Вирусы, например бактериофаги, их композиции, приготовление или очистка их: .регенерация или очистка – C12N 7/02

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложены способы очистки инактивированного вируса или фрагментированного вируса (варианты). Способы включают добавление препарата вируса к градиенту сахара и последующее центрифугирование для получения пиковой фракции. Затем осуществляют экстракцию пиковой фракции для получения очищенного вируса. При этом градиент сахара получают путем непрерывного ультрацентрифугирования первого и второго буферного раствора сахара. Причем первый буферный раствор сахара включает первый физиологический буфер, а второй буферный раствор сахара включает второй физиологический буфер, который является тем же или отличным от первого физиологического буфера. В одном варианте концентрация сахара в первом буферном растворе эквивалентна концентрации сахарозы от 35 до 50 мас.%, а концентрация сахара во втором буферном растворе эквивалентна концентрации сахарозы от 50 до 65 мас.%. При этом второй буферный раствор сахара имеет более высокую плотность, чем первый. В другом варианте способа плотность первого буферного раствора сахара составляет от 1,15 кг/л до 1,23 кг/л, а плотность второго - от 1,23 кг/л до 1,32 кг/л. Способы приводят к повышенному на 25% выходу вируса и минимизируют агрегацию вируса в сахарозной фракции пика. 2 н. и 24 з.п. ф-лы, 1 ил., 9 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Проводят гомогенизацию тканей зараженного растения в нейтральном буферном растворе на основе 2-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]этансульфоновой кислоты (HEPES) в концентрации 0,02-0,03 М с добавлением ингибиторов растительных ферментов иодайетата натрия и фенилметилсульфонилфторида. Добавляют сахарозу. Осветляют полученный экстракт. Обрабатывают осветленный экстракт 4-6% Тритоном Х-100 для отделения вирусных частиц от клеточных компонентов. Выделяют вирусные частицы из осветленного экстракта посредством дифференциального центрифугирования или ультрацентрифугирования. Способ позволяет увеличить выход вирусных частиц, очищенных от растительных примесей, из 100 г навески свежих листьев в 2-3 раза. 4 ил., 4 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и описывает способ получения очищенного концентрата вируса гриппа, способ включает микрофильтрацию вирусосодержащей аллантоисной жидкости на фильтрующих элементах 0,1-0,2 мкм с дальнейшей диафильтрацией фосфатным буферным раствором, содержащим 0,25-0,5 М натрия хлорида, ЭДТА или цитрат натрия, концентрирование вируса гриппа на мембранах с порогом отсечения 300-500 кДа с последующей диафильтрацией фосфатным буферным раствором, содержащим 0,25-0,5 М натрия хлорида, ЭДТА или цитрат натрия, 0,02-0,002% анионного детергента и ультрацентрифугирование в градиенте плотности сахарозы, приготовленной на фосфатном буферном растворе, содержащем 0,25-0,5 М натрия хлорида, ЭДТА или цитрат натрия и 0,02-0,002% анионного детергента. Технический результат изобретения заключается в получении высокоочищенного концентрата вируса гриппа с выходом более 80%, оптимизации технологического процесса. 3 пр., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Способ выделения вирусной нагрузки из образца панкреатина предусматривает: приготовление опытного образца панкреатина, низкоскоростное центрифугирование, отделение твердого отложения, первое ультрацентрифугирование, отделение первой целевой фракции, второе ультрацентрифугирование и выделение вирусной нагрузки. Низкоскоростное центрифугирование проводят при относительной центробежной силе 8000-15000×g. Первое ультрацентрифугирование проводят при относительной центробежной силе 50000-150000×g, а второе ультрацентрифугирование при 150000-300000×g. Изобретение может быть использовано при изготовлении препаратов панкреатина. 13 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу очистки вируса везикулярного стоматита (ВВС) из жидкости клеточной культуры. Способ включает осветление жидкости клеточной культуры низкоскоростным центрифугированием при скорости ниже 10000 об/мин или при помощи модуля объемного фильтрования, размер пор которого составляет от 1,0 мкм до 4,5 мкм, с получением ВВС в надосадочной жидкости. Фильтруют надосадочную жидкость через фильтр с отверстиями размером от 0,2 до 0,45 мкм, и получают ВВС в отфильтрованном растворе. Загружают содержащий ВВС отфильтрованный раствор на анионообменный мембранный адсорбер, уравновешенный первым буферным солевым раствором. Первый буферный солевой раствор обладает ионной силой от 100 мМ до 400 мМ. Элюируют ВВС из анионообменного мембранного адсорбера вторым буферным солевым раствором. ВВС элюируется с мембранного адсорбера при добавлении второго буферного солевого раствора в одну стадию. Концентрация соли в одностадийной элюции составляет от 500 мМ до 750 мМ. Собирают элюированные фракции, содержащие ВВС. Очищают ВВС проточной фильтрацией вдоль направления потока (ПФ) с использованием мембраны, предел пропускания по которой от 300 кДа до 1000 кДа и получают ВВС в концентрате. Фильтруют содержащий ВВС концентрат через фильтр с отверстиями размером от 0,2 до 0,22 мкм и получают ВВС в отфильтрованном растворе. Способ очистки не включает использование человеческих эмбрионов. Предложенное изобретение позволяет получить ВВС высокой степени очистки с высоким выходом. 12 з.п. ф-лы, 8 ил., 33 табл., 12 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу очистки рекомбинантных аденовирусов млекопитающих и человека. Способ включает накопление аденовируса в пермиссивной культуре клеток линии НЕК-293, сбор этих клеток, высвобождениие рекомбинантных аденовирусов за счет разрушения клеток путем перемораживания и их очистку. Используют рекомбинантный капсид-модифицированный аденовирус с модифицированным капсидным белком рlХ, несущим полисахарид-связывающий домен, который выбирают из группы, включающей целлюлозо-связывающий домен, декстран-связывающий домен. Производят посадку рекомбинантных капсид-модифицированных аденовирусов на полисахаридный носитель, который выбирают из группы, включающей целлюлозный носитель для связывания с целлюлозо-связывающим доменом, декстрановый носитель - для связывания с декстран-связывающим доменом. Инкубируют полученную смесь. Осуществляют процесс очистки, для чего полисахаридный носитель с аденовирусами осаждают центрифугированием, а полученный супернатант удаляют. Промывают осажденный полисахаридный носитель с аденовирусами промывочными буферами, после этого производят элюирование аденовирусов с полисахаридного носителя. Производят разделение полученной суспензии центрифугированием. Отбирают вируссодержащий супернатант и стабилизируют его. Предложенное изобретение позволяет получить биологически активный, хроматографически чистый и концентрированный аденовирусный препарат и сократить время его очистки. 14 з.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. В частности, описан способ стабилизации вируса ньюкаслской болезни для хранения в водном растворе в течение 6 месяцев или более при температуре от -30°С до -10°С. Способ предусматривает приготовление водного раствора, содержащего вирус ньюкаслской болезни и сахарозу или трегалозу. При этом раствор содержит десять частей на миллион или меньше каждого из восстановителей, антиоксидантов, хлорида натрия, декстрана, маннита, сорбита, твина, глутамата, полиэтиленгликоля, хлорида кальция, фосфатидилхолина, глицина и фосфата, имеет рН 7-9 и осмотическое давление 250-300 миллиосмоль. Способ позволяет сохранять вирус при температуре от -30°С до -10°С в течение 6 месяцев и более. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 11 табл., 12 пр.

Изобретение относится к области медицины и касается способа получения живой культуральной гриппозной вакцины. Сущность изобретения включает способ получения вируссодержащей субстанции путем культивирования одного из холодоадаптированных реассортантов вируса гриппа с посевной дозой, имеющей множественность заражения не менее 0,0001 ЭИД₅₀/кл в культуре клеток MDCK на микроносителях, имеющих концентрацию не менее 1 г/л, с использованием в качестве материала микроносителей пористого полипропилена, в поддерживающей бессывороточной питательной среде, содержащей протеолитический фермент в количестве 0,25-50,0 мкг/мл и стабилизирующую добавку, включающую сорбит, или сахарозу, или пептон из сои в концентрации 0,5-4,0 мас.%, сбор вируссодержащей жидкости после культивирования осуществляют не менее 2-х раз при достижении специфической активности вируса гриппа перед каждым сбором вируссодержащей жидкости не менее 7,0 lg ЭИД₅₀/мл, концентрирование и очистку вирусной субстанции от балластных примесей, введение в очищенную субстанцию перед сушкой стабилизирующих добавок с использованием в качестве них или пролина, глицина, лактозы, глютаминовокислого натрия, сахарозы, желатина в конечной концентрации (1,5-5), (1,5-5), (1,5-10), (1,5-5), (5-30) и (1-10) мас.% соответственно, или сахарозы, желатозы и пептона из сои в конечной концентрации (1-8), (1-8) и (1-8) мас.% соответственно, или сорбита и желатозы в конечной концентрации (3-8) и (3-8) мас.% соответственно. Преимущество изобретения заключается в получении более термостабильной вакцины с более высоким выходом. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения вирионного антигена вируса клещевого энцефалита (КЭ) из антигенсодержащего материала, включающего, главным образом, антигенные частицы вируса КЭ мельче полноразмерных вирионов КЭ. Данный способ предусматривает центрифугирование антигенсодержащего материала, включающего, главным образом, антигенные частицы вируса КЭ мельче полноразмерных вирионов КЭ, с угловым ускорением не менее 15000 g. Предложенное изобретение позволяет получать вирионный антиген вируса КЭ из антигенсодержащего материала, включающего, главным образом, антигенные частицы вируса КЭ мельче полноразмерных вирионов КЭ. 1 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению питательных сред для культивирования клеток, и может быть использовано для значительного снижения вариаций продукции рекомбинантных белков, которые имеют место при культивировании клеток с использованием разных партий коммерчески доступного соевого гидролизата. Получают не содержащую животных белков среду для культивирования клеток путем дополнения сред, не содержащих животные белки, гидролизатом сои и дополнительно - биогенным амином в диапазоне 1-18 мг/л. Полученную среду используют для получения рекомбинантных белков, посредством процессов культивирования соответствующих клеток. Изобретение позволяет понизить контагиозность продукта, а также увеличить эффективность роста и продуктивность клеток. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 9 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и вирусологии. Способ размножения вируса предусматривает культивирование пермиссивных клеток на нерастворимом пористом носителе, их дальнейшее инфицирование вирусом с последующим его размножением внутри клеток, прикрепленных к носителю. При этом в качестве пермиссивных клеток используют клетки человека или животных, функцию инфицирующего вируса выполняет вирус, способный к репродукции в таких клетках, а в качестве нерастворимого пористого носителя применяют полимерный криогель с сообщающимися порами сечением 50-500 мкм. В результате реализации предлагаемого изобретения достигается эффект исключения нежелательного «забивания» пор носителя растущей культурой и клеточным дебрисом, обеспечивается большая универсальность способа в отношении типов пермиссивных клеток, более эффективно используются весь объем носителя и культуральная среда, снижается опасность нарушения стерильности, снижается себестоимость целевого продукта, повышается выход целевого вируса. Изобретение может быть использовано в прикладной вирусологии, производстве вакцин, нанобиотехнологии, молекулярной биологии и других областях науки и техники, где существует необходимость получения препаративных количеств вирусного материала. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к устройству для очистки вирусов и может быть использовано в микробиологической промышленности. Устройство включает последовательно размещенные катодный электродный сосуд, разделенные барьером катодную камеру накопления и анодную камеру накопления, анодный электродный сосуд. При этом катодный и анодный электродные сосуды отделены диализными пленками от катодной и анодной камер накопления соответственно. Между диализной пленкой, отделяющей анодную камеру накопления от анодного электродного сосуда, и анодным электродным сосудом введены последовательно расположенные буферная камера и блок геля агарозы с высокой степенью электроэндоосмоса. Изобретение позволяет снизить длительность электрофореза, получить высокоочищенные препараты вирионов флавивирусов. 4 з.п. ф-лы, 3 табл., 3 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа концентрации вирусов из жидких сред. Способ включает адсорбцию вируса на гидрогеле метакриловой кислоты в концентрации не менее 2,0 мг/мл, сорбции при рН 5,0 от 20 минут до 24 часов при температуре от 4°С до 22°С и далее комплекс вирус-сорбент центрифугируют и вирус элюируют. Преимущество изобретения заключается в сокращении числа стадий и уменьшении времени концентрирования. 1 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к области вирусологии. Способ включает получение культуры адгезивных клеток и их выращивание. Далее проводят инфицирование клеток вирусом и инкубацию клеток. При этом плотность клеток биомассы культуры клеток, выращенных до слияния, увеличивают по крайней мере в 1,3 раза до или после инфицирования клеток вирусом. Способ позволяет обеспечивать повышение продуцирования вируса в малом объеме клеточной культуры. Изобретение может быть использовано в медицине и ветеринарии. 12 з.п. ф-лы, 4 табл.