стабильный раствор ретинола пальмитата и способ лечения заболеваний кожи

Формула изобретения

1. Стабильный раствор ретинола пальмитата, растворенный в рафинированном масле, содержащий антиоксиданты бутилокситолуол и бутилоксианизол, отличающийся тем, что ретинола пальмитат растворен в дезодорированном масле с пониженным содержанием ненасыщенных жирных кислот и ограниченным содержанием перекисей и кислот, при этом кислотное число составляет от 0,1 до 0,5 мг КОН/г, перекисное - в пределах от 5 до 10 ммоль/кг, и укупорен во флаконы, заполненные инертным газом.

2. Стабильный раствор ретинола пальмитата по п.1, отличающийся тем, что он растворен в кукурузном, соевом или рапсовом масле.

3. Стабильный раствор ретинола пальмитата по п.1, отличающийся тем, что он предназначен для лечения заболеваний кожи: фолликулярный кератоз, врожденная пахионихия, себорея.

4. Стабильный раствор ретинола пальмитата по п.1, отличающийся тем, что он предназначен для лечения заболеваний кожи, связанных с нарушением процессов ороговения, салоотделения и целости кожи в дозе 300000 МЕ/сут.

5. Стабильный раствор ретинола пальмитата по п.1, отличающийся тем, что он в дозе 300000 МЕ/сут предназначен как стимулятор кроветворения при химиотерапии онкологических больных.

6. Способ лечения заболеваний кожи путем перорального введения ретинола пальмитата, отличающийся тем, что при лечении заболеваний кожи используют стабильный раствор ретинола пальмитата по п.1, при этом препарат вводят в соответствии с биоритмом деления эпителиальных клеток поздно вечером и/или рано утром в дозе от 100000 до 300000 МЕ в день в течение 4-12 недель.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается создания стабильного раствора ретинола пальмитата, а также использование его в клинической практике при лечении заболеваний кожи и в онкологии для снижения риска побочных эффектов при лечении онкологических больных цитостатиками.

Ретинола пальмитат - биологически активная форма витамина А. В виде ретинола пальмитата витамин А всасывается из кишечника и депонируется в печени.

Ретинола пальмитат применяют в лечебно-профилактических целях. Препарат эффективен при кожных, глазных болезнях, хронических заболеваниях пищеварительного тракта, легких, является естественным иммуностимулятором и средством защиты костного мозга и других органов кроветворения.

Ретинола пальмитат представляет собой однородную застывающую массу светло-желтого цвета с температурой плавления 26-28^oC. Активность 1 мг соответствует 1817 ME витамина А. Характерной особенностью препарата, затрудняющей создание устойчивых лекарственных форм на его основе, является чувствительность к воздействию света и кислорода воздуха.

Защитить препарат от воздействия света нетрудно, достаточно упаковать раствор во флаконы темного стекла и поместить их в картонную пачку. Гораздо сложнее уберечь ретинола пальмитат от разрушительного действия кислорода воздуха.

Чтобы предотвратить окисление, ретинола пальмитат растворяют в растительных маслах (соевом, кукурузном), содержащих более низкое по сравнению с другими маслами (подсолнечное, оливковое) количество ненасыщенных жирных кислот, так как последние легко подвергаются окислению сами и вовлекают в этот процесс ретинола пальмитат. С целью дополнительной стабилизации к раствору ретинола пальмитата в масле добавляют антиоксиданты: -токоферол, дигидропиридин и его аналоги [1], этоксихин (сантохин) [2].

Однако -токоферол дорог, к тому же это очень неустойчивое соединение, с которым трудно работать в производстве. Этоксихин вреден для здоровья и в нашей стране используется только для животноводства. Токсичность дигидропиридина и его аналогов недостаточно исследована. Хотя авторы патента констатируют, что в используемых количествах аналог дигидропиридина нетоксичен, тем не менее имеющихся данных недостаточно для того, чтобы указанное соединение можно было применять в медицине.

Известна стабилизация раствора ретинола пальмитата в растительном масле.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является раствор ретинола пальмитата в растительном масле 5,5%, содержащий дополнительно смесь антиоксидантов бутилокситолуола (БОТ) и бутилоксианизола (БОА) (ФС 42-2364-85).

Этот препарат содержит ретинола пальмитат, БОТ в количестве 1 г на 1 кг ретинола пальмитата и БОА в количестве 0,5 г на 1кг ретинола пальмитата. Ретинола пальмитат растворен в рафинированном соевом или кукурузном масле.

Создание устойчивого препарата - это одновременно и создание эффективного и безопасного препарата. Когда какое-то количество витамина А разрушается, содержание его в препарате делается меньше, и от этого препарат становится менее эффективным. С другой стороны, продукты распада ретинола пальмитата токсичны и могут вызывать аллергию.

К недостаткам известного препарата следует отнести низкое качество масла, взятого для растворения ретинола пальмитата, в то время как качество масла имеет существенное значение для сохранности препарата. В известном препарате кислотное число раствора ретинола пальмитата в масле не более 1,0 мг КОН/г; перекисное число не определялось. Между тем проблема стабильности субстанции не может быть решена удовлетворительно, если не ограничить количество кислот и перекисей в масле (таблицы 1 и 2). Кроме того, флаконы с раствором закрывают в условиях свободного доступа воздуха, а не в токе инертного газа.

Для того, чтобы получить известный препарат, ретинола пальмитат растворяют в соевом или кукурузном масле и не используют других масел. Это ведет к сужению сырьевой базы, что делает производство препарата менее выгодным экономически.

Известен способ применения раствора ретинола пальмитата в масле (Инструкция по медицинскому применению от 31 октября 1996 г.).

Раствор ретинола пальмитата в растительном масле применяется для профилактики авитаминозов и лечения некоторых болезней кожи, глаз, желудочно-кишечного тракта и других органов. Способ применения следующий: препарат принимают внутрь после еды, высшая суточная доза 100000 ME [3].

Известный способ применения не удовлетворяет современным требованиям клинической фармакологии по трем пунктам.

Во-первых, ретинола пальмитат с успехом применяется в терапии некоторых кожных заболеваний, для лечения которых витамин А ранее не использовался. К таким заболеваниям относятся фолликулярный кератоз, врожденная пахионихия, себорея. В лечении этих заболеваний ретинола пальмитат оказался эффективен, а в некоторых случаях незаменим. В упомянутой выше инструкции по применению это не учитывается, спектр кожных заболеваний, при которых применим раствор ретинола пальмитата сужен.

Во-вторых, известный способ применения не учитывает механизма действия ретинола пальмитата; в частности, он не согласуется с биоритмом деления эпителиальных клеток и их дифференцировки.

Выявлен только один литературный источник, в котором препарат для наружного применения, содержащий ретинола пальмитат, рекомендуется использовать вечером, но это связано не с механизмом действия витамина А, а с применением параллельно другого состава, который необходимо использовать утром [4].

В-третьих, известный способ применения не принимает во внимание тот факт, что в больших дозах (300000 ME в сутки для взрослых) витамин А проявляет ранее не известные лечебные свойства. Другими словами, в малых дозах (до 100000 МЕ/сут) ретинола пальмитат действует иначе, чем в больших.

Витамин А и его производные являются единственными в настоящее время препаратами, позволяющими в той или иной степени контролировать болезни кожи, связанные с нарушением процессов ороговения, салоотделения и целости кожи. Их применение основано на нормализирующем влиянии на кератинизацию и эпителизацию, а также на данных о том, что у некоторых больных наряду с патологией ороговения обнаруживается снижение уровня витамина А в плазме крови или клеточного ретинолсвязывающего белка.

Однако, как за рубежом, так и в отечественной практике, для лечения больных с наследственной патологией ороговения применяется главным образом тигазон [5]. Тигазон эффективен в лечении многих дерматозов, хорошо сочетается с антибактериальными средствами, назначаемыми наружно и внутрь, а также с лечением ультрафиолетовым облучением. В то же время, давая положительную оценку тигазону, нельзя забывать, что это очень токсичный препарат, не все побочные эффекты которого пока известны. Побочные эффекты: гепатотоксичность, эмбриотоксичность, тератогенность. Особенно опасно использование тигазона у детей, которым препарат должен назначаться лишь в случае тяжелого течения и неэффективности других препаратов. Вследствие высокой опасности тератогенного эффекта рекомендуется воздерживаться от беременности как минимум три года. При лечении тигазоном обязательно рентгенологическое обследование костной системы, а у маленьких детей и оценка показателей развития.

Новое производное тигазона - ацитретин вызывает меньше побочных реакций, но и этот ретиноид также достаточно токсичен [6].

Лечение масляным раствором ретинола пальмитата в больших (300000 МЕ/сут) дозах приводит к тому же результату, что и лечение тигазоном, но ретинола пальмитат - естественное для организма вещество. В организме к нему эволюционно выработаны транспортные белки, клеточные рецепторы и метаболические пути. Поэтому ретинола пальмитат обладает низкой хронической токсичностью, в организме он легко метаболизирует или утилизируется.

Известные схемы химиотерапевтического лечения онкологических больных не принимают во внимание тот факт, что ретинола пальмитат обладает способностью снижать риск развития побочных эффектов.

Эффективность комбинированной химиотерапии, являющейся основным методом лечения больных диссеминированными (распространенными) формами злокачественных новообразований, в значительной степени зависит от интенсивности ее проведения - введения расчетных доз цитостатиков в необходимом ритме и соблюдении оптимальных временных интервалов между циклами. Одним из главных препятствий на пути оптимизации химиотерапии оказывается миелосупрессия - угнетение кроветворения в красном костном мозге, сопровождающаяся лейкопенией (уменьшение количества лейкоцитов в крови). В результате приходится прерывать начатые курсы лечения, снижать дозы противоопухолевых препаратов и ожидать восстановления гемопоэза до начала повторных курсов. В связи с вышеизложенным использование ретинола пальмитата в качестве протектора и стимулятора лейкопоэза представляется весьма перспективным. Ретинола пальмитат не стимулирует рост эпителиальноклеточных новообразований и не взаимодействует с цитостатиками, и в то же время оказывает определенное противоопухолевое действие и протекторное влияние в отношении ряда вредных факторов (например, канцерогенов). Тем не менее, ретинола пальмитат не применяется в качестве лекарственного средства, способного защищать органы системы крови от повреждающего действия цитостатиков [7].

Известна попытка использовать ретинола ацетат у больных раком кишечника в дозах до 100000 МЕ/сут. Однако, получить иммуностимулирующий эффект в данном случае не удалось [8].

Задачей изобретения является создание стабильного раствора ретинола пальмитата в растительном масле, применение этого препарата для лечения тяжелых заболеваний кожи, основанное на знании механизма действия ретинола пальмитата, расширение его показаний как стимулятора и протектора лейкопоэза при химиотерапии злокачественных опухолей.

Сущность изобретения состоит в том, что лекарственное средство, содержащее ретинола пальмитат и смесь антиоксидантов БОТ и БОА, растворенных в растительном рафинированном дезодорированном масле (кукурузном, соевом или рапсовом) с пониженным содержанием ненасыщенных жирных кислот и ограниченным содержанием перекисей и кислот (кислотное число от 0,1 до 0,5 мг КОН/г; перекисное - в пределах от 5 до 10 ммоль/кг) для лучшей защиты от кислорода воздуха укупоривают во флаконы, заполненные инертным газом.

Согласно изобретению препарат успешно применяют для лечения тяжелых заболеваний кожи, для лечения которых раствор ретинола пальмитата не использовали ранее: себорея, врожденная пахионихия, фолликулярный кератоз.

Согласно изобретению стабильный раствор ретинола пальмитата вводят перорально в соответствии с биоритмом деления эпителиальных клеток поздно вечером и/или рано утром в дозах от 100000 до 300000 ME в день в течение 4-12 недель.

Согласно изобретению стабильный раствор ретинола пальмитата в лечении кожных заболеваний, связанных с нарушением процессов ороговения, салоотделения и целости кожи в больших дозах (300000 МЕ/сут) гораздо эффективнее, чем в малых (до 100000 МЕ/сут).

Согласно изобретению для снижения риска побочных эффектов при химиотерапии онкологических больных раствор ретинола пальмитата в масле вводят перорально из расчета 4300 ME на 1 кг веса больного, но не более 300000 ME в сутки; курс введения начинают за 3-5 дней до начала цитостатической терапии и заканчивают через 10-15 дней после ее отмены.

Изобретение иллюстрируется следующими исследованиями.

Исследования, подтверждающие, что устойчивость препарата в значительной степени повышается, если кислотное число раствора ретинола пальмитата в масле составляет от 0,1 до 0,5 мг КОН/г, а перекисное находится в пределах от 5 до 10 ммоль/кг.

В медицинской и фармацевтической практике концентрацию витамина А выражают в международных единицах (ME). 1 мг ретинола пальмитата соответствует 1817 ME. В дальнейшем будем использовать именно эту единицу измерения.

Таблица 1 демонстрирует стабильность раствора ретинола пальмитата в соевом масле, содержащего 100000 МЕ/мл (приблизительно 5,5% раствор). Для опыта использовали образцы соевого масла с различными кислотными и перекисными числами. Исследование проводили в условиях свободной аэрации воздуха при температуре 60^oC.

Качество различных образцов соевого масла отражено в таблице 2.

Результаты исследования (таблица 1) показывают, что в образцах соевого масла удовлетворительного качества (образцы 1 и 2) содержание ретинола пальмитата снижается медленно и к концу срока хранения остается в пределах, удовлетворяющим требованиям ФС 42-2364-85, хотя и приближается к нижней границе нормы. В образцах соевого масла низкого качества содержание ретинола пальмитата падает быстро и к концу срока хранения количество его опускается значительно ниже требуемого, указанного в вышеупомянутой фармстатье (ФС 42-2364-85).

Таким образом, устойчивость препарата зависит от качества взятого для растворения ретинола пальмитата растительного масла, т.е. кислотное и перекисное число последнего должны быть от 0,1 до 0,5 мг КОН/г и от 5 до 10 ммоль/кг соответственно.

Характер разрушения ретинола пальмитата представлен кривыми 1-4 (чертеж). Указанный кривые ясно показывают, что окисление субстанции начинается не сразу, имеется определенный период индукции, в течение которого содержание ретинола пальмитата в растворе остается постоянным. Однако, если разрушение ретинола пальмитата началось, то оно идет с нарастающей скоростью, лавинообразно. Для того чтобы обеспечить стабильность препарата, необходимо насколько возможно продлить период индукции, задержать процесс окисления.

Флаконы с раствором ретинола пальмитата укупоривают в токе инертного газа и таким образом ограничивают контакт препарата с кислородом воздуха. В качестве инертного газа предпочтительнее использовать азот, так как плотность его близка к плотности воздуха, и диффузия через пробку и крышку флакона происходит медленно.

Таблица 3 показывает, насколько хранение во флаконах, закрытых в токе азота, обеспечивает лучшую сохранность препарата. Исследование проводили в условиях ускоренного старения, флаконы с препаратом хранили при температуре 60^oC.

Кроме того, очень важно вскрытый флакон, в котором раствор ретинола пальмитата не защищен от кислорода воздуха "подушкой" из инертного газа, не хранить долго, чтобы избежать быстрого, лавинообразного разрушения субстанции. При этом рекомендуется вскрытый флакон хранить не более 14 дней с момента вскрытия.

Исследования последних лет показали, что рапсовое масло, соответствующим образом очищенное, также подходит для растворения ретинола пальмитата.

Препарат удовлетворяет требованиям НТД в течение всего срока хранения (таблица 4).

Возможность использования рапсового масла для получения препарата расширяет сырьевую базу и делает производство более выгодным экономически.

Исследования показали, что препарат может быть эффективен в терапии таких заболеваний кожи, для лечения которых раствор ретинола пальмитата ранее не использовали: фолликулярные кератозы, врожденная пахионихия, себорея.

Фолликулярные кератозы - собирательное понятие, включающее несколько нозологических форм, характеризующихся нарушением ороговения в виде гиперкератотических папул в устьях волосяных фолликулов. Традиционный подход к лечению всех форм приблизительно одинаковый - назначение витаминов, питательных кремов, 1-2% салициловой мази, солевых ванн, ультрафиолетового облучения. Под наблюдением находилось 24 больных фолликулярным кератозом - 18 мужчин и 6 женщин в возрасте от 6 до 35 лет. 19 больных ранее получали лечение различными витаминами, включая витамин А (ретинола ацетат) в дозах до 33000 ME в сутки и наружные смягчающие средства (косметические кремы, салициловая мазь). При этом значительного улучшения не наблюдалось. У всех больных имелись множественные фолликулярные папулы, располагавшиеся на лице, груди, спине и конечностях. Ретинола пальмитат в качестве монотерапии назначали из расчета 5000 ME на 1 кг массы тела в сутки у детей, у взрослых - 200000- 300000 ME в сутки. Детям препарат назначали равными дозами утром после завтрака и на ночь, взрослым - только на ночь. Лечение проводилось амбулаторно. Эффективность терапии оценивали по динамике изменений клинических признаков, регистрируемой один раз в неделю.

Улучшение наступало к концу второй недели лечения - уменьшался гиперкератоз, папулы становились более плоскими, через 3-4 недели наблюдалось значительное улучшение. По окончании курса лечения назначали мази с витамином А, как поддерживающую терапию.

Как видно из таблицы 5, положительный эффект достигнут у всех больных, из них у 12,5% - результат был не лучше, чем при проведении традиционной терапии, у 87,5% - значительное улучшение.

Пример 1.

Больной Ц.А., 11 лет. Диагноз: фолликулярный кератоз. С 4-летнего возраста страдает кожным заболеванием, обострение весной и осенью, полное разрешение высыпаний летом на море. Ранее проводимое лечение - косметические средства с витамином А, гомеопатические препараты, эссенциале-форте без значительного улучшения. При осмотре на бедрах, голенях, плечах, коленях и локтях резкая сухость кожи, на фоне которой располагаются фолликулярные папулы розово-красного цвета с роговым шипиком на поверхности, местами экскориированные. Назначен ретинола пальмитат в дозе 200000 ME, наружно - смягчающие косметические кремы. К 4-й неделе приема препарата остались буроватые пятна на месте высыпаний, папулы разрешились.

Врожденная пахионихия относится к редким наследственным нарушениям ороговения. Для заболевания характерны утолщение ногтевых пластинок с подногтевым гиперкератозом, ладонно-подошвенная кератодермия, с образованием пузырей на подошвах, фолликулярные папулы с явлениями гиперкератоза, диффузное шелушение на голенях, лейкоплакия на слизистых оболочках полости рта, носа, гортани. Нередки случаи злокачественного перерождения очагов лейкоплакии на втором десятилетии жизни. Эффективных методов лечения заболевания не разработано. Под наблюдением находилось двое детей и один взрослый с врожденной пахионихией в возрасте 5, 7 и 19 лет, все трое - мужского пола. Ретинола пальмитат в дозе 5000 ME на 1 кг массы тела назначали всем больным на длительное время - 3-5 месяцев, учитывая медленный рост ногтей. Оценка результатов и методика лечения такие же, как и при фолликулярных кератозах. У всех больных достигнут благоприятный результат - к концу первого месяца уменьшалось ороговение ладоней и подошв, прекращалось появление пузырей, папулы становились бледнее и более плоскими. Через два месяца отмечался рост здоровых ногтевых пластинок в проксимальной части, исчезли у двух и значительно регрессировали у одного больного высыпания на слизистых оболочках, на местах кератотических папул осталась точечная вторичная пигментация. Через три месяца сохранялась тенденция роста непораженных ногтей. У одного больного через пять месяцев достигнута полная ремиссия. Другие больные, прекратившие лечение через три месяца, через несколько месяцев после прекращения лечения отмечали ухудшение состояния ногтей, но других признаков заболевания не возникло.

Пример 2.

Больной Ш. И. , 5 лет. Диагноз: врожденная пахионихия. Страдает кожным заболеванием с 6-месячного возраста, когда отмечено возникновение пузырей на подошвах, шелушение ладоней и подошв, высыпания на ягодицах, бедрах, плечах и рост утолщенных ногтей на руках и ногах. К трем годам появились изменения слизистой оболочки полости рта. Лечение различными общеукрепляющими средствами, витаминами, наружно - ранозаживляющими и смягчающими мазями успеха не дало. При осмотре у ребенка имеете гиперкератоз ладоней и подошв, гипергидроз, мацерация кожи межпальцевых складок, утолщение всех ногтевых пластинок и подногтевой гиперкератоз, более выраженные в дистальных отделах. Фолликулярные папулы буровато-красного цвета с роговыми шипиками на поверхности располагаются на ягодицах и задней поверхности бедер. Поражение слизистой оболочки полости рта и в углах рта в виде лейкоплакии. Назначен ретинола пальмитат в дозе 100000 ME один раз в день на ночь. Лечение проводилось в течение трех месяцев. За время лечения улучшилось состояние ногтей - осталась измененной только их дистальная часть, сохранилось легкое шелушение ладоней, исчезли фолликулярные папулы (на их месте мелкие участки вторичной пигментации), полностью разрешились высыпания на слизистой оболочке. С нашей точки зрения, в полученном результате наиболее важны изменения в полости рта, поскольку они при врожденной пахионихии расцениваются как предраковые и представляют реальную угрозу жизни пациентов.

Себорея - заболевание кожи, в основе которого лежит нарушение секреторной функции сальных желез, выражающееся в повышенном выделении качественно измененного кожного сала. Заболевание характеризуется тенденцией к хроническому течению, рецидивами. Наиболее часто его регистрируют в периоде полового созревания. Поражаются волосистая часть головы, лицо, грудь и спина. Обычно применяемая терапия - обшеукрепляющие средства, микроэлементы (мышьяк, фосфор, железо, цинк), витамины, антибиотики, наружно - синестроловый крем, спиртовые растворы с левомицетином, эфиром, борной кислотой, серой, дегтем, лечебные шампуни.

Под наблюдением находилось 18 больных себореей, 9 мужчин и 9 женщин. Возраст больных - от 16 до 40 лет. 10 больных имели изолированное поражение волосистой части головы в виде избыточной сальности и выпадения волос, шелушения кожи (перхоти), покраснения, зуда, 8 - одновременно высыпания на коже лица (эритематозно-сквамозные очаги на щеках и лбу, покрытые желтоватыми сальными чешуйками), у двух из них подобные очаги поражения кожи были на груди. Ретинола пальмитат назначали в суточной дозе 200000-300000 ME в зависимости от веса больных один раз в день на ночь. После 2 недель лечения улучшение наблюдалось у всех больных, к концу месяца достигался полный эффект. Различий в зависимости от пола больных не отмечалось. Результаты лечения представлены в таблице 6.

Указанный способ лечения помимо высокой эффективности выгодно отличается от других тем, что можно не прибегать к наружному лечению. Это обстоятельство особенно важно при поражении волосистой части головы, когда применение мазей или растворов нередко придает волосам неопрятный вид и/или неприятный запах.

Пример 3.

Больной И.А., 28 лет. Диагноз: себорея. Обратился с жалобами на перхоть, повышенную жирность и выпадение волос, зуд, высыпания на лице и груди с 12-летнего возраста. Применение лечебных шампуней, гомеопатических препаратов, витаминов и кортикостероидных мазей оказалось неэффективным. При осмотре: кожа лица сальная, в области подбородка и щек очаги эритемы, на фоне которой имеются чешуйки желтоватого цвета. Волосы сальные, истончены, разрежены, кожа волосистой части головы шелушится. Назначен ретинола пальмитат в дозе 200000 ME, наружно - протирание лица безалкогольным тоником. Улучшение в виде уменьшения эритемы и шелушения отмечалось через 2 недели приема препарата. К 4-й неделе приема препарата высыпания разрешились, сальность кожи снизилась, уменьшилось выпадение волос.

Исследования, подтверждающие, что оптимальное время приема препарата - поздно вечером или рано утром.

В последние годы внимание ученых привлекает вопрос о механизме действия витамина А. Хотя наши представления об этом далеки от полноты и совершенства, некоторые теоретические положения можно считать доказанными и с успехом использовать в медицинской практике.

Так, изучение суточного ритма пролиферативной активности (интенсивность деления) клеток эпидермиса под влиянием Раствора ретинола пальмитата в масле позволило установить наиболее оптимальное время приема препарата.

Пример 4.

Изучение суточного ритма пролиферативной активности эпидермиса проведено на крысах-самцах линии Вистар массой 120 10 г. Животных умерщвляли каждый час, брали кожу спины и подсчитывали количество делящихся (метафаза) клеток. Результаты исследования суммированы в таблице 7. Очевидно, что пик пролиферативной активности приходится на ночные часы: клетки начинают делиться после полуночи и завершают этот процесс к утру.

Фармакокинетические исследования, поставленные на крысах-самцах линии Вистар массой 120 10 г, показали, что при однократном пероральном введении масляного раствора ретинола пальмитата достоверное повышение уровня и достижение максимальной концентрации ретинола пальмитата в крови обнаруживается через 1 час. Через 2 и 4 часа концентрация ретинола пальмитата снижается и через 6 часов достигает уровня интактных животных (таблица 8).

Поскольку пик пролиферативной активности приходится на ночные часы, естественно было предположить, что оптимальное время приема витамина А - 23 часа. Опыты по изучению суточного ритма пролиферативной активности эпидермиса у лабораторных животных, получавших масляный раствор ретинола пальмитата перорально, подтвердили это предположение. Ретинола пальмитат, вводимый в 23 часа, наиболее активно стимулирует деление клеток эпидермиса (таблица 9).

И, наконец, данные клинических испытаний показывают, что время приема масляного раствора ретинола пальмитата 23 часа является наиболее оптимальным (таблица 10).

Пример 5.

В клинических испытаниях участвовали молодые люди в возрасте от 15 до 20 лет с юношескими угрями, локализованными на коже лица. Все больные получали один раз в день масляный раствор ретинола пальмитата в дозе 300000 МЕ/сут. Наилучший эффект достигался, когда прием препарата приходился на время 23 часа.

Клинические испытания, подтверждающие, что ретинола пальмитат в больших дозах (300000 МЕ/сут) действует эффективнее, чем в небольших (до 100000 МЕ/сут).

В соответствии с дерматотропным действием препарата, а именно со способностью воздействовать на процессы ороговения, функцию сальных желез и процессы регенерации, ретинола пальмитат применяют при трех основных группах заболеваний - с нарушением ороговения (I), с нарушением салоотделения (II) и нарушением целости кожи (III).

Пример 6.

1. Заболевания с нарушением процессов ороговения: ихтиозы, ихтиозиформные эритродермии, псориаз, ладонно-подошвенные кератодермии и пр.

Группа больных дерматозами с нарушением процессов ороговения состояла из 73 человек в возрасте от 4 месяцев до 42 лет. У всех больных ранее проводимое лечение ретинола ацетатом, аевитом и ретинола пальмитатом в дозе до 100000 МЕ/сут у взрослых было мало эффективно.

Ретинола пальмитат вызывал улучшение при ихтиозах при условии, что начальная доза препарата достаточна высока, не менее 300000 МЕ/сут у взрослых и 5000 МЕ/кг/сут у детей. Продолжительность курса лечения - до 12 недель. (таблица 11). Препарат переносился хорошо. Из побочных эффектов отмечалась сухость губ у двух больных, из них у одного сухость конъюнктивы.

II. Заболевания с нарушением процессов салоотделения: папулозно- пустулезные угри, конглобатные угри.

В группу пациентов с нарушением процессов салоотделения вошли 37 человек. Предыдущее лечение малыми дозами ретинола пальмитата было мало эффективно. В этой группе больных наилучший эффект был достигнут при лечении папуло-пустулезных угрей, при конглобатных угрях эффект несколько ниже (Таблица 11). Препарат в высоких дозах переносился больными хорошо, в течение первого месяца у всех пациентов возникала реакция обострения, которая проходила самостоятельно без прекращения лечения.

III. Заболевания, связанные с нарушением целости кожи.

При заболеваниях с нарушением целости кожи наилучшие результаты достигнуты при послеоперационном назначении препарата (таблица 11, операционные раны), также отмечено интенсивное заживление эрозий (таблица 11, эрозии). У большинства больных буллезным эпидермолизом под влиянием высоких доз ретинола пальмитата был получен устойчивый клинический эффект (таблица 11, булезный эпидермолиз). Нежелательные побочные явления: зуд, сухость кожи и слизистых, хейлит и др. отмеченные у небольшого числа больных, связаны с передозировкой препарата и требовали коррекции дозы ретинола пальмитата. В этих случаях больным назначали препарат в дозе 200000 МЕ/сут.

Исследования, подтверждающие, что раствор ретинола пальмитата можно успешно применять при химиотерапии онкологических больных для снижения риска побочных эффектов.

Клинические испытания показали выраженное протекторное действие ретинола пальмитата на лейкопоэз в условиях комбинированной цитостатической терапии.

Пример 7.

Группа больных злокачественными новообразованиями, имевших лейкопении в результате проведения комбинированной химиотерапии, состояла из 50 человек. Пациенты имели различные диагнозы: лимфогранулематоз (ЛГР), неходжкинские лимфомы (НХЛ), рак молочной железы (РМЖ), злокачественная меланома (МЛБ), возраст больных от 15 до 74 лет. Больные поступали в клинику для прохождения повторного курса цитостатической терапии, но при этом после первого курса химиотерапии имели такой уровень лейкоцитов в крови, что повторный курс цитостатической терапии проводить было невозможно. Прием ретинола пальмитата в дозе 300000 МЕ/сут один раз в день (после ужина) длился 6 дней до начала цикла химиотерапии, при этом количество лейкоцитов увеличивалось в среднем с 2,7 x 10⁹/л до 4,4 x 10⁹/л, что позволило приступить ко второму циклу лечения.

Схемы лечения больных различны: применяли в основном комбинации цитостатиков, таких как рубомицин, циклофосфан, винкристин, цисплатин и другие. Прием ретинола пальмитата в дозе 300000 МЕ/сут один раз в день (после ужина) продолжался в течение всего курса химиотерапии.

Достаточно отчетливый протекторный в отношении лейкопении эффект ретинола пальмитата виден из таблицы 12.

Из 50 больных у 7 (14%) протекторный эффект ретинола пальмитата отсутствовал, причем отсутствие эффекта связано с особой отягощенностью клинического фона (поражения печени, почек и костного мозга).

Несмотря на то, что действие ретинола пальмитата изучалось в весьма отягощенной основной и сопутствующей патологией группе больных злокачественными новообразованиями и в условиях воздействия комбинаций цитостатиков, признаков гипервитаминоза А и других серьезных побочных эффектов не наблюдалось.

Пример 8.

В другой группе больных со злокачественными опухолями половых органов при химиотерапевтическом лечении использовали цитостатик - тиофосфамид (синоним Тио-Тэф). Применение последнего, как правило, сопровождается угнетением функции красного костного мозга. Это проявляется анемией, лейкопенией и тромбоцитопенией. Степень выраженности побочного действия цитостатика зачастую является фактором, ограничивающим лечебную дозу препарата, и в конечном счете определяющим эффективность консервативного лечения. Ретинола пальмитат обладает способностью стимулировать кроветворение, усиливая эритро-, гранулоцито- и лимфоцитопоэз.

Пациенты, получающие ретинола пальмитат, субъективно легче переносят лечение тиофосфамидом. У них не развиваются или менее выражены признаки угнетения функции органов системы крови, не нарастают признаки иммунодепрессии, улучшается сумеречное зрение.

Результаты применения ретинола пальмитата оценивали по состоянию сумеречного зрения, состоянию крови, содержанию лимфоцитов, по туберкулиновой пробе.

Пациенты получали ретинола пальмитат в дозе 300000 ME один раз в день на ночь, курс введения начинали за 4-5 дней до начала химиотерапии и заканчивали через 10-15 дней после ее отмены.

Полученные данные представлены в таблице 13.

Сумеречное зрение является непрямым показателем степени насыщенности организма витамином А. У больных злокачественными опухолями порог световой чувствительности значительно снижен. По мере насыщения организма ретинола пальмитатом этот показатель возрастает, иногда в десятки раз. У больных, получавших тио-фосфамид на фоне ретинола пальмитата не развиваются или выражены в меньшей степени признаки анемии, лейко- и лимфоцитопении. У больных раком яичника снижена и в процессе лечения тиофосфамидом еще более угнетается реакция на внутрикожное введение туберкулина. У лиц, получающих цитостатик на фоне применения ретинола пальмитата, этого не происходит: реже встречаются отрицательная и парадоксальная (выраженный отек предплечья) реакции.

Обнаруженные свойства ретинола пальмитата в дозе 300000 МЕ/сут позволяют рассматривать препарат как стимулятор кроветворения при химиотерапии онкологических больных.

Таким образом, заявляемое изобретение защищает положения, перечисленные ниже.

Создание стабильного раствора ретинола пальмитата.

Ретинола пальмитат и антиоксиданты БОТ и БОА растворяют в растительном рафинированном дезодорированном (кукурузном, соевом или рапсовом) масле, с пониженным содержанием ненасыщенных жирных кислот и ограниченным содержанием перекисей и кислот (кислотное число от 0,1 до 0,5 мг КОН/г; перекисное - в пределах от 5 до 10 ммоль/кг); полученный раствор укупоривают во флаконы, заполненные инертным газом, вскрытый флакон хранят не более 14 дней с момента вскрытия.

Препарат эффективен в терапии таких заболеваний как себорея, врожденная пахионихия, фолликулярный кератоз. Способ применения и дозы стабильного раствора ретинола пальмитата в растительном масле при лечении этих и других тяжелых заболеваний кожи следующий: дозы от 100000 до 300000 МЕ/сут, время приема поздно вечером или рано утром в течение 4-12 недель.

Препарат может быть с успехом использован для снижения риска побочных явлений при химиотерапии онкологических больных. С этой целью раствор ретинола пальмитата в растительном масле вводят перорально из расчета 4300 ME на 1 кг веса больного, но не более 300000 ME в сутки; курс введения начинают за 3-5 дней до начала цитостатической терапии и заканчивают через 10-15 дней после ее отмены.

Изобретение иллюстрируется примерами.

Пример 9.

55,1 г ретинола пальмитата (в пересчете на 100% препарат) (ФС 42-2229-94), 1 г бутилокситолуола (БОТ) (ФС 42-3460-97) и 0,5 г бутилоксианизола (БОА) (ТУ 6-09-3746-74) растворяют в соевом масле (кислотное число 0,3 мг КОН/г; перекисное число 6 ммоль/кг). Полученный раствор фасуют во флаконы, флаконы заполняют азотом и укупоривают. Вскрытый флакон хранят не более 14 дней с момента вскрытия.

Испытано в примерах 1 - 6.

Пример 10 проводят аналогично примеру 9. Вместо масла соевого используют масло рапсовое (кислотное число 0,3 мг КОН/г; перекисное число 7 ммоль/кг).

Испытано в примерах 7 и 8.

Таким образом, получен стабильный раствора ретинола пальмитата. Препарат эффективен в терапии некоторых кожных заболеваний, для лечения которых он ранее не использовался. При правильном его применении, учитывающем механизм биологического действия ретинола пальмитата, эффективность лекарственного средства повышается. Препарат может успешно применяться при химиотерапии онкологических больных для снижения развития риска побочных эффектов.

Источники информации

1. Патент Великобритании N 1521913, МКИ² A 61 К 31/595, публ. 16 авг. 1978 г.

2. Авт. св. Чехословакии N 172543, МКИ² A 61 К 31/00, публ. 29.04.76.

3. Машковский М.Д. Лекарственные средства, ч. II. - С.3 - М, Медицина, 1996 г.

4. Патент ФРГ N 3827467, МКИ⁴ A 61 К 7/06, публ. 23.02.89.

5. Шахтмейстер И.Я., Покрышкин В.И., Писаренко М.Ф. и др. Ароматические ретиноиды в терапии дерматозов. // Вестн. дерматол. 1984. - N 3.-С. 42-45.

6. Bruckner-Tuderman L, Sigg C., Geiger J. M., Gilardi S. Acitretin in symptomatic therapy for severe recessive X-linked ichthyosis. // Arch. Dermatol. 1988. -V. 124.-P. 529-532.

7. Першин Т. Н. Методы экспериментальной химиотерапии - М.: Медицина, 1971, -539 с.

8. Сергеев А.В. Корреляция биохимических и иммунологических показателей при раке толстой кишки оптимальными дозами ретинилацетата и аскорбиновой кислоты. Бюл.эксп.биологии и мед. 1983, N 9. - С. 90 - 93.