Иммобилизованные ферменты или ферменты на носителях, иммобилизованные микробные клетки или микробные клетки на носителях, их получение: ..с носителем, являющимся синтетическим полимером – C12N 11/08

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен ферментный биокатализатор в виде наноразмерных частиц для детоксификации фосфорорганических соединений in vivo. Биокатализатор представляет собой нековалентные полиэлектролитные комплексы. Данные комплексы состоят из полигистидин-содержащего полипептида со свойствами органофосфатгидролазы и блок-сополимера полиэтиленгликоля и полиглутаминовой кислоты в зарядовом соотношении фермент:блок-сополимер в диапазоне от 2:1 до 1:5. Изобретение обеспечивает существенное упрощение технологии получения биокатализатора, увеличение его каталитической эффективности, снижение вводимой дозы, уменьшение иммунотоксичного эффекта, а также повышение активности в реакциях гидролиза пестицидов и отравляющих веществ. 3 з.п. ф-лы, 6 пр.

Настоящее изобретение относится к области медицины и описывает способ получения биоспецифического гидрогелевого сорбента для выделения протеиназ путем радикальной полимеризации при комнатной температуре под действием окислительно-восстановительного катализатора полимеризации водного раствора, содержащего 0,1-0,9 мас.% овомукоида из белка утиных яиц, ацилированного хлорангидридом акриловой кислоты, 7,0-12,0 мас.% акриламида и 0,5-1,1 мас.% N,N'-метиленбисакриламида, с последующим измельчением образующегося гидрогеля и промыванием его бикарбонатным буфером до полного удаления непрореагировавших соединений, при этом полимеризацию проводят в присутствии 0,01-0,12 мас.% меркаптоуксусной кислоты. Способ обеспечивает повышение эффективности использования овомукоида - самого дорогого компонента сорбента. 1 табл., 14 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен фермент ловастатин эстераза, иммобилизованный на водонерастворимом твердом носителе, активированном бифункциональным агентом. При этом твердый носитель представляет собой модифицированную ди-(С _1-6алкил)амино-С_1-6 алкилцеллюлозу, в другом варианте твердый носитель представляет собой модифицированный амино-С_1-6алкил-три(С_1-6алкокси)силаном силикагель, а бифункциональный агент, активирующий твердый носитель, представляет собой O-сульфонат циануровой кислоты или галогенангидрид циануровой кислоты. В третьем варианте твердый носитель представляет собой агарозу, а бифункциональный агент представляет собой соединение, соответствующее формуле , как определено в формуле. Предложены способы (варианты) иммобилизации фермента ловастатин эстеразы на указанных водонерастворимых твердых носителях. Согласно способам при механическом перемешивании бифункциональный активирующий агент приводят в контакт с твердым носителем в растворителе. Активированный твердый носитель отделяют фильтрованием, затем сушат и суспендируют в водной смеси, содержащей фермент ловастатин эстеразу, с осуществлением иммобилизации фермента. Суспендированное вещество отделяют фильтрованием, промывают буферным раствором и сушат. Также предложен способ очистки симвастатина, включающий обработку раствора соли симвастатина, содержащего остаточное количество соли ловастатина, иммобилизованным ферментом ловастатин эстеразой, и предложен биокатализируемый проточный реактор со слоем для осуществления данного способа. Реактор включает корпус реактора (1) с внутренним пространством (2), соединенным с входом жидкости (3) и соединенным с выходом жидкости (4), во внутреннем пространстве находится перфорированная пластина, поддерживающая слой (5), содержащий фермент ловастатин эстеразу, иммобилизованный на водонерастворимом твердом носителе. Иммобилизованная ловастатин эстераза по изобретению проявляет по меньшей мере в 5 раз большую гидролитическую активность по отношению к ловастатину и солям ловастатина в присутствии симвастатина и солей симвастатина, чем к симвастатину и солям симвастатина. 17 з.п. ф-лы, 2 ил., 8 табл., 20 пр.

Изобретение относится к биохимии. Предложена композиция для получения полимерной пленки для иммобилизации микроорганизмов в биосенсорных анализаторах. Композиция состоит из поливинилового спирта и сополимера N-винилпирролидона. При этом исходные компоненты взяты в мольном соотношении ПВС:N-ВП 239:(9,0-56,2). Композиция обеспечивает высокую чувствительность биосенсора при стабильной работе до 40 сут. 1 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к фармакологии и гепатологии. В качестве гепатопротекторного средства используют иммобилизированную на низкомолекулярном водорастворимом полимере с помощью нанотехнологии электронно-лучевого синтеза гиалуронидазу. При использовании данного средства происходит не только стимуляция регионарных клеток-предшественников, но и существенное расширение пула родоначальных клеток «ткани-депо» (костного мозга), их мобилизация в периферическую кровь и направленный хоминг в пораженный орган. Это в свою очередь приводит к получению выраженных гепатопротекторных эффектов на фоне снижения риска развития осложнений. 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области химии полимеров, биохимии и медицины. Для получения биоспецифического полимерного сорбента для выделения протеиназ осуществляют радикальную полимеризацию водного раствора, содержащего 0,1-1,5 мас.% овомукоида из белка утиных яиц, ацилированного хлорангидридом акриловой или метакриловой кислоты, 7,0-20,0 мас.% гидрофильного мономера, состоящего из акриламида, метакриламида или N-винилпирролидона, и 0,7-15,0 мас.% бифункционального сшивающего агента. При этом в гидрофильный мономер дополнительно вводят N-этилбромид диметиламиноэтилметакрилат, взятый в количестве 45-55 мас.%, по отношению к массе гидрофильного мономера. Введение в состав гидрофильного мономера N-этилбромида диметиламиноэтилметакрилата приводит к повышению эффективности сорбции протеиназ из биологических жидкостей на 20-50%. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен иммобилизированный на водорастворимом фармакологически приемлемом полимере субтилизин, получаемый глубинной ферментацией бактерий вида Bacillus licheniformis. Иммобилизацию осуществляют путем воздействия ионизирующим излучением на водный раствор, содержащий субтилизин и фармакологически приемлемый полимер. Полимер выбирается из группы: полиэтиленоксид, поливинилпирролидон, полиакриламид, плюроник, декстран. Перед облучением реакционную смесь замораживают до (-20) - (-140)°С. Иммобилизированный субтилизин обладает антикоагулятным и тромболитическим свойствами и оказывает меньший токсический эффект. 3 з.п. ф-лы, 9 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, медицине, биологии, фармакологии. Биологически активное вещество (БАВ) растворяют в водном растворе полимера, имеющего концентрацию выше 10%, до концентрации насыщенного раствора. Полученную реакционную смесь облучают ионизирующим излучением. Второй вариант осуществления способа заключается в том, что БАВ растворяют в водном растворе полимера, затем смесь замораживают до температуры

(-20)-(-140°)С, после чего облучают ионизирующим излучением. Конъюгат БАВ - носитель, полученный предложенными способами, характеризуется тем, что БАВ выбран из группы: проинсулин, тирозил-2-аланил-глицил-фенилаланил-лейцил-аргинина диацетат, алкалаза, гиалуронидаза, соматотропин, а носитель, выбран из группы: полиэтиленоксид, поливинилпирролидон, декстран, плюроник, акриламид. Молекула БАВ соединена ковалентно, по меньшей мере, с одной молекулой полимера. Изобретение обеспечивает возможность иммобилизации на полимерном носителе тех водорастворимых БАВ, которые являются нестабильными, т.е. разрушаются при иммобилизации их другими способами полностью или почти полностью, а также увеличение доли сохраненного БАВ в тех случаях, когда при иммобилизации БАВ разрушается не полностью. 3 н. и 20 з.п. ф-лы, 34 ил., 3 табл.

Изобретение относится к быстрому способу получения фотореактивных полимеров и иммобилизации биомолекул на указанных полимерах. Описывается способ получения фотореактивных полимеров с последующей иммобилизацией молекул на них, включающий в себя: (а) воздействие на смесь из фотолинкера, полимера и растворителя микроволнового излучения, (b) промывание полимера соответствующим растворителем, с последующей сушкой при температуре окружающей среды, с получением фотореактивного полимера, (с) добавление биомолекулы, растворенной в соответствующем буфере, на фотореактивный полимер, (d) обработку смеси источником фотоэнергии в течение периода от 2 минут до 2 часов для иммобилизации молекулы на указанном полимере, и (е) промывание указанного полимера, имеющего иммобилизованную молекулу, в соответствующем буфере, с последующей сушкой указанного полимера при температуре окружающей среды, с получением фотореактивного полимера с иммобилизованными на нем молекулами. 21 з.п. ф-лы, 4 табл., 13 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Для иммобилизации липазы в качестве полиэлектролита используют полистиролсульфонат натрия. Иммобилизацию липазы проводят при массовом соотношении липаза:полистиролсульфонат натрия 1:1-100 и при рН 7,6-8,2, температуре 18-24°С в течение 10-20 минут. Ферментативная активность иммобилизованной липазы увеличена до 26 раз в сравнении с известной липазой (прототипом).

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для очистки животноводческих отходов и сточных вод. Способ предусматривает иммобилизацию липазы в полидиаллилдиметиламмоний хлориде при массовом соотношении липаза:полидиаллилдиметиламмоний хлорид 1:1-100 и при рН 7,6-8,2, температуре 18-24°С в течение 10-20 минут. Способ позволяет получить целевой продукт с повышенной ферментативной активностью.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для очистки животноводческих отходов и сточных вод. Способ предусматривает иммобилизацию липазы в смеси полидиаллилдиметиламмоний хлорида и полистиролсульфоната натрия, взятых в массовых соотношениях 1:0,3-1,0. Иммобилизацию липазы проводят при массовом соотношении липаза: смесь полидиаллилдиметиламмоний хлорида и полистиролсульфоната натрия 1:50-200 и при рН 9,0-11,0, температуре 18-24°С в течение 10-20 минут. Способ позволяет получить целевой продукт с повышенной ферментативной активностью.

Ферментативный катализатор в гранулированной форме может быть использован в любом подходящем процессе ферментативного превращения, в частности предназначен для гидролиза NYLON 66 при конверсии 2-гидрокси-4-метилтиобутиронитрила в 2-гидрокси-4-метилтиобутаноат аммония. Ферментативный катализатор не диспергируется в воде, включает внутреннее ядро с покрытием, толщина которого составляет от 100 до 250 микрон, и отношение размера ядра к толщине покрытия составляет от 3 до 15, а средний диаметр ядра - от 0,1 до 5 мм. Покрытие содержит ферментативный материал, полимер и агент поперечного сшивания. Получают катализатор распылением суспензии ферментативного материала, полимера и агента поперечного сшивания на ядро с образованием покрытия с толщиной от 100 до 250 микрон и отношением ядра к толщине покрытия от 3 до 15. Полученный ферментативный катализатор в гранулированной форме имеет больший период полураспада, по меньшей мере 30-70 ч, чем другие известные каталитические катализаторы. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может найти применение в медицине и ветеринарии при получении инъекционных препаратов иммобилизованных ферментов. Готовят раствор протеолитического фермента, преимущественно протосубтилина марок Г3Х, или Г10Х, или Г20Х в 0,05 М Na-фосфатном буферном растворе с рН 7,2-8,2. Полученный раствор очищают солевым осаждением балластных белков, последовательно вводя хлорид кальция и натрий фосфорнокислый, с последующим выдерживанием смеси при 8-10°С в течение 16-18 часов и фильтрованием выпавшего осадка через бумажный и мембранный фильтры. Полученный фильтрат дополнительно обессоливают, концентрируют и очищают ультрафильтрацией на гемодиализных колонках, при этом очистку проводят в две стадии, разводя концентрат дистиллированной водой до исходного объема и последующего повторного концентрирования. В полученный высокоочищенный ультрафильтрат протеаз вводят полиэтиленоксид с молекулярной массой 1500-4000 Да до соотношения фермент-носитель 1:(3-8). Смесь фермента с носителем подвергают повторной стерилизующей фильтрации через мембранный фильтр и облучают тормозным -излучением в дозе 0,5-1,0 Мрад. Изобретение обеспечивает получение стерильного апирогенного раствора иммобилизованных на полиэтиленоксиде протеаз с протеолитической активностью 80-120 ПЕ/мл. 3 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Микрочип представляет собой совокупность гелевых микроячеек на подложке из стекла, металла, полимера, керамики или композитного материала, внутри которых находятся иммобилизованные прокариотические или эукариотические клетки. Микроячейки с иммобилизованными клетками формируют с помощью гелеобразующего раствора, включающего глицерин. Клеточный микрочип используют для исследования живых клеток. Для этого клеточный микрочип инкубируют в присутствии маркера, регистрируют сигнал, например флуоресценцию клеток, и по сигналу оценивают жизнедеятельность клеток микрочипа. Использование микрочипа сохраняет жизнеспособность клеток, упрощает способ исследования живых клеток. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 5 ил.