место занимает нистатин благодаря своей эффективности. Особо эффективным является применение нистатина при поверхностных кандидозах. По данным литературы минимальная ингибирующая концентрация (МИК) нистатина в отношении Candida albicans составляет 4-8 мкг/мл. Для клотримазола эта величина составляет 1-10 мкг/мл, кетоконазола (низорал) 0,02-80 мкг/мл, тербинафина гидрохлорида (ламизил) 0,1-100 мкг/мл, циклопироксоламина (батрафен) 1-4 мкг/мл. В то же время противогрибковая активность синтетических препаратов - клотримазола, миконазола и тербинафина гидрохлорида резко снижается в присутствии белков и составляет 10-500 мкг/мл (Падейская Е.Н., Бакланова О.В. Синтетические химиотерапевтические препараты для лечения микозов (обзор) // Хим.-фармац. журнал. - 1993. - Т.27, 4. - С.12-23).

В связи с тем, что при лечении поверхностных микозов неизбежен контакт молекул лекарственного вещества с белками, эффективность применения синтетических препаратов существенно снижается. Поэтому применение нистатина в виде мази остается актуальным для лечения грибковых заболеваний кожи и слизистых оболочек.

Однако в настоящее время на Российском рынке лекарственных средств имеется только мазь нистатина на вазелин-ланолиновой основе, которая может быть принята за прототип.

Основа этой мази не обеспечивает достаточного высвобождения препарата и необходимую терапевтическую эффективность. Кроме того, при получении мази на гидрофобной основе трудно добиваться оптимального размера частиц. В связи с чем актуальным представляется проведение исследований по повышению качества и эффективности мази нистатина.

Аналогами предложенной мази являются импортные препараты: Цинкундан мазь (Галичфарм), Кандид крем 1% (Гленмарк Фармасьютикалс, Индия), Батрафен 1% крем (Руссель Индия, ЛТД) и Ламизил 1% крем (Новартис Фарма, Швейцария).

Следует отметить, что мазь цинкундан отличается низкой эффективностью, а остальные аналоги имеют высокую стоимость и могут быть недоступны многим больным.

Для изучения возможности увеличения противогрибковой активности мази нистатина была приготовлена серия мазей различного состава (табл.1). В качестве основообразующих компонентов были использованы полиэтиленоксид 1500, а также гель полиэтиленоксида 1500 и гель ареспола 2%. Для улучшения высвобождения нистатина и уменьшения размера частиц возможным является использование полярных растворителей, в которых растворяется нистатин. К числу таких растворителей относятся димексид, пропиленгликоль и диметилформамид (United States Pharmacopeia 24. The National Formulary 19. - United States Pharmacopoeia convention. Inc., 1999. -2569 p.).

Однако диметилформамид не применяется в фармации вследствие токсичности, а димексид обладает свойствами окислителя, что делает невозможным его применение в составе данной мази вследствие нестабильности нистатина. В связи с этим в качестве растворителя был выбран пропиленгликоль, который широко применяется в технологии мягких лекарственных форм.

Следующим этапом исследований было сравнительное изучение противогрибковой активности приготовленных мазей. Изучение проводили методом диффузии в агар в соответствии с требованиями Фармакологического государственного комитета (Методические указания по изучению противогрибковой активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. -М.: ЗАО "ИИА Ремедиум", 2000 - С. 293-296).

Для этого использовали культуру Candida albicans, выделенную от больного. Для проведения испытания использовали по 50 мг мазей. Посевная доза составляла 50 мкл рабочей взвеси, соответствующей 10 стандарту мутности по ОСО 42-28-86-86. Чашки инкубировали при 25^oС в течение 3 суток. По истечении указанного времени измеряли диаметры зон задержки роста. В качестве питательной среды использовали агар Сабуро (среда 2; ГФ XI). Параллельно, в этих же условиях исследовали противогрибковую активность известных препаратов - Цинкундан мазь (Галичфарм), Кандид крем 1% (Гленмарк Фармасьютикалс, Индия), Батрафен 1% крем (Руссель Индия, ЛТД) и Ламизил 1% крем (Новартис Фарма, Швейцария). Каждый опыт проводили в 6 кратной повторности. В табл. 2 приведены статистически обработанные результаты исследований.

Оценку достоверности полученных результатов проводили с использованием t-критерия Стьюдента (Методические указания по изучению противогрибковой активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. -М.: ЗАО "ИИА Ремедиум", 2000-С.293-296; Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Изд. 3-е, испр. - Минск: Вышэйш. школа, 1973. - 320 с.).

При этом установлено, что все мази на основе полиэтиленоксида и пропиленгликоля по уровню противогрибкового действия выше, чем мазь, выпускаемая в настоящее время (композиция 1), т.к. р<0,05. Композиции 4-8 по степени противогрибкового действия превышают прототип с достоверностью р<0,01. Следует отметить, что композиции 4-8 по своей активности также превышают другие противогрибковые средства для местного применения. Низкая эффективность таких препаратов как ламизил, батрафен и клотримазол может быть объяснена тем, что данные препараты изготовлены на эмульсионных основах. В тоже время известно, что присутствие эмульгаторов ингибирует антимикробное действие. В связи с чем эмульгаторы находят применение при испытаниях на микробиологическую чистоту лекарственных средств, обладающих антимикробным действием (ГФ XI).

Для подтверждения полученных результатов было проведено определение МИК изучаемых препаратов методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде, в качестве которой использовали среду 2 по ГФ XI для определения стерильности (среда Сабуро без агара). При этом установлено, что величина МИК для субстанции нистатина по отношению к использованному штамму составила 6,5 мкг/мл, что соответствует данным литературы (Шенин Ю.Д., Белахов В. В., Аравийский Р.А. Нистатин: методы получения, поиск производных и перспективы медицинского применения (обзор)//Хим. фармац. журн.-1993. -Т.27, 2. -С.14-21).

Однако для мази на основе полиэтиленоксида (композиция 6) величина МИК составила 12,5 мкг/мл, для клотримазола в составе мази МИК составляет 25,0 мкг/мл, для циклопироксоламина и тербинафина гидрохлорида 75,5 мкг/мл.

Таким образом, установлено, что мазь нистатина на полиэтиленоксидной основе обладает выраженным антимикробным действием в отношении Candida albicans, превышающим действие других зарегистрированных препаратов.

Полученные композиции на основе полиэтиленоксида и пропиленгликоля сопоставимы по эффективности, но отличаются по реологическим свойствам. Мазь, содержащая 50% пропиленгликоля, представляет собой густую вязкую жидкость, мазь с 15% пропиленгликоля имеет очень плотную консистенцию. В связи с этим, в качестве оптимальной можно считать мазь состава, г:

Полиэтиленоксид 1500 - 60-70

Пропиленгликоль - 25-35

Нистатин - 2,20

Для получения мази в обогреваемый смеситель помещали рассчитанное количество нистатина, добавляли пропиленгликоль и растворяли при температуре 60^oС в течение 20 мин. При этом основная часть нистатина растворяется, однако незначительное количество препарата остается нерастворенным и образует тонкую суспензию. Затем в смеситель помещают полиэтиленоксид и продолжают нагревание до его полного растворения, после чего нагревание прекращают и охлаждают мазь до температуры 24-25^oС при перемешивании. Раствор при этом начинает структурироваться и переходит в состояние густой вязкой жидкости. В этом состоянии мазь может подаваться на фасовку в тубы или банки, еще через 3-4 часа мазь окончательно структурируется и приобретает консистенцию упругопластичной массы светло-коричневого цвета. Размер частиц нистатина в мази составляет 20-30 мкм. При дальнейшем хранении при комнатной температуре мазь не расслаивается.