ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

способ одновременного детектирования антител класса g к антигенам возбудителей torch-инфекций с использованием иммуночипа - заявка на патент 2014111098


Классы МПК: G01N33/53   (2006.01)
Автор: Никитина Анна Викторовна (RU),
Марданлы Сейфаддин Гашим оглы (RU)
Заявитель: Марданлы Сейфаддин Гашим оглы (RU)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ одновременного детектирования антител класса G к антигенам возбудителей TORCH-инфекций с использованием иммуночипа, включающий иммобилизацию на дне лунки микропланшета иммуноспецифических компонентов в виде смесей рекомбинантных аналогов антигенов краснухи, токсоплазмы, цитомегаловируса, вируса простого герпеса 1 и 2 типов, а также внутренних контролей, представленных IgG-антителами человека, внесение в лунку исследуемых образцов, проведение иммунной реакции с биотинилированными антителами, добавление конъюгата стрептавидина с фосфоресцентной меткой с последующим детектированием эмиссии фосфоресценции метки, связанной с образовавшимися комплексами, отличающийся тем, что в лунке микропланшета, используемого в качестве твердой фазы, иммобилизуют иммуноспецифические компоненты в виде внутренних калибраторов и смеси антигенов для каждого из пяти возбудителей на дне лунки, затем в лунку добавляют реакционный раствор вторых иммуноспецифических компонентов, содержащий биотинилированные моноклональные антивидовые антитела для получения иммунных комплексов, меченных биотином на дискретных микрообластях, добавляют раствор конъюгата стрептавидина с Pt-копропорфирином для образования фосфоресцирующих биотин-стрептавидиновых комплексов на микрообластях на дне лунки микропланшета, детектируя при этом эмиссию фосфоресценции метки последовательным сканированием каждой дискретной микрообласти сфокусированным лазерным лучом.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве твердой фазы иммуносорбента используется полистироловый микропланшет из низко люминесцирующего сорта пластика.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что дискретные микрообласти наносят на дно лунки микропланшета в виде по крайней мере двух микрозон.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что дискретные микрообласти наносят на дно лунки микропланшета в виде 16 микрозон.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве первого иммуноспецифического компонента используются смеси рекомбинантных антигенов.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве исследуемого образца для проведения анализа может использоваться как сыворотка крови, так и сухие пятна цельной крови.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве второго иммуноспецифического компонента используются моноклональные мышиные антитела.

8. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве антигенов применяют p30[SAG1], p29[GRA7], p35[GRA8] для выявления антител к Toxoplasmagondii, gB, Рр150 для выявления антител к ЦМВ, gG-1, gD-1 для выявления антител к ВПГ-1, gG-2, gD-2 для выявления антител кВПГ-2, Е1, Е2 для выявления антител к вирусу краснухи.

Наверх